MiR-202在C57BL/6小鼠和BALB/c小鼠皮肤中的差异表达及其靶基因的预测与鉴定

发布时间：2023-05-06 01:18

　　miRNAs是一类内源性非编码转录后调控的小RNA,通过作用于靶基因m RNA的非编码区抑制靶基因翻译或引起其降解,从而参与基因表达调控;在机体的发育、增殖、分化、凋亡等生物学过程中起重要作用。目前研究人员已经鉴定了多个物种中存在大量miRNAs,且已有研究表明miRNAs的种子序列与其靶基因3’UTR上的靶标位点特异性识别,进而调控黑色素细胞的生成来影响动物毛色的发生。课题组在前期研究基础上发现,miR-202在浅毛色动物皮肤中的表达量显著高于深毛色动物。靶基因预测发现一些靶基因为显性白毛调控基因;其中,kit基因是控制白毛色的主要候选基因,但miR-202是如何调控这些靶基因从而调控动物毛色形成的?其是否影响黑色素细胞的生成?目前未见相关报道。因此,本研究以不同毛色小鼠皮肤组织为研究对象,利用生物信息学软件预测miR-202与毛色相关的靶基因。同时通过q PCR和Western blot等方法从m RNA水平、蛋白水平进一步明确miR-202及其靶基因在不同毛色小鼠皮肤中相对表达量的关系;再通过构建双荧光素酶报告基因载体与miR-202模拟物共转染到HEK293T细胞中,鉴定miR...

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略词表
引言
第一部分 文献综述
    第一章 MiRNAs研究进展
        1. miRNAs发现
        2. miRNAs生物学功能
        3. miRNAs调节靶基因的机制
    第二章 毛色遗传研究进展
        1. 毛囊的研究进展
        2. 毛囊的发育与调控
        3. 动物毛色形成的关键因素
    第三章 MiRNAs与毛色遗传
        1. miRNAs与毛色遗传的关系
        2. miR-202 及其生物学功能
第二部分 研究内容
    第一章 MiR-202 在不同毛色小鼠皮肤中的表达
        1. 实验材料
        2. 实验方法
        3. 实验结果
        4. 讨论
        5. 小结
    第二章 MiR-202 靶基因的预测和筛选
        1. 相关软件及链接
        2. 靶基因预测及筛选
        3. 实验结果
        4. 讨论
        5. 小结
    第三章 靶基因蛋白在不同毛色小鼠皮肤中的表达
        1. 实验材料
        2. 实验方法
        3. 实验结果
        4. 讨论
        5. 小结
    第四章 靶基因的体内水平鉴定
        1. 实验材料
        2. 靶基因mRNA水平的鉴定
        3. 靶基因蛋白水平的鉴定
        4. 实验结果
        5. 讨论
        6. 小结
    第五章 载体构建
        1. 实验材料
        2. 实验方法
        3. 实验结果
        4. 讨论
        5. 小结
    第六章 MiR-202 及其靶基因体外水平的鉴定
        1. 实验材料
        2. 实验方法
        3. 实验结果
        4. 讨论
        5. 小结
结论
参考文献
作者简介
导师简介
致谢



本文编号：3808736