生物样品中痕量碳水化合物及衍生物的电泳分析方法研究

发布时间：2017-12-08 13:27

  本文关键词：生物样品中痕量碳水化合物及衍生物的电泳分析方法研究

  更多相关文章： 毛细管电泳 电化学检测 在线富集 生物分析 唾液酸 葡萄糖

【摘要】：第一章绪论毛细管电泳(CE)是一种发展迅速、应用广泛的分析技术,拥有分离效率高、试剂用量少、自动化程度高、重现性好、成本低等优点。本章简要概述了CE基本理论与应用、在线富集方法新进展以及碳水化合物CE分析方法研究进展。本文拟将高分离效率的CE与通用型的电容耦合非接触电导检测(Capacitively Coupled Contactless Conductivity Detection,C4D)以及高灵敏度的安培检测(Amperometric Detection,AD)技术联用,并结合电泳在线富集技术,实现对痕量唾液酸和典型碳水化合物的分离检测,并尝试应用于生物样品分析。所开发的方法无需对样品进行衍生处理,缩短了分析时间,提高了检测结果的可靠性,同时所用体系简单,对环境友好。第二章 生物样品中两种唾液酸主要形式的MCRB/CE-C4D分析方法研究本实验采用CE-C4D联用系统,结合在线移动化学反应界面堆积技术(MCRB),建立了一种可用于唾液酸两种主要形式,N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,NANA)和 N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolylneuraminic acid,NGNA)同时测定的分析方法。本实验系统研究了影响电泳分离、检测和结合唾液酸水解效率等一系列实验参数。在最佳实验条件下,NANA和NGNA可与常见单糖、二糖以及其他潜在的共存无机和有机阴离子实现良好分离。该方法已尝试用于唾液、牛奶、奶粉样品中唾液酸含量的分析。鉴于其较高的灵敏度(LODs:1.4-2.2ng/mL)、良好的线性(r≥0.999)、可接受的回收率(90%-107%)和可靠的水解步骤,MCRB/CE-C4D联用技术是一种操作简单、检测快速、灵敏而且环保的唾液酸分析方法。该方法无需衍生处理,为体液和乳制品中NANA和NGNA的含量分析提供了一种潜在的新方法。第三章无创体液中标志性碳水化合物的FASS/CE-AD分析方法研究本实验将场放大在线富集技术与CE-AD联用技术相结合,建立了一种葡萄糖的快速、灵敏、低成本的分析方法。本实验研究了影响葡萄糖及其潜在共存干扰物分离检测的一系列实验参数。在最佳实验条件下,葡萄糖可与半乳糖等常见碳水化合物以及其他潜在的共存物质实现良好分离。这种方法已尝试用于无创体液唾液中葡萄糖含量的分析,并获得了较高的灵敏度(LODs:4.2-72 ng/mL)、良好的线性(r0.999)和可接受的回收率(90%-114%)。本实验所建立的FASS/CE-AD联用方法操作简单,检测快速、灵敏,对环境友好,有望为无创体液中典型碳水化合物的灵敏检测提供一种潜在的新方法。
【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：Q-33;O658.9

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