高效羽毛降解菌株的筛选鉴定及其降解机制的研究

发布时间：2024-05-15 04:16

　　全球每年约产生数百万吨的羽毛废弃物,大多数没有被合理回收利用,不仅产生环境污染,同时对羽毛这一富含高蛋白的生物资源造成极大的浪费。因此,废弃羽毛的回收利用越来越受到人们的关注。本文从微生物的角度出发,探索利用生物法降解废弃羽毛,将其转化为高附加值的饲料蛋白资源,同时探索相关菌株高效降解羽毛的具体机制。本文首先进行了角蛋白酶的异源表达,成功获得三株产角蛋白酶的枯草芽孢杆菌工程菌株,通过发酵对比其中B.subtilis WB600-p MA5q-ker K的角蛋白酶活最高,达到982.26U/m L,但随后进行的实验表明单一的角蛋白酶并不能降解天然羽毛,需要还原剂和角蛋白酶共同作用。在此基础上,课题组通过大量的分离筛选从家禽羽毛废弃物长期堆积的土壤中获得一株新的羽毛降解微生物,该菌能够在36小时内完全降解鸡羽毛(包括羽毛轴)。对该菌株从形态学,生理生化水平以及分子水平对该菌株进行了表征和鉴定,最终将筛选的高效降解羽毛降解菌株命名为Streptomyces sp.SCUT-3。随后对SCUT-3降解羽毛产物在动物、植物和微生物中进行了初步应用试验,羽毛降解产物能够部分替代鱼粉作为动物饲料蛋白...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2-1角蛋白酶酶活测定酪氨酸标准曲线（660nm）

第二章角蛋白酶在B.subtilisWB600中的克隆与表达23出分离胶时停止；（4）染色：用刮胶板将玻璃板撬开取出胶块，切去浓缩胶并用蒸馏水洗涤，随后加入考马斯亮蓝R-250染色液染色约30min；（5）脱色：将考马斯亮蓝R-250染色液回收并用蒸馏水洗涤3遍，加入脱色液后稍微....

图2-2三种角蛋白酶目的基因电泳结果

华南理工大学硕士学位论文2440℃水浴中预热2min后，混匀后于40℃中水浴反应20min。反应结束后，加入200μL0.4M的TCA。随后，于12000rpm离心5min后，弃沉淀，并取100μL上清液加入到1.5mL的离心管中，加入100μL福林酚试剂和500μL0.4M碳酸....

图2-3转化子菌落PCR电泳结果

第二章角蛋白酶在B.subtilisWB600中的克隆与表达25图2-3转化子菌落PCR电泳结果。1和2为pMA5q空载；3-5为pMA5q-kerA；6-8为pMA5q-kerC；9-11为pMA5q-kerKFigure2-3PCRelectrophoresisresults....

图2-4聚丙烯酰胺凝胶电泳结果

第二章角蛋白酶在B.subtilisWB600中的克隆与表达25图2-3转化子菌落PCR电泳结果。1和2为pMA5q空载；3-5为pMA5q-kerA；6-8为pMA5q-kerC；9-11为pMA5q-kerKFigure2-3PCRelectrophoresisresults....

本文编号：3973890