敲除ptsG基因及共表达透明颤菌血红蛋白提高大肠杆菌SHMT产量
发布时间:2023-04-28 00:16
利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌BL21(DE3)的ptsG基因,得到ptsG基因缺失菌株BL21(DE3)ΔptsG。构建重组质粒,得到表达大肠杆菌丝氨酸羟甲基转移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)工程菌株BL21(DE3)/pET-glyA、BL21(DE3)ΔptsG/pET-glyA,及共表达SHMT和透明颤菌血红蛋白(Vitreoscilla hemoglobin,VHb)工程菌株BL21(DE3)ΔptsG/pET-SV。在LB培养基中,BL21(DE3)ΔptsG/pET-glyA菌株与BL21(DE3)/pET-glyA菌株生长情况没有明显差异,BL21(DE3)ΔptsG/pET-SV菌株稳定期的OD600 nm值比BL21(DE3)ΔptsG/pET-glyA菌株提高了21.3%,在LBG培养基中,稳定...
【文章页数】:7 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1 菌株与质粒
1.1.2 试剂、试剂盒与引物
1.1.3 培养基
1.2 仪器与设备
1.3 方法
1.3.1 ptsG基因敲除菌株的构建
1.3.2 表达载体及工程菌株的构建
1.3.3 菌株生长测定
1.3.4 工程菌诱导表达SHMT
1.3.5 SHMT表达水平及酶活力测定
1.4 数据统计分析
2 结果与分析
2.1 ptsG基因敲除
2.2 重组载体与工程菌株的构建
2.3 重组菌株生长曲线
2.4 工程菌株的诱导表达及酶活力分析
3 讨论
本文编号:3803359
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1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1 菌株与质粒
1.1.2 试剂、试剂盒与引物
1.1.3 培养基
1.2 仪器与设备
1.3 方法
1.3.1 ptsG基因敲除菌株的构建
1.3.2 表达载体及工程菌株的构建
1.3.3 菌株生长测定
1.3.4 工程菌诱导表达SHMT
1.3.5 SHMT表达水平及酶活力测定
1.4 数据统计分析
2 结果与分析
2.1 ptsG基因敲除
2.2 重组载体与工程菌株的构建
2.3 重组菌株生长曲线
2.4 工程菌株的诱导表达及酶活力分析
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本文编号:3803359
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