人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡对巨噬细胞极化的影响

发布时间：2023-08-26 06:10

　　目的:探究人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡对巨噬细胞极化的影响。方法:Dil标记神经干细胞微囊泡,流式细胞仪和共聚焦显微镜观察THP-1巨噬细胞对微囊泡的内化;实时荧光定量PCR筛选微囊泡最适浓度;100 ng/m L脂多糖刺激THP-1细胞6 h后,微囊泡处理12 h,实时荧光定量PCR检测巨噬细胞炎性因子IL-1β,肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及IL-6的mRNA表达水平;微囊泡处理24 h,蛋白免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)和精氨酸酶1 (Arginase-1,Arg-1)蛋白表达水平;流式细胞术检测THP-1巨噬细胞M1极化表面标志CD86表达。结果:THP-1巨噬细胞在12 h和24 h均能明显内化神经干细胞微囊泡; 0.12μg/m L微囊泡具有最适调控作用;与未处理细胞相比,脂多糖处理后明显增加THP-1细胞IL-1β,TNF-α,IL-6等mRNA和i NOS蛋白,Arg-1蛋白表达差异无统计学意义(P <0.05);经神经干细胞微囊泡处...

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 NSC-MVs提取和浓度测定
    1.4 THP-1内化NSC-MVs
    1.5 THP-1巨噬细胞分组及相关指标检测
        1.5.1 实验分组
        1.5.2 实时荧光定量PCR检测THP-1巨噬细胞炎性因子mRNA表达
        1.5.3 蛋白质印迹法检测THP-1巨噬细胞i NOS和Arg-1蛋白表达
        1.5.4 流式细胞术检测THP-1巨噬细胞CD86表达
    1.6 统计学分析
2 结果
    2.1 巨噬细胞形态及内化NSC-MVs观察
    2.2 NSC-MVs抑制巨噬细胞炎症因子表达
    2.3 NSC-MVs抑制巨噬细胞M1极化蛋白表达
3 讨论



本文编号：3844103