青钱柳悬浮培养细胞三萜酸积累、分离鉴定及其降糖机制研究
发布时间：2021-06-22 13:49
青钱柳（Cyclocarya paliurus （Batal.） Iljinsk）为我国特有的胡桃科青钱柳属珍稀濒危植物,零星分布于我国南方各省,可用于保健食品、医药、园林绿化、工业用材等多个领域。研究表明,青钱柳叶含三萜、黄酮、多糖、皂苷及各种微量元素等多种功能活性成分,是具有很高利用价值的天然保健食品资源,但其繁育十分困难,资源稀缺严重制约了其开发利用。本文研究了青钱柳细胞悬浮培养及其三萜酸积累规律,从悬浮培养细胞中提取分离出了主要的三萜酸并进行了结构鉴定,同时对其降糖作用效果及机制进行了研究,旨在探索以青钱柳细胞悬浮培养方式生产三萜酸类降糖功能因子的可行性,为深度开发和利用青钱柳资源、生产三萜酸类降糖功能食品提供理论依据。以青钱柳无菌幼叶诱导愈伤组织,通过长期的筛选和继代培养,获得了疏松易碎、生长旺盛、适合于悬浮培养的优良愈伤组织,转入悬浮培养后,再经反复的筛选、继代和优化培养条件,建立了良好的细胞悬浮培养体系。该培养体系最佳继代时间为接种后第8天,最大细胞干重产量出现在第10天,最高总三萜酸产量出现在第14天。在保持MS培养基中总氮源浓度及铵态氮和硝态氮比例的同时,将磷酸盐、钙...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：147 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同培养代数的悬浮培养细胞(da第十代Fig.2.8SuspendedcellsofditPetentsubculturetime
第2章青钱柳细胞悬浮培养及三菇酸积累图2.6中的试验数据表明磷酸盐浓度对悬浮培养细胞总三菇酸的含量和产量都有较大影响。从0.3125~ol.L一‘到2.5~ol.L一‘范围内，总三菇酸的含量和产量均呈现先升后降的趋势，都在 1.875mmol.L一’时达到最大值。︵-J︸口E萝︺气爸馨润川00门︸n甘六nU︸匕一n︸ 752JJ.58萝6子乍窿劝爸门O一-—-——一一-—一——一O 0.31250.62501.25001.87502.5000磷酸盐浓度mM)~几卜总三菇酸含量一艺尸.总三菇酸产量图2.6磷酸盐浓度对悬浮培养细胞总三菇酸含量及产量的影响 F19.2.6EffeetsofPhosPhateeoneentrationontheTTAeontentandyieldofsusPendedeells 2.5.4.3ca2+浓度对总三菇酸产量的影响ca2+浓度对总三菇酸积累影响试验结果如图2.7。当ca2+浓度低于2~ol.L一’时，细胞总三菇酸的含量和产量均较低，在2至6~ol.L一’浓度范围内，总三菇酸的产量变化不大。因此，Zmmol.L一’的C扩+浓度较为合适。习6E︶好气窿爸泊门、︵岁︶咚窿酱七川es钧 0123456钙离子浓度mM)~一总三菇酸含量-忆卜-总三菇酸产员图2
︵-J︸口E萝︺气爸馨润川萝6子乍窿劝爸门O一-—-——一一-—一——一O0.31250.62501.25001.87502.5000磷酸盐浓度mM)~几卜总三菇酸含量一艺尸.总三菇酸产量2.6磷酸盐浓度对悬浮培养细胞总三菇酸含量及产量的影响etsofPhosPhateeoneentrationontheTTAeontentandyieldofsu度对总三菇酸产量的影响对总三菇酸积累影响试验结果如图2.7。当ca2+浓度低菇酸的含量和产量均较低，在2至6~ol.L一’浓度范不大。因此，Zmmol.L一’的C扩+浓度较为合适。
【参考文献】：
期刊论文
[1]金钮扣中三萜类化学成分研究[J]. 周洪波,王峰,房志坚. 中国中药杂志. 2011(15)
[2]齐墩果酸药理作用研究进展[J]. 昌盛,李龙. 广州化工. 2011(14)
[3]5种大量元素对青钱柳愈伤组织生长及黄酮类化合物积累的影响[J]. 上官新晨,蒋艳,米丽雪,陈继光,张清峰,邹利. 江西农业大学学报. 2011(03)
[4]大孔树脂吸附纯化青钱柳叶三萜化合物[J]. 尹忠平,上官新晨,张月红,黎冬明,吴少福,陈继光. 食品科学. 2011(06)
[5]细胞悬浮培养制备紫杉醇的研究进展[J]. 王巍杰,杨永强,吴尚卓. 河北理工大学学报(自然科学版). 2011(01)
[6]青钱柳多糖降血脂作用的研究[J]. 黄明圈,上官新晨,徐明生,王文君,沈勇根,蒋艳,陈琴,陈婷婷. 江西农业大学学报. 2011(01)
[7]高纯度青钱柳叶总三萜化合物精制研究[J]. 尹忠平,上官新晨,张月红,黎冬明,吴少福. 食品科技. 2011(02)
