四溴双酚A对人体正常肝细胞（L02）的毒性作用及机理
发布时间：2024-12-17 22:03
四溴双酚A(TBBPA)具有良好阻燃性、耐热性,广泛应用于电器、家具、塑料和电子产品中。TBBPA的大量生产使用,产品废弃之后可通过多种途径释放到环境中,土壤、水体沉积物和大气等环境介质以及生物体内均检出TBBPA的存在。为探究TBBPA对人体健康的危害,选取人体正常肝细胞L02细胞作为实验受体,研究TBBPA对L02细胞的毒性作用。结果显示,TBBPA可以改变L02细胞形态。随着TBBPA浓度的增加,L02细胞数量减少,活性降低。与对照组相比,40μM TBBPA处理L02细胞12 h后,ROS浓度升高2.8倍,GSH含量降低到0.24倍,GSSG含量升高2.3倍,细胞的抗氧化能力减弱。MDA含量增加2.9倍,细胞处于氧化应激状态。尾部DNA相对含量比对照组增加了6.5倍,表明细胞DNA被损伤。实验结果表明,细胞暴露于5-40μM TBBPA 48 h后,JC-1单体/聚合物比例从1.36±0.07降低到0.44±0.07。40 μM TBBPA处理48 h后,mRNA表达水平与对照组比较,Bcl-2降低0.53±0.04,Bax升高3.15±0.08,Caspase-9升高4.09±...
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 前言
1.1 课题来源
1.2 TBBPA的概述
1.3 TBBPA的理化性质
1.4 TBBPA的污染现状
1.4.1 土壤中TBBPA的污染状况
1.4.2 水环境中TBBPA的污染状况
1.4.3 大气中TBBPA的污染状况
1.4.4 生物体中的TBBPA污染状况
1.5 TBBPA毒理学研究
1.5.1 TBBPA的内分泌干扰毒性
1.5.2 TBBPA的神经毒性
1.5.3 TBBPA的生殖发育毒性
1.5.4 TBBPA的肝毒性
1.6 研究内容、目的和意义
1.6.1 研究内容
1.6.2 研究目的和意义
第2章 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞来源
2.1.2 主要实验仪器
2.1.3 主要实验试剂
2.1.4 TBBPA溶液配制
2.1.5 L02细胞培养
2.2 L02细胞形态变化的测定
2.3 L02细胞存活率的测定
2.4 L02细胞内ROS含量的测定
2.5 L02细胞内MDA含量的测定
2.6 L02细胞内GSH含量的测定
2.7 L02细胞内GSSH含量的测定
2.8 L02细胞凋亡率的测定
2.9 L02细胞内DNA损伤的测定
2.10 L02细胞线粒体膜电位的测定
2.11 L02细胞内相关基因表达的测定
2.12 L02细胞内蛋白表达变化的测定
2.13 数据分析
第3章 TBBPA对L02细胞毒性效应的研究
3.1 前言
3.2 实验设计
3.2.1 细胞系
3.2.2 TBBPA溶液配制
3.2.3 指标测定
3.2.4 数据处理及分析
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 TBBPA对L02细胞形态影响
3.3.2 TBBPA对细胞活性影响
3.3.3 TBBPA对细胞内活性氧含量的影响
3.3.4 TBBPA对细胞内MDA含量的影响
3.3.5 TBBPA对细胞内GSH含量的影响
3.3.6 TBBPA对细胞内GSSG含量的影响
3.3.7 TBBPA对细胞内DNA损伤的影响
3.4 本章小结
第4章 TBBPA通过线粒体通路诱导L02细胞凋亡
4.1 前言
4.2 实验设计
4.2.1 细胞系
4.2.2 TBBPA溶液配制
4.2.3 指标测定
4.2.4 数据处理及分析
4.3 实验结果与讨论
4.3.1 TBBPA对Bcl家族基因表达的影响
4.3.2 TBBPA对Caspase级联家族基因表达的影响
4.3.3 TBBPA对线粒体膜电位的影响
4.3.4 TBBPA对细胞凋亡的影响
4.4 本章小结
第5章 TBBPA诱导L02细胞凋亡的分子调控机制
5.1 前言
5.2 实验设计
5.2.1 细胞系
