重金属铜胁迫下草履虫的转录组学研究
发布时间：2021-06-19 18:26
重金属作为生产生活中的重要原材料,来源广泛、难以降解,可以随着食物链、食物网累积,对生命体具有重要毒害作用。其中,铜是一种常见的重金属元素,痕量Cu2+可以促进生物体的生长发育,但是重金属Cu2+在体内的浓度超过一定的限度就会威胁生物体正常的生命活动。草履虫在水体环境中十分常见,具有成型的细胞核、细胞比表面积大、世代时间短、细胞器结构较为完整,常被作为模式生物研究细胞对环境胁迫物质的响应,在生态毒理学实验中有着重要作用。研究重金属胁迫下草履虫相关差异基因,可以为揭示重金属铜的体内转运、吸附和代谢通路奠定实验基础,为进一步深入研究原生动物对重金属离子的耐受和抗逆机制提供数据支持。本研究以一种草履虫作为受试生物,研究了在不同作用时间（24 h、96 h）,不同作用浓度（0.01 mg/L、0.02 mg/L）下重金属Cu2+胁迫对其转录表达的影响,通过对实验组和对照组进行转录组测序、功能注释、差异基因分析和蛋白质互作分析等,对重金属Cu2+胁迫下草履虫的毒性效应和分子机制做了初步分析和探讨。主要结论如下:（1）在0.01 mg/L的Cu2+处理24 h下,草履虫转录组中约有283个基因上调...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]砷对PI3K/AKT信号通路调节效应的Meta分析[J]. 柴婧,王榆元,张静怡,牛强,胡云华,李毓,王海霞,李述刚. 环境卫生学杂志. 2020(01)
[2]进展中的原生动物学研究:热点领域与新格局[J]. 熊杰,陈建平,陈晓光,陈瑛,冯耀宇,高凤,高珊,顾福康,黄兵,梁爱华,龙红岸,赖德华,伦照荣,缪炜,倪兵,邱子健,邵晨,汪建国,文建凡,徐奎栋,余育和,张龙现,张西臣,赵元莙,宋微波. 中国科学:生命科学. 2019(10)
[3]转录组学主要研究技术及其应用概述[J]. 刘伟,郭光艳,秘彩莉. 生物学教学. 2019(10)
[4]Cu2+胁迫对福寿螺金属硫蛋白基因mRNA表达的影响[J]. 茅光耀,郭云海,张仪,肖宁. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2019(03)
[5]单细胞转录组测序技术原理及其应用[J]. 李丽娟,师书玥,张村宇,贺花,雷初朝,陈宏,黄永震. 中国畜牧杂志. 2019(02)
[6]植物抗重金属胁迫研究进展[J]. 王若男,乜兰春,张双双,崔强,贾明飞. 园艺学报. 2019(01)
[7]企鹅珍珠贝抗氧化系统对铜暴露的响应[J]. 严俊贤,李有宁,于刚,吴开畅,马振华,陈明强. 水产科学. 2018(04)
[8]高浓度镉、锌及其复合作用对烟草抗氧化系统的影响[J]. 杨微,王红艳,于开源,娄虹,纪光思,阮亚男. 应用生态学报. 2017(06)
[9]大豆根系应答重金属Cd胁迫的转录组分析[J]. 张晓娜,朴春兰,董友魁,崔敏龙. 应用生态学报. 2017(05)
[10]纤毛虫原生动物的分子生物学研究:若干热点领域及新进展[J]. 伊珍珍,苗苗,高珊,高凤,宋微波. 科学通报. 2016(20)
博士论文
[1]棉花响应盐胁迫分子机制的解析[D]. 孙恒.华中农业大学 2019
[2]原生动物棕鞭毛虫清除有毒微囊藻的环境效应及其降解藻毒素机制的研究[D]. 张露.南京师范大学 2019
[3]磷酸三（1，3-二氯异丙基）酯对原生动物嗜热四膜虫的毒性效应及作用机制[D]. 李静.华中农业大学 2018
[4]基于全转录组学的野生蕉（Musa itinerans）低温胁迫响应机制研究[D]. 刘炜婳.福建农林大学 2018
