猪嗜血支原体SYBR Green qPCR检测方法的建立及应用

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《山西农业大学》 2015年

猪嗜血支原体SYBR Green qPCR检测方法的建立及应用

王永威  

【摘要】：目的：建立检测M.suis的SYBR Green qPCR方法。方法：通过克隆qPCR扩增片段建立质粒标准品,进行qPCR扩增获得标准曲线；通过敏感性试验,特异性试验和重复性试验评估qPCR方法。结果：qPCR可以特异性扩增到M.suis 16S rRNA基因中大小为157bp的片段,而对PRRSV、PCV2、PPV、PRV、E. coli和S. aureus等病原体没有扩增；标准曲线的r2=0.996,E=98.4%; qPCR的灵敏度是常规PCR的100倍；qPCR与常规PCR对样品检测无显著差异(p0.05)。结论：成功建立了检测M.suis感染的SYBR Green qPCR方法,其灵敏性高,特异性和重复性良好,适用于临床上和实验室中对M.suis进行定量检测。

【关键词】：
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S852.62
【目录】：

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