5.2.2 染毒液配制
5.2.3 指标测定
5.2.4 数据处理及分析
5.3 结果与讨论
5.3.1 NAC预处理对L02细胞内氧化应激水平影响
5.3.2 NAC预处理对L02细胞凋亡水平的影响
5.3.3 NAC预处理对L02细胞MMP的影响
5.3.4 TBBPA对L02细胞内Nrf2通路基因表达的影响
5.4 本章小结
第6章 结论与展望
6.1 结论
6.2 展望
参考文献
致谢
硕士期间发表的论文
本文编号：4016597
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
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摘要
Abstract
第1章 前言
1.1 课题来源
1.2 TBBPA的概述
1.3 TBBPA的理化性质
1.4 TBBPA的污染现状
1.4.1 土壤中TBBPA的污染状况
1.4.2 水环境中TBBPA的污染状况
1.4.3 大气中TBBPA的污染状况
1.4.4 生物体中的TBBPA污染状况
1.5 TBBPA毒理学研究
1.5.1 TBBPA的内分泌干扰毒性
1.5.2 TBBPA的神经毒性
1.5.3 TBBPA的生殖发育毒性
1.5.4 TBBPA的肝毒性
1.6 研究内容、目的和意义
1.6.1 研究内容
1.6.2 研究目的和意义
第2章 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞来源
2.1.2 主要实验仪器
2.1.3 主要实验试剂
2.1.4 TBBPA溶液配制
2.1.5 L02细胞培养
2.2 L02细胞形态变化的测定
2.3 L02细胞存活率的测定
2.4 L02细胞内ROS含量的测定
2.5 L02细胞内MDA含量的测定
2.6 L02细胞内GSH含量的测定
2.7 L02细胞内GSSH含量的测定
2.8 L02细胞凋亡率的测定
2.9 L02细胞内DNA损伤的测定
2.10 L02细胞线粒体膜电位的测定
2.11 L02细胞内相关基因表达的测定
2.12 L02细胞内蛋白表达变化的测定
2.13 数据分析
第3章 TBBPA对L02细胞毒性效应的研究
3.1 前言
3.2 实验设计
3.2.1 细胞系
3.2.2 TBBPA溶液配制
3.2.3 指标测定
3.2.4 数据处理及分析
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 TBBPA对L02细胞形态影响
3.3.2 TBBPA对细胞活性影响
3.3.3 TBBPA对细胞内活性氧含量的影响
3.3.4 TBBPA对细胞内MDA含量的影响
3.3.5 TBBPA对细胞内GSH含量的影响
3.3.6 TBBPA对细胞内GSSG含量的影响
3.3.7 TBBPA对细胞内DNA损伤的影响
3.4 本章小结
第4章 TBBPA通过线粒体通路诱导L02细胞凋亡
4.1 前言
4.2 实验设计
4.2.1 细胞系
4.2.2 TBBPA溶液配制
4.2.3 指标测定
4.2.4 数据处理及分析
4.3 实验结果与讨论
4.3.1 TBBPA对Bcl家族基因表达的影响
4.3.2 TBBPA对Caspase级联家族基因表达的影响
4.3.3 TBBPA对线粒体膜电位的影响
4.3.4 TBBPA对细胞凋亡的影响
4.4 本章小结
第5章 TBBPA诱导L02细胞凋亡的分子调控机制
5.1 前言
5.2 实验设计
5.2.1 细胞系
5.2.2 染毒液配制
5.2.3 指标测定
5.2.4 数据处理及分析
5.3 结果与讨论
5.3.1 NAC预处理对L02细胞内氧化应激水平影响
5.3.2 NAC预处理对L02细胞凋亡水平的影响
5.3.3 NAC预处理对L02细胞MMP的影响
5.3.4 TBBPA对L02细胞内Nrf2通路基因表达的影响
5.4 本章小结
第6章 结论与展望
6.1 结论
6.2 展望
参考文献
致谢
硕士期间发表的论文
本文编号：4016597
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