Robo2对果蝇痛觉神经元轴突发育及逃避反应的影响
发布时间:2022-08-02 16:39
目的:Robo2是免疫球蛋白超家族Robos家族的成员之一,主要参与神经轴突引导、树突分支、神经修复及神经-肌肉接头处细胞迁移的作用。本课题利用果蝇痛觉神经元(简称为C4da神经元)作为研究对象,观察Robo2对果蝇C4da神经元轴突发育及应激反应的影响,为进一步揭示Robo2的生物作用提供实验依据。方法:1.通过杂交建立适用于单细胞基因调控技术的转基因果蝇体系。2.应用GAL4/UAS特异性驱动系统,观察过表达和突变Robo2对神经元轴突形态结构的影响。3.观察不同类型神经元过表达Robo2对果蝇幼虫逃避行为的影响。结果:1.在全部C4da神经元上均过表达Robo2后,可导致单个C4da神经元轴突末梢过度生长,包括ddaC、v’ada和vdaB(P<0.01);在野生型背景下,只在单一C4da神经元过表达Robo2时,可导致单个C4da神经元轴突末梢减少,即单一ddaC过表达Robo2可导致轴突末梢长度及对侧投射长度均减少(P<0.001)。2.在行为学实验中,与对照组相比,过表达Robo2于全部C4da神经元可引发果蝇幼虫对于紫外线刺激的潜伏期缩短(P<0.001...
【文章页数】:55 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
1 材料
1.1 实验主要试剂、仪器
1.1.1 实验主要试剂
1.1.2 实验主要仪器
1.2 果蝇培养基和实验试剂的配制
2 实验方法
2.1 GAL4/UAS表达系统
2.2 FLP/FRT特异性重组系统
2.3 单细胞基因调控技术
2.3.1 Flip-out
2.3.2 MARCM
2.4 行为学实验方法
2.4.1 果蝇基因型
2.4.2 行为学实验方法
2.4.3 行为学指标
2.5 神经元轴突末梢测量方法
2.6 统计学方法
3 结果
3.1 过表达Robo2对C4da神经元形态的影响
3.2 过表达Robo2和Robo2突变对果蝇幼虫逃避行为的影响
3.3 过表达Robo2于5-HT神经元、蘑菇体、全部神经元及神经胶质细胞等对果蝇幼虫逃避行为的影响
3.4 过表达Robo2对于5-HT神经元,多巴胺神经元形态的影响
3.5 过表达Robo3对于C4da神经元形态的影响
4 讨论
结论
参考文献
文献综述
参考文献
附录A 附录内容名称
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]过表达NF-κB家族蛋白对果蝇三龄幼虫伤害性逃避反应的影响[J]. 薛文娟,梁玉花,齐萌萌,曲鹏,张庆镐,杨利敏. 解剖科学进展. 2019(01)
[2]应用GAL4/UAS异位表达系统筛选果蝇视觉基因的研究[J]. 杨治平,陈晓姣,李建波,郭抗萧,严永旺,杨智英. 新疆医科大学学报. 2018(01)
[3]Slit-Robo信号通路在神经轴突生长和血管新生中作用研究进展[J]. 王晓鹤,周玉云,黄晓慧,马学玲. 生物医学工程与临床. 2017(04)
[4]免疫组织化学实验技术教学实践与体会[J]. 谢远杰,莫中成,李美香,龙双涟. 基础医学教育. 2017(02)
[5]催生诺贝尔奖的昆虫——果蝇[J]. 梁前进,王婷娜. 生物学通报. 2015(11)
[6]神经轴突导向分子Robo的功能及其分子作用机制研究进展(英文)[J]. 李晓童,周启升,于奇,赵晓,刘庆信. 生理学报. 2014(03)
[7]Slit-Robo信号通路作用的研究进展[J]. 李霖,卿国忠. 国际病理科学与临床杂志. 2013(01)
[8]黑腹果蝇细胞谱系分析方法进展[J]. 张柿平,薛雷. 遗传. 2012(07)
[9]FLP/FRT位点特异性重组系统在高等真核生物中的研究进展[J]. 赵爱春,龙定沛,谭兵,许龙霞,向仲怀. 中国农业科学. 2011(15)
