细菌生物被膜对抗生素屏障能力的评估及其在活性化合物筛选中的应用
发布时间：2021-08-10 10:28
细菌生物被膜是附着在生物或者非生物表面并由胞外基质所包裹的系统化、组织化的细菌多细胞群落。生物被膜的形成能帮助细菌抵抗不利环境并产生抗逆性状,与病原微生物的致病性及耐药性密切相关,从而成为抗生素类药物筛选和评估的重要模式材料。已有的研究表明,细菌生物被膜的耐药性是多种机制共同作用的结果,其中胞外基质的屏障作用是抵御抗生素入侵的“第一道防线”。琼脂盘扩散测定法被广泛用于细菌生物被膜对抗生素屏障能力的快速测试,但是存在着使用的生物被膜与临床上病原细菌形成的生物被膜有较大差异,以及测试耗时耗力,通量较低,不适合用于大规模活性化合物筛选等问题。针对这些不足,本文建立了一种抗生素渗透浸没培养细菌生物被膜快速分析法,并对该方法进行了评估与应用。我们选取了活性筛选的常用标准菌株大肠杆菌K12以及临床上两类导致生物被膜相关感染的重要病原细菌革兰氏阴性的鲍氏不动杆菌ATCC19606和革兰氏阳性的变异链球菌UA159作为基本实验菌株。针对性优化了生物被膜浸没培养条件,利用Transwell小室系统,在其滤膜上培养了三种细菌的浸没生物被膜。与琼脂盘扩散测定法中使用的生物被膜进行了对比分析,结果表明,相较于...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：104 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１细菌生物膜的形成过程??
ｓ?息??Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ，?Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ?Ｏｒｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ，?ＯＨｓｔｅ．?Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｉ?ａｎｄ?＾ＮＳ＞＜ａｃｔｉｒ？ｏｍｙｃｅｔｅ?（ｃ）??４－?Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，?ＥｕｂａｃｔｅｒＨｉｍ?Ａｃｔｍｏｍｙｃｒｔｅ＾＾＾?ＰＭｕｄｏｍｏｎａｓ?（ｆ）－２?ｗｒ??ｓｒｔｅ６ａｃｊｊ＾ｐｒ＾?妒??Ｏｂ？ｉｔ＞?（ｄ）?Ｃｏｌｏｎ?Ｃａｎｃｅｒ?（ｈ）???陳時）??Ｐａｎｃｒｔａｔｉｃ?Ｃａｎｃｅｒ?（ｇ）???图１－４?口腔微生物群与口腔和全身疾病有关引自文献（Ｌｕｅ／此２０１９）??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?Ｏｒａｌ?ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ?ｉｓ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｔｏ?ｏｒａｌ?ａｎｄ?ｓｙｓｔｅｍｉｃ?ｄｉｓｅａｓｅｓ?（Ｌｕ?ｅｔ?ａ／．，?２０１９）??１．６牙菌斑生物被膜与龋病的发生??１．６．１牙菌斑与龋病??牙菌斑（ｄｅｎｔａｌ?ｐｌａｑｕｅ）是口腔菌群在牙齿上聚集形成的高度结构化的典型??的生物被膜。这种生存方式可以帮助口腔细菌抵御苛刻的口腔环境变化，起到屏??障作用，同时便于摄取和！Ｃ藏食物，提高局部的营养物浓度（Ｚｈａｎｇｅ／ｏ／．，２０１１）。??齿禹病（ｄｅｎｔａｌ?ｃａｒｉｅｓ）是多种因素共同作用下由口腔菌群引起的内源性慢性感??染性疾病，并且在口腔疾病中发病率最高。龋病在形成初期通常形成在牙齿表面??难以看见的裂缝（沟槽）中或牙齿之间；或在牙齿上形成可见的灰白色的斑点；??在牙颈上出现有凹凸感的环状痕迹；或在牙齿咬合表面上形成的阴影或污渍。患??者若得不到及时的治疗，其它病原微生物易通过受损伤的牙齿引起口腔甚至颅面??８??
????多样性下降。牙菌斑生物被膜生态和结构发生变化。生物被膜中以Ｓ．ｍｗ／ａｍ为??代表的菌群开始增加并产生大量有机酸，改变了口腔生物被膜的代谢，从而导致??环境ｐＨ值降低。牙釉质的羟基磷灰石结构周围不断出现的低ｐＨ环境会导致脱??矿质并引发龋病过程。生物被膜胞外基质的包裹使得致龋细菌在空间上的分布更??加紧密，从而可以提高牙齿局部表面的酸浓度；同时生物被膜也为致龋细菌提供??了多样的保护性，赋予了细菌对于各种环境因子、化学物质甚至宿主免疫系统更??强的抗性（Ｂｏｗｅｎ?〇／．，２０１８）。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Antimicrobial resistance in clinically important biofilms[J]. Fatemeh Rafii,Mark E Hart. World Journal of Pharmacology. 2015(01)
[2]细菌生物膜与龋齿相关性的研究进展[J]. 张欣然,刘新. 中国微生态学杂志. 2011(05)
[3]细菌生物被膜鉴定方法的研究进展[J]. 胡锦松,陈豪泰,张杰,刘永生,徐志文,朱玲,徐凯,年阳阳,古峰. 中国兽医科学. 2010(11)
[4]Extracellular Polysaccharides Matrix—An Often Forgotten Virulence Factor in Oral Biofilm Research[J]. Hyun Koo,Marlise I.Klein. International Journal of Oral Science. 2009(04)
[5]变形链球菌生物膜形成相关基因的研究进展[J]. 刘筱娣,郭丽宏. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2006(09)
本文编号：3333894
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：104 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１细菌生物膜的形成过程??
