干扰素诱导的APOBEC3蛋白对正常细胞的影响

发布时间：2023-03-04 16:46

　　生物体在应对病毒以及细菌等病原体感染与侵袭的过程中,有各种各样的防御措施,主要包括非特异性的天然免疫和特异性的获得性免疫。天然免疫系统通过模式识别受体识别病原体的核酸等成份从而激活细胞内一系列信号通路,诱导干扰素和炎症因子等抗病毒基因表达,启动固有免疫和炎症反应,进而清除病原体。载脂蛋白B mRNA编辑催化多肽(Apolipoprotein B mRNA-editing catalytic polypeptide,APOBEC)是干扰素诱导的重要抗病毒蛋白之一。多数APOBEC蛋白都能通过脱氨酶的作用编辑DNA或RNA序列,致使病毒基因组大量突变而抑制病毒复制。APOBEC家族最早得到关注是由于其具有抑制HIV病毒复制的功能。深入的研究发现APOBEC家族成员在抵抗与人类紧密相关的许多病毒如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人乳头瘤病毒、人类嗜T细胞病毒的过程中发挥同样重要的作用。人的APOBEC家族包括11个成员,除APOBEC2和APOBEC4外,其它APOBEC成员都能够通过脱氨反应使单链DNA(single-strand DNA,ssDNA)或RNA中的胞嘧啶脱氨转化为尿嘧啶(C-t...

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 病毒感染与干扰素的关系
    1.2 干扰素
        1.2.1 干扰素的分类
        1.2.2 干扰素的发现
        1.2.3 干扰素的活性和治疗用途
        1.2.4 干扰素的副作用
    1.3 癌症与APOBEC3关系
    1.4 APOBEC家族
        1.4.1 APOBEC
        1.4.2 APOBEC3亚家族
        1.4.3 APOBEC3B
        1.4.4 APOBEC3G
    1.5 APOBEC3的致突变机制
    1.6 本课题主要研究内容
    1.7 本课题的目的和意义
第二章 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 实验试剂及主要溶液配制
        2.1.3 实验主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 荧光定量PCR实验(q RT-PCR)
        2.2.3 慢病毒转染
        2.2.4 siRNA转染
        2.2.5 细胞总蛋白质提取
        2.2.6 Western blot实验
        2.2.7 免疫荧光染色实验
        2.2.8 细胞周期检测
        2.2.9 细胞凋亡检测
        2.2.10 彗星实验
        2.2.11 MTT实验
        2.2.12 集落形成实验
第三章 干扰素诱导的APOBEC3蛋白对正常细胞的影响
    3.1 干扰素处理对APOBEC3家族表达的作用
        3.1.1 干扰素处理对APOBEC3家族m RNA表达水平影响
        3.1.2 干扰素处理对APOBEC3家族蛋白表达水平影响
    3.2 干扰素处理后对细胞相关影响
        3.2.1 构建APOBEC3B高表达以及si APOBEC3B细胞系
        3.2.2 APOBEC3B表达对细胞周期的影响
        3.2.3 APOBEC3B表达对细胞凋亡的影响
        3.2.4 干扰素处理Beas2b细胞后细胞DNA损伤情况
        3.2.5 干扰素处理Beas2b细胞后对细胞存活及增殖的影响
结论
参考文献
作者简介
致谢



本文编号：3754634