[8]白桦细胞悬浮培养产三萜及其营养成分消耗的动态[J]. 范桂枝,翟俏丽,于海娣,王晓东,王博,詹亚光. 林业科学. 2011(01)
[9]积雪草酸及其衍生物的研究进展[J]. 孟艳秋,李凤清,王向磊,李云云. 化学试剂. 2010(12)
[10]山茱萸药材中三萜类成分的研究[J]. 刘博,吴和珍. 湖北中医杂志. 2010(12)
博士论文
[1]樟芝深层液态发酵及其三萜类化合物的研究[D]. 陆震鸣.江南大学 2009
[2]过氧亚硝酸根对胰岛素信号转导的调控作用及其机理[D]. 周军.华中科技大学 2009
[3]羟基红花黄色素A对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化及细胞内脂代谢调节酶作用的研究[D]. 王林杰.中国协和医科大学 2008
[4]日本结缕草（Zoysia japonica Steud.）悬浮再生体系的建立与超低温保存研究[D]. 方文娟.北京林业大学 2008
[5]雷公藤组织培养生产次生代谢产物及其代谢调控研究[D]. 李琰.西北农林科技大学 2008
[6]中药糖耐康干预KKAy小鼠胰岛素抵抗信号转导的作用机制研究[D]. 王芬.北京中医药大学 2008
[7]长鞭红景天细胞悬浮培养及其次生代谢调控研究[D]. 王莉.北京林业大学 2007
[8]凤眼草和蓬子菜化学成分及生物活性研究[D]. 赵春超.沈阳药科大学 2007
[9]苦瓜中降血糖活性成分的高通量筛选研究[D]. 何新益.湖南农业大学 2006
[10]虎杖颗粒愈伤组织悬浮培养体系建立与白藜芦醇的生物合成、调控及生物转化研究[D]. 曹庸.湖南农业大学 2005
硕士论文
[1]番石榴叶三萜化合物（PGL-15）对3T3-L1脂肪细胞分化及糖脂代谢的影响及其作用机制[D]. 魏明.暨南大学 2010
[2]喜树悬浮培养体系的建立及喜树碱含量的调控研究[D]. 刘菲.湖南农业大学 2010
[3]广西青钱柳降血糖有效成分及作用机制的研究[D]. 张小芳.桂林医学院 2010
[4]石榴愈伤组织的诱导和细胞悬浮培养体系的建立[D]. 程江华.安徽农业大学 2009
[5]青钱柳黄酮和皂甙化合物同步提取及纯化技术研究[D]. 郝翻.湖南农业大学 2009
[6]青钱柳离体快繁及生根机理的初步研究[D]. 王莹.南京林业大学 2008
[7]青钱柳多糖的分离纯化与结构解析及其生物活性研究[D]. 谢建华.南昌大学 2007
[8]高糖细胞模型的建立与中药降糖作用及其机理初步研究[D]. 陈国光.北京中医药大学 2007
[9]中药复方“益糖康”对2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达的影响[D]. 郭仪.辽宁中医药大学 2007
[10]胰岛素信号通路中GLUT4的作用机制研究[D]. 高勇.浙江大学 2006
本文编号：3242951
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：147 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同培养代数的悬浮培养细胞(da第十代Fig.2.8SuspendedcellsofditPetentsubculturetime
第2章青钱柳细胞悬浮培养及三菇酸积累图2.6中的试验数据表明磷酸盐浓度对悬浮培养细胞总三菇酸的含量和产量都有较大影响。从0.3125~ol.L一‘到2.5~ol.L一‘范围内，总三菇酸的含量和产量均呈现先升后降的趋势，都在 1.875mmol.L一’时达到最大值。︵-J︸口E萝︺气爸馨润川00门︸n甘六nU︸匕一n︸ 752JJ.58萝6子乍窿劝爸门O一-—-——一一-—一——一O 0.31250.62501.25001.87502.5000磷酸盐浓度mM)~几卜总三菇酸含量一艺尸.总三菇酸产量图2.6磷酸盐浓度对悬浮培养细胞总三菇酸含量及产量的影响 F19.2.6EffeetsofPhosPhateeoneentrationontheTTAeontentandyieldofsusPendedeells 2.5.4.3ca2+浓度对总三菇酸产量的影响ca2+浓度对总三菇酸积累影响试验结果如图2.7。当ca2+浓度低于2~ol.L一’时，细胞总三菇酸的含量和产量均较低，在2至6~ol.L一’浓度范围内，总三菇酸的产量变化不大。因此，Zmmol.L一’的C扩+浓度较为合适。习6E︶好气窿爸泊门、︵岁︶咚窿酱七川es钧 0123456钙离子浓度mM)~一总三菇酸含量-忆卜-总三菇酸产员图2
