侧孢短芽孢杆菌B8抗病毒活性物质分析及其作用机理研究
发布时间：2021-02-12 16:07
植物病毒病是仅次于植物真菌病害的第二大植物病害,给农业生产造成了严重的经济损失。生物农药由于残留量低、对环境安全、对非靶标生物安全、不易产生耐药性等优点,受到越来越多的关注并且展现出很好的发展潜力,从自然界有益微生物中分离和鉴定更安全、更有效的抗病毒代谢产物成为目前的研究热点。本研究筛选对烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）具有显著抑制作用及对植物具有促生长作用的多功能生防细菌,分离纯化抗病毒活性物质,克隆其编码基因,通过原核表达获得纯化的重组蛋白,并从对寄主的诱导抗性和对TMV的抑制作用两个方面解析其抗病毒作用机制,为抗病毒微生物农药的创制提供理论依据。本研究取得以下研究结果:1.筛选获得抗植物病毒、促进植物生长的多功能生防菌B8。本试验采用“杯碟法”从23株细菌中筛选出8株对蜡状芽孢杆菌具有抑制效果的生防菌,研究了其中7株的无菌发酵液对蜡状芽孢杆菌和TMV的抑制效果及促进番茄生长作用,结果表明菌株B8发酵液能有效抑制蜡状芽孢杆菌,发酵液与TMV体外混合后接种心叶烟,枯斑抑制率为87.52%;菌株B8无菌发酵液喷施烟草NC89,对TMV的预防作用和治疗作用...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
菌株及发酵液对蜡状芽孢杆菌的抑制作用A：菌碟；B：无菌发酵液；C：发酵液Fig.2-1InhibitionofBacilluscereusbystrainsandfermentationbrothA:Plate;B:Cell-freefermentationbroth;C:FermentationbrothC
第二章抗植物病毒多功能生防菌的筛选222.2.3无菌发酵液促进番茄生长作用测定用各菌株无菌发酵液稀释20倍液处理番茄种子后播种，测定发酵液对番茄幼苗生长各项指标的影响。番茄株高的增量表明菌株B8、B20和SNB56发酵液的促进作用显著，根长的增量表明菌株B8和B20发酵液的促进作用显著，地上部干/鲜重的增量表明菌株B8发酵液的促进作用显著，地下部干重的增量表明菌株B8和菌株SNB55发酵液促进作用显著，地下部鲜重增量表明菌株B8发酵液促进作用显著。菌株B8无菌发酵液处理过的种子番茄幼苗整齐，长势良好，颜色浓绿，无论是株高、根长、地上部干/鲜重和地下部干/鲜重指标均优于其他菌株及对照，分别比对照增加25%、41%、50%、86%、30%和50%，说明菌株B8发酵液促进幼苗生长的作用最显著（图2-2，表2-4）。图2-2无菌发酵液促进番茄生长作用Fig.2-2EffectoffermentationbrothontomatogrowthB8B17B20B26B30SNB55SNB56对照
?.25d254.40±1.69d144.30±0.82c22.60±0.29c注：表中数据是用平均值±标准差表示，不同的字母表示差异显著（P<0.05）。Note:AlldataareshownastheMeans±SDfromfourbiologicalreplicates,differentcapitalletterstandsforsignificantdifference(P<0.05).2.2.4菌株B8抗菌蛋白粗提物对TMV的抑制作用将透析后的抗菌蛋白粗提液与TMV病毒汁液1:1混合（混合10min）摩擦接种处理心叶烟，接种3d后调查叶片产生的枯斑数，并计算病斑抑制率。结果表明用抗菌蛋白粗提物处理后的TMV再接种心叶烟，枯斑数明显减少，枯斑抑制率为42.50%（图2-3），说明菌株B8产生的抗菌蛋白粗提物对TMV具有一定的抑制作用。2.3本章小结与讨论本试验通过对已有的23株细菌进行筛选，得到8株对蜡状芽孢杆菌具有抑制效果的生防菌（图2-1A，表2-1），进一步研究了其中效果较持久的7株生防菌B8、B17、A：与抗菌蛋白粗提物混合后接种；B：对照图2-3菌株B8抗菌蛋白粗提物对TMV的抑制作用A:Mixedwithcrudeextractofantagonisticproteinandinoculated;B:controlFig.2-3InhibitoryeffectofcrudeextractofantagonisticproteinofstrainB8onTMVAB
【参考文献】：
期刊论文
[1]侧孢短芽孢杆菌B8抑制植物病毒及促进番茄生长作用研究[J]. 厉彦芳,王春阳,谢菁菁,赵秀香. 中国植保导刊. 2019(07)
[2]套餐肥对设施番茄产量及品质的影响[J]. 孙喜军,吕爽,王安,王小荣,孟菁,高莹,李静,郝红艳. 农学学报. 2018(12)
