MAG2拴留复合体与ABA信号途径的相关性分析

发布时间：2023-08-26 02:38

　　高等植物种子积累大量的储藏蛋白质,为种子萌发提供氮源。在种子成熟过程中,种子储藏蛋白质(SSP)以前体形式在粗面内质网(rER)大量合成,通过囊泡运输转运到蛋白质储藏型液泡(PSV)中,在PSV中被加工成成熟形式储存起来。我们前期研究发现,拟南芥MAG2复合体定位在内质网上,在高尔基体到内质网逆向运输过程中运输囊泡在内质网膜上的拴留步骤发挥重要功能。MAG2复合体包含四个亚基,MAG2、MIP1、MIP2和MIP3。这些亚基的缺失突变体种子细胞的囊泡运输受阻,导致ER腔内积累大量的SSP前体,并引起ER stress。种子发育过程中,ABA信号通路和其他转录因子起关键调控作用。本研究以MAG2复合体亚基缺失突变体mip2-1、mag2-1、mip3-1单突变体和mag2-lmip3-1、mip2-1mip3-1双突变体以及ABA信号通路缺陷突变体abi5-7、pyl112458、snrk2.2/23/2.6、aba2-1为实验材料,初步探讨了种子成熟、休眠和萌发过程中ER-Golgi间囊泡运输与ABA信号通路之间的相关性。首先,通过对MAG2复合体亚基缺失单、双突变体生长发育过程的表型...

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 囊泡运输途径
        1.1.1 种子储藏蛋白质的运输途径
    1.2 ABA代谢途径
        1.2.1 ABA信号通路
    1.3 种子成熟和储藏物质调控机制
        1.3.1 种子成熟的调控
        1.3.2 储藏物质的调控
    1.4 种子休眠的调控
    1.5 种子萌发的调控
    1.6 研究目的与意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 抗体
    2.2 实验仪器
    2.3 实验试剂
    2.4 拟南芥植株杂交
    2.5 纯合双突变体突变体筛选
        2.5.1 叶片基因组DNA的提取
        2.5.2 PCR扩增检测
        2.5.3 凝胶电泳
    2.6 表型观察
        2.6.1 突变体初期生长情况观察
        2.6.2 突变体生长发育情况
        2.6.3 突变体种子表型
    2.7 突变体萌发率统计
        2.7.1 不同储存时间突变体种子的萌发率
        2.7.2 ABA和NaCl处理下突变体种子的萌发率
    2.8 Western Blot
        2.8.1 Western Blot实验步骤
        2.8.2 考马斯亮蓝染色、脱色
    2.9 RT-PCR
3 结果与分析
    3.1 MAG2拴留复合体双突变体制备与筛选
    3.2 MAG2拴留复合体亚基基因缺失对拟南芥的影响
        3.2.1 对拟南芥植物生长发育的影响
        3.2.2 对拟南芥种子发育的影响
        3.2.3 对拟南芥蛋白质运输的影响
        3.2.4 囊泡运输缺陷引起ER stress
        3.2.5 对拟南芥种子寿命的影响
        3.2.6 对植物对外界环境胁迫应答的影响
    3.3 MAG2复合体亚基缺失对种子成熟、休眠和萌发调控因子表达的影响
        3.3.1 对ABI3、ABI4和ABI5表达水平的影响
        3.3.2 对转录因子LEC1、LEC2和FUS3表达水平的影响
        3.3.3 对转录因子WRKY40、WRKY41、WRKY6的影响
    3.4 MAG2复合体与ABA信号途径的相关性
        3.4.1 ABA信号通路对MAG2复合体稳定性的影响
        3.4.2 ABA信号通路对蛋白质运输的影响
        3.4.3 ABA信号通路对种子寿命的影响
        3.4.4 MAG2复合体与ABA信号途径的相关性
讨论
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
附件



本文编号：3843788