一株内生蓝藻脂类分析以及其生长条件初步研究

发布时间:2017-04-20 04:12

  本文关键词:一株内生蓝藻脂类分析以及其生长条件初步研究,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:本实验所研究的蓝藻是从雨生红球藻(单细胞绿藻)中发现并分离出来的一株内生蓝藻。其在两种不同的光照强度下细胞结构有较大差别,在弱光照(Low-light LL)下没有明显的细胞结构,在强光照(High-light HL)下有明显的叶绿体结构。经前期研究表明弱光下微藻为蓝藻,强光下微藻为绿藻。本实验主要研究对两种微藻中脂质和脂肪酸的提取、分离和鉴定以及测定微藻最适生长条件,同时测定了与微藻共生的头孢霉胞外多糖对两种微藻生长的影响。通过实验分析表明:对于细胞的破碎,超声波破碎和研磨破碎结合使用效果最好;提取总脂最好的提取剂为氯仿:甲醇(2:1 v/v),绿藻总脂含量为18.47%;绿藻的脂肪酸以C16:0、C16:1(n-7)、C18类、C20:5为主,含量均在6%以上,蓝藻的脂肪酸以C16类、C18:3(n-6)、C20:2、C22:1(n-9)、C22:6(n-3)为主,含量均在6%以上,这与蓝藻门植物富含C16和C22的脂肪酸结论相符合。选取氯化铵、硝酸钠、硫酸亚铁和硫酸镁四种营养成分,以培养基中成分做对照,研究分析不同浓度的铵根离子、铁离子、硝酸根离子、镁离子对微藻生长的影响:铵根抑制色球藻的生长;铁离子在浓度为0.8g/L时最有利;硝酸根的存在对藻类的生长生成有促进作用,在强光下浓度为1.7g/L时最好,弱光下浓度越大越好;镁离子在强光下浓度为0.045g/L时藻类生长最佳,在弱光不明显。通过实验研究分析了蓝、绿藻的共生真菌—头孢霉分泌的胞外多糖对藻细胞生长状况的影响,我们可以得到该种头孢霉的胞外多糖促进绿藻生长,但是抑制蓝藻生长。
【关键词】:内生蓝藻 脂肪酸 促进胞外多糖抑制
【学位授予单位】:河北工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:Q949.22
【目录】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-9
  • 第一章 绪论9-17
  • 1.1 微藻概述9-10
  • 1.1.1 蓝藻9
  • 1.1.2 蓝藻的经济价值9
  • 1.1.3 绿藻9-10
  • 1.1.4 绿藻的经济价值10
  • 1.2 脂质和脂肪酸10-13
  • 1.2.1 脂质10-11
  • 1.2.2 脂肪酸11
  • 1.2.3 薄层层析11
  • 1.2.4 脂肪酸仪器分析方法11-12
  • 1.2.5 破壁方法的研究12-13
  • 1.3 微生物生长极其影响因素13-14
  • 1.4 头孢霉胞外多糖14-15
  • 1.4.1 头孢霉简介14
  • 1.4.2 胞外多糖简介14-15
  • 1.5 微藻展望15
  • 1.6 本论文创新点及主要研究内容15-17
  • 1.6.1 本论文的创新点15-16
  • 1.6.2 本论文的主要研究内容16-17
  • 第二章 内生蓝藻脂类含量和脂肪酸组成的比较分析17-31
  • 2.1 前言17
  • 2.2 实验材料17-18
  • 2.2.1 藻体17
  • 2.2.2 主要仪器17-18
  • 2.2.3 主要试剂18
  • 2.3 培养基的配制和菌株培养18-20
  • 2.3.1 培养基的配制18-19
  • 2.3.2 菌株培养19-20
  • 2.4 实验方法20-23
  • 2.4.1 总脂的提取和测量20
  • 2.4.2 脂肪酸的定性定量的分析20-21
  • 2.4.3 薄层层析21-23
  • 2.4.4 脂肪酸甲酯的气相色谱分析23
  • 2.5 结果与分析23-30
  • 2.5.1 总脂的含量23-24
  • 2.5.2 薄层层析结果24-28
  • 2.5.3 脂肪酸的定量分析28-30
  • 2.6 本章小结30-31
  • 第三章 微藻生长条件的研究31-39
  • 3.1 前言31
  • 3.2 实验材料31-32
  • 3.2.1 藻体31
  • 3.2.2 实验仪器31
  • 3.2.3 试剂31-32
  • 3.3 实验方法32-33
  • 3.3.1 BG-11培养基32
  • 3.3.2 实验步骤32-33
  • 3.4 结果与讨论33-38
  • 3.4.1 NO_3~-浓度影响33-34
  • 3.4.2 Mg~(2+)的影响34-35
  • 3.4.3 Fe~(2+)的影响35-37
  • 3.4.4 NH_4~+的影响37-38
  • 3.5 本章小结38-39
  • 第四章 头孢霉胞外多糖对微藻生长的影响39-61
  • 4.1 前言39
  • 4.2 材料、仪器和试剂39-40
  • 4.2.1 材料来源39
  • 4.2.2 实验仪器39-40
  • 4.2.3 实验试剂40
  • 4.3 实验内容40-44
  • 4.3.1 头孢霉的活化40-41
  • 4.3.2 头孢霉的培养41
  • 4.3.3 胞外多糖的制备41-42
  • 4.3.4 微藻的培养42
  • 4.3.5 绿藻细胞生长指标表征42
  • 4.3.6 标准曲线的验证42-43
  • 4.3.7 验证实验43
  • 4.3.8 绿藻对照实验43-44
  • 4.4 实验结果与分析44-60
  • 4.4.1 头孢霉的活化44-45
  • 4.4.2 头孢霉的培养45-46
  • 4.4.3 胞外多糖的制备46
  • 4.4.4 微藻的培养46
  • 4.4.5 绿藻生长指标的表征46-50
  • 4.4.6 标准曲线验证50-51
  • 4.4.7 验证实验51-53
  • 4.4.8 绿藻对照实验53-57
  • 4.4.9 蓝藻对照实验57-60
  • 4.5 本章小结60-61
  • 结论61-63
  • 参考文献63-69
  • 攻读学位期间所取得的相关科研成果69-71
  • 致谢71

【参考文献】

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