[3]超敏蛋白BaPE1对烟草马铃薯Y病毒的诱导抗性[J]. 王颖,付强,陈雅寒,成巨龙,安德荣. 西北农业学报. 2017(10)
[4]侧孢短芽孢杆菌B8胞外抗菌蛋白对辣椒立枯病抗病机制的研究[J]. 李蔚,赵秀香,徐千惠,余惠荣,李悦. 中国植保导刊. 2016(10)
[5]侧孢短芽孢杆菌B8抑菌物质的理化性质及其分离纯化[J]. 余惠荣,李悦,李晓菲,赵秀香. 沈阳农业大学学报. 2015(04)
[6]侧孢短芽孢杆菌的应用研究进展[J]. 陈潺,陈升富,王建宇,张铭铄,殷犇,毛志泉,周波,王冰. 山东农业科学. 2015(02)
[7]植物病程相关蛋白的研究进展[J]. 李连华. 福建农业. 2015(02)
[8]枯草芽孢杆菌OKB105产生的surfactin防治烟草花叶病毒病及其机理研究[J]. 任鹏举,谢永丽,张岩,伍辉军,高学文. 中国生物防治学报. 2014(02)
[9]黏质沙雷氏菌次生代谢物对TMV的抑制机理[J]. 毕建华,杨金广,欧阳明安,李锡宏,张长华,申莉莉,钱玉梅,王盼,王升平,王凤龙. 中国农业科学. 2014(05)
[10]3%超敏蛋白微粒剂对感染南方水稻黑条矮缩病稻株的补偿作用[J]. 李莉,龙先华,雷势贤,何衍福,孙祖雄. 广西植保. 2011(03)
博士论文
[1]不同砧木嫁接对黄瓜果实风味品质影响及香气合成相关基因CsADH7-like功能分析[D]. 赵丽丽.沈阳农业大学 2019
[2]几种抗病毒药剂对烟草花叶病毒的抑制作用及相关机理研究[D]. 李红霞.河北农业大学 2010
[3]芽孢杆菌及其脂肽类化合物防治植物病害和促进植物生长的研究[D]. 王帅.南京农业大学 2009
[4]嘧肽霉素抗烟草花叶病毒（TMV）作用机制研究[D]. 朱春玉.沈阳农业大学 2005
硕士论文
[1]地衣芽孢杆菌W10抗菌蛋白及其与harpin蛋白协同抗病作用的研究[D]. 陈丽丽.扬州大学 2018
[2]芽孢杆菌对番茄促生及防治番茄黄化曲叶病毒病机制研究[D]. 娄义.西北农林科技大学 2018
[3]超敏蛋白对黄瓜花叶病毒病的防治研究[D]. 汝冰璐.西北农林科技大学 2018
[4]水稻黑条矮缩病毒外壳蛋白P10介导的抗病毒机制研究[D]. 谭小香.福建农林大学 2018
[5]烟草马铃薯Y病毒病的生物防治研究[D]. 付强.西北农林科技大学 2016
[6]TMV拮抗菌的筛选、鉴定及培养特性研究[D]. 何勇.湖南农业大学 2013
[7]抗TMV菌株筛选及其拮抗机理研究[D]. 王盼.中国农业科学院 2013
[8]TMV拮抗菌的筛选与初步鉴定[D]. 贾霁.湖南农业大学 2012
[9]侧孢短芽孢杆菌A60抗菌肽分离纯化与功能分析[D]. 赵璟.中国农业科学院 2012
[10]烟草黑胫病生防菌的筛选[D]. 王成.福建农林大学 2012
本文编号：3031113
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
菌株及发酵液对蜡状芽孢杆菌的抑制作用A：菌碟；B：无菌发酵液；C：发酵液Fig.2-1InhibitionofBacilluscereusbystrainsandfermentationbrothA:Plate;B:Cell-freefermentationbroth;C:FermentationbrothC
第二章抗植物病毒多功能生防菌的筛选222.2.3无菌发酵液促进番茄生长作用测定用各菌株无菌发酵液稀释20倍液处理番茄种子后播种，测定发酵液对番茄幼苗生长各项指标的影响。番茄株高的增量表明菌株B8、B20和SNB56发酵液的促进作用显著，根长的增量表明菌株B8和B20发酵液的促进作用显著，地上部干/鲜重的增量表明菌株B8发酵液的促进作用显著，地下部干重的增量表明菌株B8和菌株SNB55发酵液促进作用显著，地下部鲜重增量表明菌株B8发酵液促进作用显著。菌株B8无菌发酵液处理过的种子番茄幼苗整齐，长势良好，颜色浓绿，无论是株高、根长、地上部干/鲜重和地下部干/鲜重指标均优于其他菌株及对照，分别比对照增加25%、41%、50%、86%、30%和50%，说明菌株B8发酵液促进幼苗生长的作用最显著（图2-2，表2-4）。图2-2无菌发酵液促进番茄生长作用Fig.2-2EffectoffermentationbrothontomatogrowthB8B17B20B26B30SNB55SNB56对照
