真核表达的鸡CCCH型锌指抗病毒蛋白抗四种病毒感染研究
发布时间：2021-06-30 08:50
天然性抗病毒因子是一种具有抗病毒作用的宿主内源性免疫因子,是宿主与病毒周而复始的斗争中形成的抵抗病毒侵害的重要方式,在机体的免疫系统中扮演者重要的角色。研究表明,锌指蛋白（Zinc-Finger Protein）也是一种天然宿主内源性免疫因子,主要分布在动植物和微生物中,它可以调节细胞因子如白细胞介素、干扰素的表达,并直接调控淋巴细胞的生长和分化。鸡CCCH型锌指抗病毒蛋白（chZAP）是2002年通过体细胞克隆的功能基因组的方法筛选得到的宿主抗鼠白血病病毒（MLV）的蛋白因子,在鼠成纤维细胞中过表达chZAP能抑制MLV的复制。chZAP对引起人和动物发生的烈性病如埃博拉病毒、马尔堡病毒等有明显的抑制作用,但对于疱疹病毒、以及黄热病毒等并没有表现出其活跃的抗病毒活性,这表明chZAP不具有广谱抗病毒特性。尽管如此,关于其对禽类病毒的抗病毒活性知之甚少,对其结构和功能更是有待研究。现已证明,chZAP是通过降解病毒的mRNA来实现它的抗病毒作用,并且有研究表明其参与了T细胞的免疫反应,但其抗禽病毒谱却至今未知。本研究通过真核表达鸡chZAP,探究其对四种禽类经典病毒的抗病毒作用,将为开...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
chZAPPCR产物电泳分析
真核表达的鸡CCCH型锌指抗病毒蛋白抗四种病毒感染研究24图2重组质粒pBacPAK8-chZAP双酶切鉴定Fig.2IdentificationofpBacPAK8-chZAPrecombinantplasmiddigestedM:DL1000marker1、2:质粒pBacPAK8-chZAP双酶切产物M:DL1000marker1、2:ProductofplasmidpBacPAK8-chZAPrestrictionenzymedigestion3.3真核表达chZAP3.3.1P1代杆状病毒的制备将sf9细胞复苏、培养、传代，培养基为Sf-900ⅡSFM加10%FBS，培养条件为27℃，使用ErlenmeyerFlask125mlFlatCap或ErlenmeyerFlask250mlFlatCap培养瓶进行培养。按照说明书将含有目的基因的质粒转染至sf9细胞，生产P1代杆状病毒。命名为pBacPAK8-chZAPP1，4℃保存。图3重组杆状病毒在Sf9昆虫细胞中的增殖Fig.3ProliferationoftherecombinantbaculovirusesinSf9insectcells
真核表达的鸡CCCH型锌指抗病毒蛋白抗四种病毒感染研究24图2重组质粒pBacPAK8-chZAP双酶切鉴定Fig.2IdentificationofpBacPAK8-chZAPrecombinantplasmiddigestedM:DL1000marker1、2:质粒pBacPAK8-chZAP双酶切产物M:DL1000marker1、2:ProductofplasmidpBacPAK8-chZAPrestrictionenzymedigestion3.3真核表达chZAP3.3.1P1代杆状病毒的制备将sf9细胞复苏、培养、传代，培养基为Sf-900ⅡSFM加10%FBS，培养条件为27℃，使用ErlenmeyerFlask125mlFlatCap或ErlenmeyerFlask250mlFlatCap培养瓶进行培养。按照说明书将含有目的基因的质粒转染至sf9细胞，生产P1代杆状病毒。命名为pBacPAK8-chZAPP1，4℃保存。图3重组杆状病毒在Sf9昆虫细胞中的增殖Fig.3ProliferationoftherecombinantbaculovirusesinSf9insectcells
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡传染性法氏囊病的综合防控[J]. 刘丽. 现代畜牧科技. 2020(03)
[2]猪细小病毒AV30 VP2基因在昆虫细胞中表达及其免疫原性鉴定[J]. 李茜,代军飞,丁耀忠,ASHENAFI Kiros Wubshe,李国秀,马炳,张杰. 中国兽医科学. 2020(07)