[10]GAL4/UAS系统在转基因技术中的应用研究进展[J]. 李春峰,夏庆友,周泽扬. 生物技术. 2006(01)
博士论文
[1]免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D]. 孙亚妮.山东农业大学 2011
硕士论文
[1]FLP重组酶表达载体的构建及其在FLP/FRT系统中的应用[D]. 肖雪宾.吉林大学 2012
本文编号:3668871
【文章页数】:55 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
1 材料
1.1 实验主要试剂、仪器
1.1.1 实验主要试剂
1.1.2 实验主要仪器
1.2 果蝇培养基和实验试剂的配制
2 实验方法
2.1 GAL4/UAS表达系统
2.2 FLP/FRT特异性重组系统
2.3 单细胞基因调控技术
2.3.1 Flip-out
2.3.2 MARCM
2.4 行为学实验方法
2.4.1 果蝇基因型
2.4.2 行为学实验方法
2.4.3 行为学指标
2.5 神经元轴突末梢测量方法
2.6 统计学方法
3 结果
3.1 过表达Robo2对C4da神经元形态的影响
3.2 过表达Robo2和Robo2突变对果蝇幼虫逃避行为的影响
3.3 过表达Robo2于5-HT神经元、蘑菇体、全部神经元及神经胶质细胞等对果蝇幼虫逃避行为的影响
3.4 过表达Robo2对于5-HT神经元,多巴胺神经元形态的影响
3.5 过表达Robo3对于C4da神经元形态的影响
4 讨论
结论
参考文献
文献综述
参考文献
附录A 附录内容名称
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]过表达NF-κB家族蛋白对果蝇三龄幼虫伤害性逃避反应的影响[J]. 薛文娟,梁玉花,齐萌萌,曲鹏,张庆镐,杨利敏. 解剖科学进展. 2019(01)
[2]应用GAL4/UAS异位表达系统筛选果蝇视觉基因的研究[J]. 杨治平,陈晓姣,李建波,郭抗萧,严永旺,杨智英. 新疆医科大学学报. 2018(01)
[3]Slit-Robo信号通路在神经轴突生长和血管新生中作用研究进展[J]. 王晓鹤,周玉云,黄晓慧,马学玲. 生物医学工程与临床. 2017(04)
[4]免疫组织化学实验技术教学实践与体会[J]. 谢远杰,莫中成,李美香,龙双涟. 基础医学教育. 2017(02)
[5]催生诺贝尔奖的昆虫——果蝇[J]. 梁前进,王婷娜. 生物学通报. 2015(11)
[6]神经轴突导向分子Robo的功能及其分子作用机制研究进展(英文)[J]. 李晓童,周启升,于奇,赵晓,刘庆信. 生理学报. 2014(03)
[7]Slit-Robo信号通路作用的研究进展[J]. 李霖,卿国忠. 国际病理科学与临床杂志. 2013(01)
[8]黑腹果蝇细胞谱系分析方法进展[J]. 张柿平,薛雷. 遗传. 2012(07)
[9]FLP/FRT位点特异性重组系统在高等真核生物中的研究进展[J]. 赵爱春,龙定沛,谭兵,许龙霞,向仲怀. 中国农业科学. 2011(15)
[10]GAL4/UAS系统在转基因技术中的应用研究进展[J]. 李春峰,夏庆友,周泽扬. 生物技术. 2006(01)
博士论文
[1]免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D]. 孙亚妮.山东农业大学 2011
硕士论文
[1]FLP重组酶表达载体的构建及其在FLP/FRT系统中的应用[D]. 肖雪宾.吉林大学 2012
本文编号:3668871
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