?.25d254.40±1.69d144.30±0.82c22.60±0.29c注：表中数据是用平均值±标准差表示，不同的字母表示差异显著（P<0.05）。Note:AlldataareshownastheMeans±SDfromfourbiologicalreplicates,differentcapitalletterstandsforsignificantdifference(P<0.05).2.2.4菌株B8抗菌蛋白粗提物对TMV的抑制作用将透析后的抗菌蛋白粗提液与TMV病毒汁液1:1混合（混合10min）摩擦接种处理心叶烟，接种3d后调查叶片产生的枯斑数，并计算病斑抑制率。结果表明用抗菌蛋白粗提物处理后的TMV再接种心叶烟，枯斑数明显减少，枯斑抑制率为42.50%（图2-3），说明菌株B8产生的抗菌蛋白粗提物对TMV具有一定的抑制作用。2.3本章小结与讨论本试验通过对已有的23株细菌进行筛选，得到8株对蜡状芽孢杆菌具有抑制效果的生防菌（图2-1A，表2-1），进一步研究了其中效果较持久的7株生防菌B8、B17、A：与抗菌蛋白粗提物混合后接种；B：对照图2-3菌株B8抗菌蛋白粗提物对TMV的抑制作用A:Mixedwithcrudeextractofantagonisticproteinandinoculated;B:controlFig.2-3InhibitoryeffectofcrudeextractofantagonisticproteinofstrainB8onTMVAB
【参考文献】：
期刊论文
[1]侧孢短芽孢杆菌B8抑制植物病毒及促进番茄生长作用研究[J]. 厉彦芳,王春阳,谢菁菁,赵秀香. 中国植保导刊. 2019(07)
[2]套餐肥对设施番茄产量及品质的影响[J]. 孙喜军,吕爽,王安,王小荣,孟菁,高莹,李静,郝红艳. 农学学报. 2018(12)
[3]超敏蛋白BaPE1对烟草马铃薯Y病毒的诱导抗性[J]. 王颖,付强,陈雅寒,成巨龙,安德荣. 西北农业学报. 2017(10)
[4]侧孢短芽孢杆菌B8胞外抗菌蛋白对辣椒立枯病抗病机制的研究[J]. 李蔚,赵秀香,徐千惠,余惠荣,李悦. 中国植保导刊. 2016(10)
[5]侧孢短芽孢杆菌B8抑菌物质的理化性质及其分离纯化[J]. 余惠荣,李悦,李晓菲,赵秀香. 沈阳农业大学学报. 2015(04)
[6]侧孢短芽孢杆菌的应用研究进展[J]. 陈潺,陈升富,王建宇,张铭铄,殷犇,毛志泉,周波,王冰. 山东农业科学. 2015(02)
[7]植物病程相关蛋白的研究进展[J]. 李连华. 福建农业. 2015(02)
[8]枯草芽孢杆菌OKB105产生的surfactin防治烟草花叶病毒病及其机理研究[J]. 任鹏举,谢永丽,张岩,伍辉军,高学文. 中国生物防治学报. 2014(02)
[9]黏质沙雷氏菌次生代谢物对TMV的抑制机理[J]. 毕建华,杨金广,欧阳明安,李锡宏,张长华,申莉莉,钱玉梅,王盼,王升平,王凤龙. 中国农业科学. 2014(05)
[10]3%超敏蛋白微粒剂对感染南方水稻黑条矮缩病稻株的补偿作用[J]. 李莉,龙先华,雷势贤,何衍福,孙祖雄. 广西植保. 2011(03)
博士论文
[1]不同砧木嫁接对黄瓜果实风味品质影响及香气合成相关基因CsADH7-like功能分析[D]. 赵丽丽.沈阳农业大学 2019
[2]几种抗病毒药剂对烟草花叶病毒的抑制作用及相关机理研究[D]. 李红霞.河北农业大学 2010
[3]芽孢杆菌及其脂肽类化合物防治植物病害和促进植物生长的研究[D]. 王帅.南京农业大学 2009
[4]嘧肽霉素抗烟草花叶病毒（TMV）作用机制研究[D]. 朱春玉.沈阳农业大学 2005
硕士论文
[1]地衣芽孢杆菌W10抗菌蛋白及其与harpin蛋白协同抗病作用的研究[D]. 陈丽丽.扬州大学 2018
[2]芽孢杆菌对番茄促生及防治番茄黄化曲叶病毒病机制研究[D]. 娄义.西北农林科技大学 2018
[3]超敏蛋白对黄瓜花叶病毒病的防治研究[D]. 汝冰璐.西北农林科技大学 2018
[4]水稻黑条矮缩病毒外壳蛋白P10介导的抗病毒机制研究[D]. 谭小香.福建农林大学 2018
[5]烟草马铃薯Y病毒病的生物防治研究[D]. 付强.西北农林科技大学 2016
[6]TMV拮抗菌的筛选、鉴定及培养特性研究[D]. 何勇.湖南农业大学 2013
[7]抗TMV菌株筛选及其拮抗机理研究[D]. 王盼.中国农业科学院 2013
[8]TMV拮抗菌的筛选与初步鉴定[D]. 贾霁.湖南农业大学 2012
[9]侧孢短芽孢杆菌A60抗菌肽分离纯化与功能分析[D]. 赵璟.中国农业科学院 2012
[10]烟草黑胫病生防菌的筛选[D]. 王成.福建农林大学 2012
本文编号：3031113
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/benkebiyelunwen/3031113.html
