MYSM1对星形胶质细胞活化的影响及其机制研究

发布时间：2023-04-11 20:47

　　星形胶质细胞在哺乳动物中枢神经系统(CNS)胶质细胞中约占90%。它们是大脑和脊髓的组成部分。在正常生理情况下,星形胶质细胞在神经发育、脑血流量调节,离子平衡,突触形成与功能,突触修剪,能量代谢中发挥重要作用。病理状态下,星形胶质细胞活化,在许多疾病和几乎所有形式的神经性疾病中发挥重要作用,包括重型脑损伤如中风和创伤性脑损伤(TBI),神经退行性疾病如阿尔茨海默氏病(AD)、帕金森氏病(PD)、肌萎缩侧索硬化症(ALS)等。然而,在应对免疫攻击、慢性神经退行性疾病或急性损伤时,星形胶质的功能将如何改变,我们仍知之甚少。2012年Zamanian等人发现皮下注射LPS诱导神经炎症与脑缺血诱发大脑中动脉闭塞这两种不同形式的脑损伤产生了至少两种类型的“活化型”星形胶质细胞,并提供新的标志以划定不同状态的活化型星形胶质细胞。2017年Liddelow等人将这两种不同类型的活化型星形胶质细胞分别命名为"A1"和"A2"。这个术语与巨噬细胞和小胶质细胞被命名"M1"和"M2"相似。巨噬细胞和小胶质表现出不只两个极化状态,同样,活化型星形胶质细胞也很可能有两个以上的极化状态,这将是未来研究的重要领域...

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中文摘要
Abstract
1.前言
2.材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂及配制
        2.1.3 仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 星形胶质细胞的分离纯化和鉴定
        2.2.2 RNA的提取及实时定量PCR(q RT-PCR)
        2.2.3 蛋白免疫印迹实验(Western Blot)
        2.2.4 Griess法检测NO含量
        2.2.5 荧光标记的 Aβ₄₂内吞实验
        2.2.6 星形胶质细胞条件培养基(ACM)与神经元共培养实验
        2.2.7 细胞慢病毒感染
        2.2.8 统计分析
3.结果
    3.1 不同因子对星形胶质细胞活化的影响
        3.1.1 星形胶质细胞纯度鉴定
        3.1.2 不同因子刺激后星形胶质细胞A1/A2 特异性转录因子的表达
        3.1.3 LPS促进星形胶质细胞分泌促炎细胞因子
        3.1.4 LPS刺激后星形胶质细胞对神经元的细胞毒性
        3.1.5 LPS刺激星形胶质细胞吞噬功能减弱
        3.1.6 IL-10 低表达(IL-10^tm1/tm1)星形胶质细胞A1/A2 特异性转录因子的表达
        3.1.7 IL-10^tm1/tm1星形胶质细胞分泌更多的炎性因子
        3.1.8 IL-10^tm1/tm1星形胶质细胞对神经元的细胞毒性
        3.1.9 IL-10^tm1/tm1星形胶质细胞吞噬功能降低
    3.2 MYSM1 对星形胶质细胞活化的影响
        3.2.1 LPS刺激后星形胶质细胞MYSM1 低表达
        3.2.2 MYSM1 基因敲除小鼠敲除效率检测
        3.2.3 MYSM1^-/-星形胶质细胞A1/A2 特异性转录因子的表达
        3.2.4 MYSM1^-/-星形胶质细胞分泌更多的促炎因子
        3.2.5 MYSM1^-/-星形胶质细胞对神经元的细胞毒性
        3.2.6 MYSM1^-/-星形胶质细胞吞噬功能降低
    3.3 MYSM1 对星形胶质细胞活化的机制研究
        3.3.1 LPS刺激星形胶质细胞后miR129 低表达
        3.3.2 MYSM1^-/-星形胶质细胞miR129 低表达
        3.3.3 miR129 沉默(shmiR129)的星形胶质细胞A1/A2 特异性转录因子的表达
        3.3.4 shmiR129 星形胶质细胞分泌的免疫相关因子
        3.3.5 shmiR129 星形胶质细胞对神经元的细胞毒性
4.讨论
5.结论
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3789722