水稻长护颖突变体和条纹叶突变体的基因鉴定与qRT-PCR表达分析

发布时间：2023-03-21 19:47

　　第一部分水稻长护颖突变体的基因克隆与表达分析利用EMS对水稻(Oryza sativaL.)保持系品种宜香1B进行诱变,筛选出三份长护颖突变体Oslg-1, Oslg-2和Oslg-3,通过表型分析、等位性鉴定、基因定位和生物信息学分析,以及qRT-PCR表达分析,获得如下结果：1. Oslg-1突变体小穗在幼穗发育早期与野生型无明显差异,但在成熟期其护颖的远轴表皮细胞凸起且粗糙,形成的结节轴向对齐排列,且毛状物较多,形成垂直相间的横纵沟,表皮细胞结构与外稃的极其相似。2.利用F2分离群体对突变体Oslg-1进行基因定位,遗传分析表明,Oslg-1受一对隐性单基因控制,将OsLG基因定位于第7染色体短臂SSR标记RM5344和RM20934之间,遗传距离分别为1.11 cM和0.82 cM,物理距离为246.3 kb。3.对该区域候选基因测序分析,发现LOC_Os07g04670在编码区第182位碱基发生突变(T→A),导致其编码蛋白第61位氨基酸改变(Leu→His)。等位性分析表明,Oslg-2, Oslg-3与Oslg-1属等位变异,进而对突变体Oslg-2和...

【文章页数】：80 页

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 水稻长护颖突变体的基因克隆与表达分析
    第一章 文献综述
        1 引言
        2 水稻花器官发育
            2.1 水稻花序分化及发育
            2.2 水稻小穗的发育过程
        3 水稻花器官发育相关基因的研究进展
        4 水稻长护颖相关基因的研究进展
        5 本研究的目的和意义
    第二章 材料与方法
        1 实验材料
            1.1 材料
            1.2 试剂
            1.3 仪器
        2 实验方法
            2.1 突变体Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3等位性鉴定
            2.2 农艺性状考查及穗部表型观察
            2.3 组织细胞学观察
            2.4 遗传分析及群体构建
            2.5 基因定位
            2.6 候选基因的序列扩增及测序
            2.7 基因OsLG的序列同源比对及进化分析
            2.8 基因OsLG和PAP2的实时荧光定量组织表达分析
    第三章 结果与分析
        1 突变体花器官分析
            1.1 突变体Oslg表型分析
            1.2 突变体Oslg的组织细胞学分析
        2 突变体Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3的等位性分析
        3 突变体Oslg-1的遗传分析
        4 突变体Oslg-1的基因定位
        5 突变体Oslg-1的候选基因的序列分析
        6 基因OsLG的序列同源比对及进化分析
        7 OsLG和PAP2实时荧光定量(qRT-PCR)组织表达分析
    第四章 讨论
        1 水稻长护颖基因的研究概况
        2 长护颖突变体之间的等位差异
        3 基因OsLG和PAP2的表达差异分析预测
        4 小结与展望
第二部分 水稻温敏型突变体stripe1-2和stripe1-3中的核糖核苷酸还原酶小亚基负责叶绿素的生物合成
    第一章 文献综述
        1 引言
        2 叶绿体的研究概况
            2.1 叶绿体结构及发育
            2.2 影响水稻叶绿体发育的相关基因
        3 叶绿素生物合成、调控与降解途径的研究进展
            3.1 叶绿素的生物合成途径
            3.2 叶绿素生物合成途径的调控
            3.3 叶绿素的降解途径
        4 质核信号的调控途径
        5 叶色突变体的类型
        6 叶色突变体的应用价值
        7 水稻叶色突变相关基因的研究进展
        8 本研究的目的和意义
    第二章 材料与方法
        1 实验材料
        2 实验方法
            2.1 突变体stl-2和stl-3等位性鉴定
            2.2 农艺性状调查、遗传群体构建及遗传分析
            2.3 叶绿素和类胡萝卜素含量测定
            2.4 光合作用的测定
            2.5 透射电子显微镜观察
            2.6 基因定位
            2.7 候选基因的预测及测序
            2.8 蛋白结构分析
            2.9 温度梯度实验
            2.10 实时荧光定量定量PCR(qRT-PCR)特异性分析
    第三章 结果与分析
        1 突变体stl-2和stl-3的等位性分析
        2 突变体stl-2和stl-3的表型特征
        3 野生型和突变体的农艺性状和光合作用分析
        4 野生型和突变体中光合色素的含量分析
        5 透射电子显微镜观察
        6 stl-2和stl-3的基因定位
        7 蛋白结构预测和同源进化分析
        8 叶绿素生物合成途径相关基因的表达分析
        9 影响叶绿素发育的其他相关基因的表达分析
        10 温控实验中叶绿体发育相关基因的表达分析
    第四章 讨论
        1 叶色突变体的温敏特性
        2 叶色突变体叶绿体发育特征
        3 核糖核苷酸还原酶大小亚基调控
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录



本文编号：3767184