[3]新城疫病毒7793 HN蛋白在昆虫SF9细胞中的表达研究[J]. 林宇宁,张磊,梁莹,樊晓晖. 基因组学与应用生物学. 2020(01)
[4]鸡马立克氏病特点及科学防控[J]. 刘敬旺. 畜禽业. 2020(01)
[5]禽新城疫的防控方案[J]. 赵丽月. 畜牧兽医科技信息. 2019(11)
[6]鸡新城疫病毒、鸡细小病毒和禽流感病毒三重PCR检测方法的建立及应用[J]. 奉彬,谢芝勋,邓显文,张艳芳,谢丽基,谢志勤,范晴,曾婷婷,罗思思,黄娇玲. 南方农业学报. 2019(11)
[7]鸡马立克氏病病毒逃逸宿主天然免疫的利器：致瘤蛋白Meq[J]. Li Kai,Liu Yongzhen,Xu Zengkun. 中国预防兽医学报. 2019(11)
[8]蛋鸡马立克氏病的流行病学、临床特征、病理变化和预防措施[J]. 刘影. 现代畜牧科技. 2019(11)
[9]禽网状内皮组织增生症及防控[J]. 吴伟伟. 畜牧兽医科技信息. 2019(08)
[10]水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E在昆虫细胞中的表达、鉴定及免疫原性分析[J]. 齐家龙,高瑞雨,靳输梅,高福兰,杨旭,马雁冰,刘存宝. 中国生物工程杂志. 2019(08)
博士论文
[1]鸡CARD11蛋白对新城疫病毒的抑制作用[D]. 王文彬.西北农林科技大学 2019
[2]基于转录组测序探究鸡SOCS3蛋白在NDV逃逸宿主天然免疫中的作用机制[D]. 王相伟.西北农林科技大学 2019
[3]鸡马立克氏病病毒调控DNA受体信号通路逃避宿主天然免疫反应的分子机制[D]. 刘永振.中国农业科学院 2019
[4]羊口疮病毒的分离鉴定与B2L和F1L基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及免疫原性分析[D]. 冯平.内蒙古农业大学 2018
硕士论文
[1]猪轮状病毒VP7蛋白在Sf9昆虫细胞中的表达及应用[D]. 黄晓星.扬州大学 2019
[2]禽网状内皮组织增生病病毒诱导宿主天然免疫反应及感染法氏囊转录组学的研究[D]. 孔正茹.扬州大学 2019
[3]猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp4切割ZAP的机制研究[D]. 杨玉婷.华中农业大学 2018
[4]禽网状内皮组织增生病病毒对雏鸡局部黏膜免疫的影响[D]. 刘晓静.东北农业大学 2018
[5]三种锌指蛋白在NDV、AIV感染中作用的初探[D]. 汪伟.广西大学 2017
本文编号：3257437
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
chZAPPCR产物电泳分析
真核表达的鸡CCCH型锌指抗病毒蛋白抗四种病毒感染研究24图2重组质粒pBacPAK8-chZAP双酶切鉴定Fig.2IdentificationofpBacPAK8-chZAPrecombinantplasmiddigestedM:DL1000marker1、2:质粒pBacPAK8-chZAP双酶切产物M:DL1000marker1、2:ProductofplasmidpBacPAK8-chZAPrestrictionenzymedigestion3.3真核表达chZAP3.3.1P1代杆状病毒的制备将sf9细胞复苏、培养、传代，培养基为Sf-900ⅡSFM加10%FBS，培养条件为27℃，使用ErlenmeyerFlask125mlFlatCap或ErlenmeyerFlask250mlFlatCap培养瓶进行培养。按照说明书将含有目的基因的质粒转染至sf9细胞，生产P1代杆状病毒。命名为pBacPAK8-chZAPP1，4℃保存。图3重组杆状病毒在Sf9昆虫细胞中的增殖Fig.3ProliferationoftherecombinantbaculovirusesinSf9insectcells