[5]稻种资源抗旱性评价、基因发掘与耐旱机制研究[D]. 马孝松.华中农业大学 2017
[6]里氏木霉铜代谢相关基因克隆与功能分析[D]. 傅科鹤.上海交通大学 2013
硕士论文
[1]中华山蓼对Cu2+胁迫的生理响应及转录组数据分析[D]. 李涛.云南师范大学 2019
[2]耐Cd2+有益酵母菌的筛选及其Cd2+吸附特性研究[D]. 王苏和.内蒙古农业大学 2018
[3]两种四环素类抗生素对三种纤毛虫的毒性效应研究[D]. 赵也.哈尔滨师范大学 2017
[4]重金属离子对三种纤毛虫的毒性研究[D]. 王晴.山东大学 2017
[5]重金属对棘尾虫的毒性作用及其富集能力的初步研究[D]. 李邦平.南京师范大学 2017
[6]饲料中添加镁、硒和虾青素对中华绒螯蟹幼蟹抗环境胁迫效应的研究[D]. 沈振华.华东师范大学 2017
[7]草鱼（Ctenopharyngodon idella）GRP78和抗氧化酶在抵抗温度、Pb2+胁迫中的功能[D]. 朱玉娇.南昌大学 2012
[8]环境胁迫对4株微藻叶绿素荧光特性的影响[D]. 冯力霞.中国海洋大学 2006
本文编号：3238316
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１转录组测序技术手段??８??
?山东大学硕士学位论文???第二章材料与方法??２．１实验动物??本实验用草履虫（Ｐａｒａｗｅｃ／ｗｗｓｐ．）由山东大学（威海）海洋学院６１３实验??室保种，经扩大培养获得，如图２－１。??￡??Ｉ?ｍ??图２－１草履虫活体照片??２．１．１萆屜虫的采集与分离??纤毛虫的适应能力强，在水体环境中十分常见，几乎遍布所有水域。但是，??具体到某一种纤毛虫的生活环境因其生活习性差异略有不同，草履虫为异养浮游??生物，喜欢有机质多的水体环境，可在有机质丰富的水塘、湖泊等地进行直接采??集，本实验室保种的草履虫取自威海市污水处理厂。??草履虫的分离：取少量采集到的淡水水样倒于培养皿中，将培养皿置于体视??镜下观察，用微吸管吸取草履虫虫体，微吸管口径不宜过大，以略大于草履虫虫??９??
?山东大学硕士学位论文???体为宜。将吸取的草履虫放置于另一千净培养皿中，观察。若吸取的水样中含有??其他物种，则需要重新吸取，直至吸取的水样中不含其他杂质生物［５６］。??２．１．２萆履虫的扩大培养??将分离出的草履虫加入到干净的培养皿中，并将草履虫大米培养液加入到培??养皿，扩大培养。当草履虫种群达到一定数量后，过滤米粒，以灭活后的大肠杆??菌为食物，继续扩大培养草履虫。??２．２培养液的制备??２．２．１大米培养液的制备??草履虫一般培养液的制备：将自来水煮沸后静置２４小时备用，将煮沸后的??自然水加入米粒（５粒／１００ｍｌ）滋养细菌供草履虫食用。??２．２．２大肠杆菌培养液的制备??培养基的制备：每１Ｌ纯水中添加蛋白胨１０ｇ、氯化钠（ＮａＣｌ）?１０ｇ、酵母??粉５?ｇ，固体培养基中还需添加琼脂，琼脂的添加量为每升１８?ｇ，调ｐＨ至７．２。??本实验所用大肠杆菌为保种于微生物实验室。液体培养基配置好后放于高压??蒸汽灭菌锅内灭菌后接种，将接种后的菌液置于恒温３７?°Ｃ条件下培养，培养??２４？４８?ｈ后于超净工作台下取菌，用血球计数板计数，计算大肠杆菌的浓度［５＇??［［Ｉｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｌｉｌｌ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??！?ＩＩ＂???ｎｉｆｌ?＿?ＸＢ－－Ｋ－２５Ｊ?－?■??１１?！?ｌａ??觀響兩；?ｉ?｜?－?［?Ｉ?１??图２－２血球计数板及计数室式样??１０??
