慈竹BeSUSs基因表达模式分析及其遗传转化毛白杨的研究

发布时间：2017-12-24 22:27

  本文关键词：慈竹BeSUSs基因表达模式分析及其遗传转化毛白杨的研究　出处：《西南科技大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：本文以慈竹为材料,克隆了BeSUS6和SeSUS7基因;对BeSUSs基因的生物信息学、表达模式以及亚细胞定位进行了分析;构建了过表达载体并转化毛白杨,为SUS大型丛生竹遗传改良中的应用提供理论依据。主要的研究结果如下:1.在实验室已经得到5个SUS基因全长序列(BeSUS1、BeSUS2、BeSUS3、BeSUS4和BeSUS5)的基础上,根据慈竹转录组数据库继续克隆得到2个慈竹新SUS基因,将其分别命名为BeSUS6和BeSUS7,全长分别为2526 bp和2550bp,编码841和849个氨基酸。GenBank注册号为 KY421768 和 KY421769。2.采用Real-Time PCR技术对慈竹BeSUS基因的组织表达模式进行了研究,结果表明,在根、茎、叶和笋都有表达,但表达情况各不相同。BeSUS3除展开叶以外,在其他所有组织中,其表达量均是最高的;BeSUS1和BeSUS7在所有组织中表达量均较低;BeSUS5基因只在笋中表达较高,在其它组织中表达很低;BeSUS6基因在展开叶中表达最高,在其它组织表达较低。3.慈竹BeSUSs基因ABA、MEJA和干旱胁迫表达分析表明,BeSUS4、BeSUS5和BeSUS5和BeSUS7基因响应ABA胁迫,BeSUS1、BeSUS5和BeSUS7基因响应MEJA胁迫;BeSUS6和BeSUS7基因响应干旱胁迫。BeSUS7基因同时对ABA、MEJA和干旱三种胁迫响应。4.笋不同部位BeSUSs基因表达量研究表明,BeSUS3、BeSUS4和BeSUS5对笋的生长发育有重要作用。5.亚细胞定位结果表明,BeSUS2定位在细胞膜上,BeSUS4则定位于细胞膜和细胞质。6.构建了pCAMBIA 1303N-BeSUS2/4/5/6/7过表达载体,并以农杆菌介导的叶盘法转化毛白杨。经PCR鉴定,成功获得了BeSUS2转基因毛白杨11株,BeSUS4转基因毛白杨11株;BeSUS5转基因14株;BeSUS6转基因13株。转基因植株半定量PCR结果证明,pCAMBIA 1303-BeSUS2/4/5/6已整合到毛白杨基因组中,并成功表达。8.BeSUS2转基因毛白杨与CK相比,其苗期叶片颜色较浅,光合色素含量下降,植株茎秆直径减小,株高增高。
【学位授予单位】：西南科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：Q943.2

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本文编号：1330220