α-平滑肌肌动蛋白对神经干细胞激活的影响
发布时间：2021-06-27 08:20
目的:探究α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）表达与神经干细胞（neural stem cells,NSCs）激活之间的关系及其潜在机制。方法:培养原代NSCs,鉴定ACTA2 siRNA对NSCs的转染效率。将细胞分为空白对照组（Control）、阴性对照组（Scramble）、溶剂对照组（Vehicle）、ACTA2敲低组（ACTA2 siRNA）,观察各组间NSCs增殖、分化、迁移的差异。进一步检测Rho家族（RhoA,Rac1,Cdc42）蛋白表达差异;用Rho相关蛋白激酶（ROCK）抑制剂Y27632干预ACTA2敲低的NSCs,观察NSCs的迁移变化。结果:1.培养的原代NSCs具有良好的干性及多潜能分化能力,α-SMA可在NSCs中明显表达,且ACTA2 siRNA明显下调了NSCs中α-SMA的表达。2.ACTA2 siRNA组Ki67阳性细胞百分比降低,NeuN蛋白表达降低,GFAP、Olig2蛋白表达升高,与Control、Scramble和Vehicle组相比均具有统计学差异（p<0.01）。3.ACTA2 siRNA...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
α-SMA在NSCs中表达Figure2-1.α-SMAexpressedinNSCs
ACTA2siRNA下调NSCs中α-SMA表达Figure2-2.ACTA2siRNAdecreasedexpressionofα-SMAinNSCs
遵义医科大学硕士学位论文张吉22（A）Ki67（绿色）免疫染色,细胞核用蓝色的DAPI复染。比例尺：100μm。（B）条形图总结了每组中Ki67+细胞百分比定量（每组n=6）。*p<0.01。2.3.2α-SMA表达下调可抑制NSCs向神经元的分化，促进其向胶质细胞分化使用ACTA2siRNA转染NSCs下调中α-SMA表达后，Westernblot结果显示与Control、Scramble和Vehicle组相比，ACTA2siRNA组NSCs的NeuN蛋白表达降低（图3-2A、B，p<0.01），GFAP、Olig2表达升高（图3-2A、C、D，p<0.01）。图3-2：α-SMA下调抑制NSCs向神经元分化，促进NSCs向胶质细胞分化Figure3-2.α-SMAdown-regulationinhibitedthedifferentiationofNSCsintoneuronsandpromotedNSCsdifferentiationintoglialcells（A）条带代表NeuN、GFAP、Olig2的表达。GAPDH用作内参对照。（B）定量来自（A）的NeuN表达（每组n＝3）。（C）从（A）定量Olig2表达（每组n=3）。（D）从（A）中量化GFAP表达（每组n=3）。*p<0.01。2.3.3α-SMA表达下调可抑制NSCs迁移
【参考文献】：
期刊论文
[1]Stem cells:a promising candidate to treat neurological disorders[J]. Chang-Geng Song,Yi-Zhe Zhang,Hai-Ning Wu,Xiu-Li Cao,Chen-Jun Guo,Yong-Qiang Li,Min-Hua Zheng,Hua Han. Neural Regeneration Research. 2018(07)
[2]牛磺酸抑制Rho/ROCK信号通路活性促进生长受限胎鼠神经干细胞增殖的研究[J]. 刘方,王燕,刘敬,马丽亚,吴志军,卢光进. 中华实用儿科临床杂志. 2017 (02)
[3]间充质干细胞迁移中的信号通路[J]. 黄生炫,刘窗溪. 医学信息(上旬刊). 2011(04)
[4]神经干细胞定向迁移机制研究新进展[J]. 陈二涛,刘勇,冯东福,汪洋,李文生. 中华神经医学杂志. 2008 (01)
[5]肌动蛋白与纽蛋白在神经干细胞定向分化为神经元过程中的表达[J]. 徐延豪,杜喆,石玉秀. 中国组织化学与细胞化学杂志. 2005(05)
博士论文
[1]Rho-GDIγ介导的神经干细胞分化调控网络及CDC50A-P4-ATPase相互作用与功能研究[D]. 王娇.上海大学 2012
本文编号：3252488
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
α-SMA在NSCs中表达Figure2-1.α-SMAexpressedinNSCs
ACTA2siRNA下调NSCs中α-SMA表达Figure2-2.ACTA2siRNAdecreasedexpressionofα-SMAinNSCs
遵义医科大学硕士学位论文张吉22（A）Ki67（绿色）免疫染色,细胞核用蓝色的DAPI复染。比例尺：100μm。（B）条形图总结了每组中Ki67+细胞百分比定量（每组n=6）。*p<0.01。2.3.2α-SMA表达下调可抑制NSCs向神经元的分化，促进其向胶质细胞分化使用ACTA2siRNA转染NSCs下调中α-SMA表达后，Westernblot结果显示与Control、Scramble和Vehicle组相比，ACTA2siRNA组NSCs的NeuN蛋白表达降低（图3-2A、B，p<0.01），GFAP、Olig2表达升高（图3-2A、C、D，p<0.01）。图3-2：α-SMA下调抑制NSCs向神经元分化，促进NSCs向胶质细胞分化Figure3-2.α-SMAdown-regulationinhibitedthedifferentiationofNSCsintoneuronsandpromotedNSCsdifferentiationintoglialcells（A）条带代表NeuN、GFAP、Olig2的表达。GAPDH用作内参对照。（B）定量来自（A）的NeuN表达（每组n＝3）。（C）从（A）定量Olig2表达（每组n=3）。（D）从（A）中量化GFAP表达（每组n=3）。*p<0.01。2.3.3α-SMA表达下调可抑制NSCs迁移
【参考文献】：
期刊论文
[1]Stem cells:a promising candidate to treat neurological disorders[J]. Chang-Geng Song,Yi-Zhe Zhang,Hai-Ning Wu,Xiu-Li Cao,Chen-Jun Guo,Yong-Qiang Li,Min-Hua Zheng,Hua Han. Neural Regeneration Research. 2018(07)
[2]牛磺酸抑制Rho/ROCK信号通路活性促进生长受限胎鼠神经干细胞增殖的研究[J]. 刘方,王燕,刘敬,马丽亚,吴志军,卢光进. 中华实用儿科临床杂志. 2017 (02)
[3]间充质干细胞迁移中的信号通路[J]. 黄生炫,刘窗溪. 医学信息(上旬刊). 2011(04)
[4]神经干细胞定向迁移机制研究新进展[J]. 陈二涛,刘勇,冯东福,汪洋,李文生. 中华神经医学杂志. 2008 (01)
[5]肌动蛋白与纽蛋白在神经干细胞定向分化为神经元过程中的表达[J]. 徐延豪,杜喆,石玉秀. 中国组织化学与细胞化学杂志. 2005(05)
博士论文
[1]Rho-GDIγ介导的神经干细胞分化调控网络及CDC50A-P4-ATPase相互作用与功能研究[D]. 王娇.上海大学 2012
本文编号：3252488
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/benkebiyelunwen/3252488.html
