新型多糖结合疫苗的脂化修饰及外分泌研究

发布时间：2023-05-08 05:04

　　志贺氏菌(Shigella castellani)是一类短小的杆菌,属于革兰氏阴性菌。它是人类和灵长类动物的肠道致病菌,是最常见的病原体之一,可以导致细菌性痢疾。人类容易感染志贺氏菌,只需较少的菌量就可以使人类患病,主要在发展中国家流行,在我国的发病率仅次于肺炎和结核,同时对全球医疗卫生系统构成重大威胁。目前,研究者已经针对预防志贺氏菌研发出一种新型多糖结合疫苗,这种疫苗虽然具有预防作用,但是往往还存在着免疫原性较差、免疫过程中需要佐剂的添加才能有效发挥效用等缺点,并且制备过程也较繁琐,存在许多弊端。因此,对新型多糖结合疫苗的进一步改造优化工作已成为急需研究的热点。通过对新型多糖结合疫苗的改造,以期达到使其成为更加经济、高效的疫苗的目的,使其具有更广阔的应用前景。本研究从两方面对新型多糖结合疫苗进行了改造优化,主要研究结果如下:1.为提高其免疫原性,减少佐剂的添加,将在免疫反应过程中具有重要作用的细菌脂蛋白添加到多糖结合疫苗中。脂蛋白在免疫系统中既可以触发宿主的先天性免疫系统,又可以引起适应性免疫应答反应,可以作为疫苗的有效成分之一。将脂化区域导入已经构建好的多糖结合疫苗载体,转入志贺...

【文章页数】：37 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 细菌脂蛋白
        1.1.1 细菌脂蛋白生物合成途径
        1.1.2 细菌脂蛋白的功能研究
        1.1.3细菌脂蛋白激活TLR2
    1.2 细菌蛋白胞外分泌表达载体蛋白YebF
        1.2.1 YebF蛋白结构
        1.2.2 YebF胞外分泌机制
    1.3 志贺氏菌研究现状
        1.3.1 志贺氏菌
        1.3.2 志贺氏菌致病机理
    1.4 本文研究目的及意义
        1.4.1 研究内容
        1.4.2 技术路线
第二章 志贺氏菌多糖结合疫苗的脂化构建及糖蛋白脂化检测
    2.1 材料和仪器
    2.2 方法
    2.3 结果与分析
        2.3.1 志贺氏菌301DWP菌落PCR鉴定
        2.3.2 脂化志贺氏菌301DWP/Lipo-CTB蛋白诱导表达
        2.3.3 脂化志贺氏菌301DWP/Lipo-CTB电镜检测
        2.3.4 脂化志贺氏菌301DWP/Lipo-CTB与 TLR2 结合效果检测
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 志贺氏菌脂蛋白的纯化及动物免疫
    3.1 材料和仪器
    3.2 方法
    3.3 结果与分析
        3.3.1 志贺氏菌301DWP脂蛋白的纯化
        3.3.2 志贺氏菌301DWP脂蛋白的糖定量
        3.3.3 志贺氏菌301DWP脂蛋白的蛋白定量
        3.3.4 ELISA法检测小鼠血清效价
        3.3.5 体外杀菌实验
        3.3.6 免疫后攻毒实验
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 志贺氏菌多糖结合疫苗外分泌系统的构建及蛋白外分泌检测
    4.1 材料和仪器
    4.2 方法
    4.3 结果与分析
        4.3.1 可溶性内源蛋白YebF片段的获取
        4.3.2 载体同源臂的获取
        4.3.3 志贺氏菌301DWP/YebF-CTB外分泌系统的构建
        4.3.4 志贺氏菌蛋白外分泌系统的蛋白诱导表达
    4.4 讨论
    4.5 小结
第五章 总结与展望
参考文献
致谢
个人简介



本文编号：3812044