【参考文献】：
期刊论文
[1]砷对PI3K/AKT信号通路调节效应的Meta分析[J]. 柴婧,王榆元,张静怡,牛强,胡云华,李毓,王海霞,李述刚. 环境卫生学杂志. 2020(01)
[2]进展中的原生动物学研究:热点领域与新格局[J]. 熊杰,陈建平,陈晓光,陈瑛,冯耀宇,高凤,高珊,顾福康,黄兵,梁爱华,龙红岸,赖德华,伦照荣,缪炜,倪兵,邱子健,邵晨,汪建国,文建凡,徐奎栋,余育和,张龙现,张西臣,赵元莙,宋微波. 中国科学:生命科学. 2019(10)
[3]转录组学主要研究技术及其应用概述[J]. 刘伟,郭光艳,秘彩莉. 生物学教学. 2019(10)
[4]Cu2+胁迫对福寿螺金属硫蛋白基因mRNA表达的影响[J]. 茅光耀,郭云海,张仪,肖宁. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2019(03)
[5]单细胞转录组测序技术原理及其应用[J]. 李丽娟,师书玥,张村宇,贺花,雷初朝,陈宏,黄永震. 中国畜牧杂志. 2019(02)
[6]植物抗重金属胁迫研究进展[J]. 王若男,乜兰春,张双双,崔强,贾明飞. 园艺学报. 2019(01)
[7]企鹅珍珠贝抗氧化系统对铜暴露的响应[J]. 严俊贤,李有宁,于刚,吴开畅,马振华,陈明强. 水产科学. 2018(04)
[8]高浓度镉、锌及其复合作用对烟草抗氧化系统的影响[J]. 杨微,王红艳,于开源,娄虹,纪光思,阮亚男. 应用生态学报. 2017(06)
[9]大豆根系应答重金属Cd胁迫的转录组分析[J]. 张晓娜,朴春兰,董友魁,崔敏龙. 应用生态学报. 2017(05)
[10]纤毛虫原生动物的分子生物学研究:若干热点领域及新进展[J]. 伊珍珍,苗苗,高珊,高凤,宋微波. 科学通报. 2016(20)
博士论文
[1]棉花响应盐胁迫分子机制的解析[D]. 孙恒.华中农业大学 2019
[2]原生动物棕鞭毛虫清除有毒微囊藻的环境效应及其降解藻毒素机制的研究[D]. 张露.南京师范大学 2019
[3]磷酸三（1，3-二氯异丙基）酯对原生动物嗜热四膜虫的毒性效应及作用机制[D]. 李静.华中农业大学 2018
[4]基于全转录组学的野生蕉（Musa itinerans）低温胁迫响应机制研究[D]. 刘炜婳.福建农林大学 2018
[5]稻种资源抗旱性评价、基因发掘与耐旱机制研究[D]. 马孝松.华中农业大学 2017
[6]里氏木霉铜代谢相关基因克隆与功能分析[D]. 傅科鹤.上海交通大学 2013
硕士论文
[1]中华山蓼对Cu2+胁迫的生理响应及转录组数据分析[D]. 李涛.云南师范大学 2019
[2]耐Cd2+有益酵母菌的筛选及其Cd2+吸附特性研究[D]. 王苏和.内蒙古农业大学 2018
[3]两种四环素类抗生素对三种纤毛虫的毒性效应研究[D]. 赵也.哈尔滨师范大学 2017
[4]重金属离子对三种纤毛虫的毒性研究[D]. 王晴.山东大学 2017
[5]重金属对棘尾虫的毒性作用及其富集能力的初步研究[D]. 李邦平.南京师范大学 2017
[6]饲料中添加镁、硒和虾青素对中华绒螯蟹幼蟹抗环境胁迫效应的研究[D]. 沈振华.华东师范大学 2017
[7]草鱼（Ctenopharyngodon idella）GRP78和抗氧化酶在抵抗温度、Pb2+胁迫中的功能[D]. 朱玉娇.南昌大学 2012
[8]环境胁迫对4株微藻叶绿素荧光特性的影响[D]. 冯力霞.中国海洋大学 2006
本文编号：3238316
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