一株新型E亚群禽白血病病毒的分离与鉴定

发布时间：2025-02-11 17:55

　　禽白血病(avian leukosis,AL)是指由反转录病毒科甲型反转录病毒属的禽白血病病毒(avian leucosis viruses,ALVs)引起的以禽类造血组织中某些细胞成分过度增生为主的一类可传染的肿瘤性疾病。ALVs为线性的单股正链RNA病毒,基因组长约7.0-7.8kb,基因组两端有长末端重复序列(LTR),为非编码区,中间为含有5’-gag–pol-env-3’顺序的结构基因,可编码多种蛋白。2019年,在没有外源性禽白血病病毒和任何其他致肿瘤病毒感染的情况下,从江苏一家商品蛋鸡场中发现了一起疑似禽白血病的肿瘤病例。本研究对该病例进行了病毒检测,进而对检测到的病毒做分离鉴定、全基因组序列测定与比较分析,确定引起该病的病原为一株重组E亚群禽白血病病毒(ALV-E)。本研究共分三部分:一、病料收集与病毒检测2019年12月,江苏一家蛋鸡场发生一起肿瘤性传染病,发病率为40%,病死率为10%,剖检时发现肝脏上有肿瘤。本研究设计了马立克病毒、禽白血病病毒、禽戊型肝炎病毒、网状内皮组织增生症病毒等鸡致肿瘤病毒的特异性检测引物,对可能引起该病的病原进行了检测。PCR检测和扩增产物...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1 ALV的基因组模式图

ALVs为线性的单股正链RNA病毒,基因组长约7.0-7.8kb,为二倍体,含有两段相同的RNA(Coffinetal.,1982)。病毒粒子中的RNA的单体结构近似于真核生物mRNA,但不具备感染能力。基因组两端有长末端重复序列(LTR),不能够编码蛋白质。中间为含有5’-....

图3-1临床样品的病理和组织病理学病变。(A)是胆囊破裂的照片,(B)是肝脏肿瘤,(C)是卵巢萎缩,(D)是肝脏肿大和出血

该批病例临床表现为抑郁、食欲不振和消瘦的症状。剖检时发现腹腔充满血水,肝脾肿胀并伴有肿瘤,部分病死鸡出现胆囊破裂和卵巢的萎缩的症状(图3-1),发病率为40%。3.1.2病料的PCR检测结果

图3-2 ALV检测结果电泳图

PCR检测的结果显示,禽戊型肝炎病毒,网状内皮组织增生病毒、马立克氏病毒和腺病毒等都为阴性(图略),测序结果显示有且仅有一种内源性禽白血病病毒的感染。目的条带的位置为302bp,电泳结果如图3-2所示:3.2病毒分离鉴定

图3-3禽白血病病毒的电子显微镜照片(150000×)

感染病毒的CEF细胞上清在经过超速离心后,在透射电子显微镜下观察病毒颗粒。我们观察到病毒粒子为球形,有囊膜,直径约为100nm左右,将该毒株命名为JS1208。电镜照片如图3-3所示:3.2.3JS1208毒株gp85原核表达及单因子血清的制备

本文编号：4033636