线粒体对血小板膜蛋白GPIbα酶切的调控作用

发布时间：2025-03-18 05:00

　　 目的:探讨线粒体对血小板膜蛋白GPIbα酶切的调控作用和机制。方法:分离健康志愿者外周静脉血血小板,选择破坏或保护血小板线粒体的功能的羰基氰-3-氯苯腙(CCCP)和环胞素A(CsA)、抑制膜蛋白GPIbα酶切的金属蛋白酶抑制剂GM6001、降低细胞内活性氧(ROS)水平的抗氧化剂NAC分别与洗涤血小板共同孵育,应用流式细胞术检测受刺激后血小板线粒体功能的变化对膜蛋白GPIbα酶切的影响。结果:CCCP诱导线粒体内膜两侧膜电位去极化,直接破坏线粒体的呼吸功能;血小板GPIbα的酶切检测发现GPIbα发生酶切,实验结果具有统计学意义。这提示当血小板线粒体功能受损伤时,会伴随出现GPIbα酶切现象;用CsA保护线粒体功能后,血小板GPIbα酶切现象被明显的抑制,实验结果具有统计学意义;而GM6001可以抑制GPIbα的酶切现象,但不影响线粒体的功能,实验结果具有统计学意义。这提示,血小板GPIbα的酶切在线粒体受到了调控。酶切调控酶ADAM17位于线粒体下游的信号通路上,用NAC抑制细胞内出现的氧化损伤,检测血小板受体的酶切变化发现,NAC可以有效地抑制血小板受体的酶切现象,并呈浓度梯度依...

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【文章目录】：
材料和方法
    入组样本
    试剂与仪器
    洗涤血小板的制备
    血小板P-selectin表达的流式细胞术分析
    血小板线粒体膜电位变化的流式细胞术分析
    血小板膜糖蛋白GPIbα酶切的流式细胞术分析
    统计学分析
结果
    GPIbα酶切与线粒体的相关性
    线粒体对GPIbα酶切作用
    线粒体下游Caspase-3蛋白对GPIbα酶切的作用
    线粒体影响GPIbα酶切的分子机制
讨论



本文编号：4036041