︵-J︸口E萝︺气爸馨润川萝6子乍窿劝爸门O一-—-——一一-—一——一O0.31250.62501.25001.87502.5000磷酸盐浓度mM)~几卜总三菇酸含量一艺尸.总三菇酸产量2.6磷酸盐浓度对悬浮培养细胞总三菇酸含量及产量的影响etsofPhosPhateeoneentrationontheTTAeontentandyieldofsu度对总三菇酸产量的影响对总三菇酸积累影响试验结果如图2.7。当ca2+浓度低菇酸的含量和产量均较低，在2至6~ol.L一’浓度范不大。因此，Zmmol.L一’的C扩+浓度较为合适。
【参考文献】：
期刊论文
[1]金钮扣中三萜类化学成分研究[J]. 周洪波,王峰,房志坚. 中国中药杂志. 2011(15)
[2]齐墩果酸药理作用研究进展[J]. 昌盛,李龙. 广州化工. 2011(14)
[3]5种大量元素对青钱柳愈伤组织生长及黄酮类化合物积累的影响[J]. 上官新晨,蒋艳,米丽雪,陈继光,张清峰,邹利. 江西农业大学学报. 2011(03)
[4]大孔树脂吸附纯化青钱柳叶三萜化合物[J]. 尹忠平,上官新晨,张月红,黎冬明,吴少福,陈继光. 食品科学. 2011(06)
[5]细胞悬浮培养制备紫杉醇的研究进展[J]. 王巍杰,杨永强,吴尚卓. 河北理工大学学报(自然科学版). 2011(01)
[6]青钱柳多糖降血脂作用的研究[J]. 黄明圈,上官新晨,徐明生,王文君,沈勇根,蒋艳,陈琴,陈婷婷. 江西农业大学学报. 2011(01)
[7]高纯度青钱柳叶总三萜化合物精制研究[J]. 尹忠平,上官新晨,张月红,黎冬明,吴少福. 食品科技. 2011(02)
[8]白桦细胞悬浮培养产三萜及其营养成分消耗的动态[J]. 范桂枝,翟俏丽,于海娣,王晓东,王博,詹亚光. 林业科学. 2011(01)
[9]积雪草酸及其衍生物的研究进展[J]. 孟艳秋,李凤清,王向磊,李云云. 化学试剂. 2010(12)
[10]山茱萸药材中三萜类成分的研究[J]. 刘博,吴和珍. 湖北中医杂志. 2010(12)
博士论文
[1]樟芝深层液态发酵及其三萜类化合物的研究[D]. 陆震鸣.江南大学 2009
[2]过氧亚硝酸根对胰岛素信号转导的调控作用及其机理[D]. 周军.华中科技大学 2009
[3]羟基红花黄色素A对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化及细胞内脂代谢调节酶作用的研究[D]. 王林杰.中国协和医科大学 2008
[4]日本结缕草（Zoysia japonica Steud.）悬浮再生体系的建立与超低温保存研究[D]. 方文娟.北京林业大学 2008
[5]雷公藤组织培养生产次生代谢产物及其代谢调控研究[D]. 李琰.西北农林科技大学 2008
[6]中药糖耐康干预KKAy小鼠胰岛素抵抗信号转导的作用机制研究[D]. 王芬.北京中医药大学 2008
[7]长鞭红景天细胞悬浮培养及其次生代谢调控研究[D]. 王莉.北京林业大学 2007
[8]凤眼草和蓬子菜化学成分及生物活性研究[D]. 赵春超.沈阳药科大学 2007
[9]苦瓜中降血糖活性成分的高通量筛选研究[D]. 何新益.湖南农业大学 2006
[10]虎杖颗粒愈伤组织悬浮培养体系建立与白藜芦醇的生物合成、调控及生物转化研究[D]. 曹庸.湖南农业大学 2005
硕士论文
[1]番石榴叶三萜化合物（PGL-15）对3T3-L1脂肪细胞分化及糖脂代谢的影响及其作用机制[D]. 魏明.暨南大学 2010
[2]喜树悬浮培养体系的建立及喜树碱含量的调控研究[D]. 刘菲.湖南农业大学 2010
[3]广西青钱柳降血糖有效成分及作用机制的研究[D]. 张小芳.桂林医学院 2010
[4]石榴愈伤组织的诱导和细胞悬浮培养体系的建立[D]. 程江华.安徽农业大学 2009
[5]青钱柳黄酮和皂甙化合物同步提取及纯化技术研究[D]. 郝翻.湖南农业大学 2009
[6]青钱柳离体快繁及生根机理的初步研究[D]. 王莹.南京林业大学 2008
[7]青钱柳多糖的分离纯化与结构解析及其生物活性研究[D]. 谢建华.南昌大学 2007
[8]高糖细胞模型的建立与中药降糖作用及其机理初步研究[D]. 陈国光.北京中医药大学 2007
[9]中药复方“益糖康”对2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达的影响[D]. 郭仪.辽宁中医药大学 2007
[10]胰岛素信号通路中GLUT4的作用机制研究[D]. 高勇.浙江大学 2006
本文编号：3242951
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