富硒植物乳杆菌BC-25胞外多糖的研究

发布时间：2017-06-14 01:13

  本文关键词：富硒植物乳杆菌BC-25胞外多糖的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：通过生物转化得到不同形态的有机硒是提高硒利用率的很好途径,但寻找安全的富硒载体和有机硒生物大分子的深入研究还需要投入更多努力。本文以15株疑似乳酸菌为材料,MRS培养基为基础培养基,筛选鉴定出了富硒能力最强的乳酸菌,并对比分析了富硒(试验组)与未富硒(对照组)乳酸菌EPS的产量、理化性质、单糖组成和结构,初步研究了富硒对乳酸菌EPS生成的影响。① 对乳酸菌生长曲线进行了测定,筛选并鉴定出了富硒优势乳酸菌。结果表明,适宜的加硒时间为培养后的第6 h,培养时间为24 h。通过对9株菌株比较,确定了较适宜的亚硒酸钠添加浓度为6μg/mL,BC-25为富硒优势菌株,富硒量425.79 μg/g,硒转化率达27.00%,经16SrDNA分析鉴定其为植物乳杆菌(Lactobacillus plantaru)。② 对植物乳杆菌BC-25进行富硒与未富硒培养来制备EPS,经过提取、分离纯化和纯度鉴定。结果显示,试验组和对照组EPS都只在经0.2 mol/LNaCl分离后有主要吸收峰,Sepharose CL-6B分离后呈现单一对称峰：紫外光谱扫描后在260 nm和280 nm处无吸收峰,表明纯化后的EPS不含核酸和蛋白质；琼脂糖凝胶电泳图上出现单一色斑,说明EPS成分均匀,证明得到的是纯EPS。③ 通过试验组和对照组EPS的产量、溶解性、热稳定性、单糖组分、结构的对比分析。结果表明,试验组和对照组EPS均易溶于水,不溶于乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、甲醇；产量比较,试验组相对于对照组EPS产量提高了6.56%；示差扫描和热重分析表明,试验组的EPS热稳定降低；单糖组分分析表明,试验组和对照组单糖组成都为D-甘露糖、D-半乳糖、D-葡萄糖,组成比例表明甘露糖都为主要单糖组成,试验组EPS中D-甘露糖的比例增加,D-半乳糖和D-葡萄糖的比例降低,但这种变化并不明显；1HNMR、13CNMR、红外光谱、质谱分析,试验组和对照组EPS结构基本相似,单糖连接方式一致,都是有较长碳链的吡喃多糖；1HNMR和13C NMR综合分析,Se可能取代了-OCH3上的CH3,形成了Se=O和C-Se-C,使多糖中引入硒。
【关键词】：植物乳杆菌 富硒 胞外多糖 结构
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：TS201.3
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 缩略词表7-10
• 1 前言10-20
• 1.1 立题背景10
• 1.2 文献综述10-18
• 1.2.1 乳酸菌胞外多糖简介10-16
• 1.2.2 硒多糖研究进展16-18
• 1.3 研究目标18
• 1.4 研究内容18-20
• 2 材料与方法20-27
• 2.1 材料20-21
• 2.1.1 菌种20
• 2.1.2 培养基20
• 2.1.3 试剂20
• 2.1.4 仪器设备20-21
• 2.2 方法21-27
• 2.2.1 富硒乳酸菌的筛选与鉴定21-24
• 2.2.2 富硒乳酸菌胞外多糖的提取、纯化24-25
• 2.2.3 富硒与未富硒乳酸菌胞外多糖比较分析25-27
• 3 结果与分析27-56
• 3.1 富硒乳酸菌的筛选与鉴定结果27-33
• 3.1.1 生化鉴定结果28
• 3.1.2 加硒时间和培养时间的确定28-29
• 3.1.3 适宜硒浓度的确定29
• 3.1.4 耐硒筛选结果29-30
• 3.1.5 富硒能力测定结果30-31
• 3.1.6 BC-25的16SrDNA分析结果31-33
• 3.2 多糖纯化结果分析33-37
• 3.2.1 纯化、洗脱结果33-35
• 3.2.2 纯度检验分析35-37
• 3.3 富硒与未富硒乳酸菌胞外多糖比较分析37-56
• 3.3.1 多糖产量比较37
• 3.3.2 理化性质比较37-40
• 3.3.3 多糖组成结构比较40-56
• 3.3.4 一级结构推测56
• 4 结论与展望56-58
• 4.1 结论56-57
• 4.2 展望57-58
• 参考文献58-64
• 致谢64-65
• 攻读学位期间发表的文章目录65

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