Latcripin-5的克隆表达、纯化及其生物学活性的研究

发布时间：2022-02-04 21:18

　　香菇C91-3菌株是由我课题组多年筛选得到的一株药用真菌。本实验组经过对香菇C91-3菌株转录组多年的测序和其功能的解析,从而初步的筛选出17条与细胞活性相关的基因。我们通过利用RACE（Rapid Amplificatioon of cDNA Ends,快速cDNA末端扩增）技术获得所筛选基因序列的全长。本实验研究关注的是经帅选出的所有功能基因中的第5条基因,所以将其命名为latcripin-5基因（简称为LP-5）。我们通过对latcripin-5基因的生物信息学比对,从而得出该基因具有降解核酸的作用。目的:本实验主要是通过构建香菇C91-3菌株pET32a（+）-latcripin-5的原核重组表达载体,并使原核重组表达载体在大肠杆菌Ecoli.R中进行诱导表达。通过对诱导表达产物的生物学活性的检测,来确定香菇中具有对细胞核酸发生降解作用和生物活性作用的功能性蛋白。①通过生物信息学软件寻找并确定Latcripin-5基因序列及其功能蛋白。②将构建的重组原核表达载体中的Latcripin-5基因转入大肠杆菌Ecoli.R中进行诱导表达,并对诱导表达的产物进行生物学活性及功能的鉴定,... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 Latcripin-5 的克隆、表达及纯化的研究
    前言
    材料和方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 Latcripin-5 的蛋白的生物学活性的研究
    前言
    材料和方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]结构特异性核酸内切酶FEN1及其与肿瘤的关系[J]. 周婷,高婷婷,孙洪芳,潘飞燕,何凌峰,郭志刚.  南京师大学报(自然科学版). 2014(02)
[2]香菇C91-3转录本Unigene14872基因Pkinase结构域的克隆表达及其生物信息学分析[J]. 杜忠娟,钟民涛,伦永志,刘奔,张伟,王晓丽,李星云,曹靖,宁安红,黄敏.  微生物学杂志. 2014(01)
[3]重组蛋白表达系统的研究进展[J]. 范翠英,冯利兴,樊金玲,果德安,刘璇.  生物技术. 2012(02)
[4]香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414对人肺癌细胞A549凋亡作用及其机制的研究[J]. 刘奔,钟民涛,王晓丽,孙文长,李星云,刘磊,张伟,黄敏.  中华肿瘤防治杂志. 2012(06)
[5]香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中的表达与鉴定[J]. 刘奔,钟民涛,王晓丽,孙文长,李星云,刘磊,宁安红,黄敏.  中国微生态学杂志. 2012(02)
[6]香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414对小鼠肝癌细胞Hca生物学功能的影响[J]. 刘奔,钟民涛,王晓丽,孙文长,宁安红,李星云,刘磊,黄敏.  大连医科大学学报. 2012(01)
[7]药用真菌抗肿瘤作用机制研究进展[J]. 申静,房娟,伍治平,王熙才.  现代肿瘤医学. 2012(01)
[8]香菇C91-3菌丝发酵液蛋白口服液抗肿瘤免疫机制的探讨[J]. 钟民涛,王晓丽,刘颖丽,刘磊,李星云,张伟,黄敏.  大连医科大学学报. 2011(06)
[9]多环芳烃接触工人外周血DNA损伤与片状核酸内切酶基因多态性的关系[J]. 宾萍,段化伟,冷曙光,程娟,潘祖飞,戴宇飞,牛勇,刘清君,陈泓,刘庆,郑玉新.  工业卫生与职业病. 2011(01)
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博士论文
[1]PARP-1在甲醛诱导的早期健康损害效应中的作用[D]. 贾效伟.中国疾病预防控制中心 2014
[2]香菇C91-3转录组Latcirpin-3基因的原核表达、纯化及其生物学活性的研究[D]. 安晓华.大连医科大学 2014

硕士论文
[1]基因重组香菇C91-3菌凋亡相关蛋白Latcripin-2的克隆表达、纯化及其抗肿瘤活性研究[D]. 杜忠娟.大连医科大学 2014
[2]褐藻多糖硫酸酯对人肺腺癌A549细胞增殖、迁移与凋亡的影响[D]. 王佳.大连医科大学 2012
[3]基于纳米粒子及核酸内切酶的DNA生物传感器及逻辑门的研究[D]. 孙丽.青岛科技大学 2011
[4]柔嫩艾美耳球虫3个发育相关基因的研究[D]. 马卫娇.上海师范大学 2011
[5]艾迪注射液对食管癌术前干预的分子机制研究[D]. 王剑蓉.南京中医药大学 2007



本文编号：3613959