真核表达的鸡CCCH型锌指抗病毒蛋白抗四种病毒感染研究24图2重组质粒pBacPAK8-chZAP双酶切鉴定Fig.2IdentificationofpBacPAK8-chZAPrecombinantplasmiddigestedM:DL1000marker1、2:质粒pBacPAK8-chZAP双酶切产物M:DL1000marker1、2:ProductofplasmidpBacPAK8-chZAPrestrictionenzymedigestion3.3真核表达chZAP3.3.1P1代杆状病毒的制备将sf9细胞复苏、培养、传代，培养基为Sf-900ⅡSFM加10%FBS，培养条件为27℃，使用ErlenmeyerFlask125mlFlatCap或ErlenmeyerFlask250mlFlatCap培养瓶进行培养。按照说明书将含有目的基因的质粒转染至sf9细胞，生产P1代杆状病毒。命名为pBacPAK8-chZAPP1，4℃保存。图3重组杆状病毒在Sf9昆虫细胞中的增殖Fig.3ProliferationoftherecombinantbaculovirusesinSf9insectcells
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡传染性法氏囊病的综合防控[J]. 刘丽. 现代畜牧科技. 2020(03)
[2]猪细小病毒AV30 VP2基因在昆虫细胞中表达及其免疫原性鉴定[J]. 李茜,代军飞,丁耀忠,ASHENAFI Kiros Wubshe,李国秀,马炳,张杰. 中国兽医科学. 2020(07)
[3]新城疫病毒7793 HN蛋白在昆虫SF9细胞中的表达研究[J]. 林宇宁,张磊,梁莹,樊晓晖. 基因组学与应用生物学. 2020(01)
[4]鸡马立克氏病特点及科学防控[J]. 刘敬旺. 畜禽业. 2020(01)
[5]禽新城疫的防控方案[J]. 赵丽月. 畜牧兽医科技信息. 2019(11)
[6]鸡新城疫病毒、鸡细小病毒和禽流感病毒三重PCR检测方法的建立及应用[J]. 奉彬,谢芝勋,邓显文,张艳芳,谢丽基,谢志勤,范晴,曾婷婷,罗思思,黄娇玲. 南方农业学报. 2019(11)
[7]鸡马立克氏病病毒逃逸宿主天然免疫的利器：致瘤蛋白Meq[J]. Li Kai,Liu Yongzhen,Xu Zengkun. 中国预防兽医学报. 2019(11)
[8]蛋鸡马立克氏病的流行病学、临床特征、病理变化和预防措施[J]. 刘影. 现代畜牧科技. 2019(11)
[9]禽网状内皮组织增生症及防控[J]. 吴伟伟. 畜牧兽医科技信息. 2019(08)
[10]水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E在昆虫细胞中的表达、鉴定及免疫原性分析[J]. 齐家龙,高瑞雨,靳输梅,高福兰,杨旭,马雁冰,刘存宝. 中国生物工程杂志. 2019(08)
博士论文
[1]鸡CARD11蛋白对新城疫病毒的抑制作用[D]. 王文彬.西北农林科技大学 2019
[2]基于转录组测序探究鸡SOCS3蛋白在NDV逃逸宿主天然免疫中的作用机制[D]. 王相伟.西北农林科技大学 2019
[3]鸡马立克氏病病毒调控DNA受体信号通路逃避宿主天然免疫反应的分子机制[D]. 刘永振.中国农业科学院 2019
[4]羊口疮病毒的分离鉴定与B2L和F1L基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及免疫原性分析[D]. 冯平.内蒙古农业大学 2018
硕士论文
[1]猪轮状病毒VP7蛋白在Sf9昆虫细胞中的表达及应用[D]. 黄晓星.扬州大学 2019
[2]禽网状内皮组织增生病病毒诱导宿主天然免疫反应及感染法氏囊转录组学的研究[D]. 孔正茹.扬州大学 2019
[3]猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp4切割ZAP的机制研究[D]. 杨玉婷.华中农业大学 2018
[4]禽网状内皮组织增生病病毒对雏鸡局部黏膜免疫的影响[D]. 刘晓静.东北农业大学 2018
[5]三种锌指蛋白在NDV、AIV感染中作用的初探[D]. 汪伟.广西大学 2017
本文编号：3257437
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