ｓ?息??Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ，?Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ?Ｏｒｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ，?ＯＨｓｔｅ．?Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｉ?ａｎｄ?＾ＮＳ＞＜ａｃｔｉｒ？ｏｍｙｃｅｔｅ?（ｃ）??４－?Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，?ＥｕｂａｃｔｅｒＨｉｍ?Ａｃｔｍｏｍｙｃｒｔｅ＾＾＾?ＰＭｕｄｏｍｏｎａｓ?（ｆ）－２?ｗｒ??ｓｒｔｅ６ａｃｊｊ＾ｐｒ＾?妒??Ｏｂ？ｉｔ＞?（ｄ）?Ｃｏｌｏｎ?Ｃａｎｃｅｒ?（ｈ）???陳時）??Ｐａｎｃｒｔａｔｉｃ?Ｃａｎｃｅｒ?（ｇ）???图１－４?口腔微生物群与口腔和全身疾病有关引自文献（Ｌｕｅ／此２０１９）??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?Ｏｒａｌ?ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ?ｉｓ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｔｏ?ｏｒａｌ?ａｎｄ?ｓｙｓｔｅｍｉｃ?ｄｉｓｅａｓｅｓ?（Ｌｕ?ｅｔ?ａ／．，?２０１９）??１．６牙菌斑生物被膜与龋病的发生??１．６．１牙菌斑与龋病??牙菌斑（ｄｅｎｔａｌ?ｐｌａｑｕｅ）是口腔菌群在牙齿上聚集形成的高度结构化的典型??的生物被膜。这种生存方式可以帮助口腔细菌抵御苛刻的口腔环境变化，起到屏??障作用，同时便于摄取和！Ｃ藏食物，提高局部的营养物浓度（Ｚｈａｎｇｅ／ｏ／．，２０１１）。??齿禹病（ｄｅｎｔａｌ?ｃａｒｉｅｓ）是多种因素共同作用下由口腔菌群引起的内源性慢性感??染性疾病，并且在口腔疾病中发病率最高。龋病在形成初期通常形成在牙齿表面??难以看见的裂缝（沟槽）中或牙齿之间；或在牙齿上形成可见的灰白色的斑点；??在牙颈上出现有凹凸感的环状痕迹；或在牙齿咬合表面上形成的阴影或污渍。患??者若得不到及时的治疗，其它病原微生物易通过受损伤的牙齿引起口腔甚至颅面??８??
????多样性下降。牙菌斑生物被膜生态和结构发生变化。生物被膜中以Ｓ．ｍｗ／ａｍ为??代表的菌群开始增加并产生大量有机酸，改变了口腔生物被膜的代谢，从而导致??环境ｐＨ值降低。牙釉质的羟基磷灰石结构周围不断出现的低ｐＨ环境会导致脱??矿质并引发龋病过程。生物被膜胞外基质的包裹使得致龋细菌在空间上的分布更??加紧密，从而可以提高牙齿局部表面的酸浓度；同时生物被膜也为致龋细菌提供??了多样的保护性，赋予了细菌对于各种环境因子、化学物质甚至宿主免疫系统更??强的抗性（Ｂｏｗｅｎ?〇／．，２０１８）。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Antimicrobial resistance in clinically important biofilms[J]. Fatemeh Rafii,Mark E Hart. World Journal of Pharmacology. 2015(01)
[2]细菌生物膜与龋齿相关性的研究进展[J]. 张欣然,刘新. 中国微生态学杂志. 2011(05)
[3]细菌生物被膜鉴定方法的研究进展[J]. 胡锦松,陈豪泰,张杰,刘永生,徐志文,朱玲,徐凯,年阳阳,古峰. 中国兽医科学. 2010(11)
[4]Extracellular Polysaccharides Matrix—An Often Forgotten Virulence Factor in Oral Biofilm Research[J]. Hyun Koo,Marlise I.Klein. International Journal of Oral Science. 2009(04)
[5]变形链球菌生物膜形成相关基因的研究进展[J]. 刘筱娣,郭丽宏. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2006(09)
本文编号：3333894
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