AGR2通过诱导线粒体自噬发生改善肠黏膜屏障功能

发布时间：2022-01-13 18:26

　　目的 旨在探讨人前梯度蛋白2（anterior gradient-2,AGR2）在肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）诱导的肠黏膜屏障损伤中的作用及其机制。方法 通过体外培养人结肠腺癌细胞株Caco-2细胞建立肠黏膜屏障模型,预先转染AGR2质粒和对照质粒,24 h后实验组加入TNF-α刺激细胞,通过实时定量PCR及Western blot检测AGR2表达,通过跨膜电阻检测细胞膜通透性,透射电镜下观察线粒体自噬的发生。结果 Caco-2细胞培养21 d,跨膜电阻值（transepithelial electrical resistance,TEER）大于600 Ω·cm2,趋于稳定,证实体外肠黏膜屏障模型成功构建。在TNF-α诱导的肠上皮屏障损伤模型中,AGR2 mRNA及蛋白表达明显下调,TEER下降至200 Ω·cm2左右,透射电镜下显示线粒体形态破坏。而预先转染AGR2质粒可抑制TNF-α引起的跨膜电阻值下降,TEER维持在400 Ω·cm2左右,透射电镜下可见线粒体自噬小体产生。结论 体外实验证实AGR2基因可抑制TNF-α诱导的肠黏膜... 

【文章来源】：国际儿科学杂志. 2020,47(03)

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本文编号：3586929