金丝桃苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其BK通道机制

发布时间：2017-12-13 09:26

  本文关键词：金丝桃苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其BK通道机制

  更多相关文章： 金丝桃苷 大电导钙激活钾通道 局灶性脑缺血再灌注损伤 脑血流量 脑梗死体积 神经元 血管平滑肌

【摘要】：目的:探讨线栓法制备小鼠局灶性脑缺血再灌注模型成功的两种评价方法间的相关性,为评价该模型提供一种新的方法和标准。观察金丝桃苷(Hyp)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用,以及BK通道在Hyp抗脑缺血再灌注损伤中的作用,探讨Hyp抗缺血性脑损伤作用的机制。方法:1.20只雄性KM小鼠,随即分为模型组(n=10)、假手术组(n=10),采用线栓法阻塞大脑中动脉建立局灶性脑缺血再灌注模型,分别于术前、缺血即刻、缺血2 h、再灌注即刻、再灌注24 h利用激光散斑成像技术监测各组小鼠脑血流量变化,再灌注24 h后进行神经功能评分,并行TTC染色法检测脑梗死体积百分比,相关性分析判断脑血流量变化与梗死体积百分比之间的相关性。2.使用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉阻塞致局灶性脑缺血再灌注模型。雄性SD大鼠随机分为:假手术组组、模型组、Hyp(12.5,25,50mg/Kg)组和阳性药银杏叶提取物组。术前灌胃给药3天。激光散斑成像技术分别于术前、术后即刻、缺血2h、再灌注即刻、再灌注24h监测脑血流变化;缺血2h再灌注24h后,观察神经功能损伤,TTC染色法检测脑梗死体积;3.检测血清中SOD、MDA含量;4.RT-PCR检测神经元中BK-α、BK-β4、PKC-α mRNA表达水平;5.Western blot检测神经元中BK-α、BK-β4、PKC-α和脑血管平滑肌中BK-b1亚基蛋白表达情况;结果:1.与假手术组相比,模型组小鼠出现明显的神经功能异常,TTC染色显示出明显的脑梗死,梗死侧脑血流量明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。缺血即刻、缺血2 h小鼠脑血流量变化与再灌注24 h脑梗死体积的相关系数R2值分别为0.55、0.28(P0.05)。2.与假手术组相比,模型组大鼠神经功能评分值明显升高(P0.01);与模型组相比,Hyp低、中、高剂量组、GBE组均可降低其神经功能评分(P0.05,P0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠局部脑血流显著下降,有统计学意义(P0.05),再灌注即刻、再灌注24h,Hyp各剂量组大鼠局部脑血流均有不同程度升高,其中,再灌注24h,Hyp中、高剂量组血流值恢复最高(P0.05,P0.01)。与假手术组相比,模型组大鼠可见明显的梗死(P0.01);与模型组相比,金丝桃苷低、中、高剂量组、GBE组均可降低脑梗死体积(P0.05,P0.01)。3.与假手术组相比,模型组大鼠血清MDA值明显升高、SOD值明显降低(P0.05,P0.01)。金丝桃苷低、中、高剂量组及GBE组均显著降低血清中MDA含量,升高SOD含量,与模型组相比,差异有显著性(P0.05,P0.01)。4.RT-PCR结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中神经元BK-α、PKC-α基因表达显著下降(P0.05),BK-β4基因表达显著升高(P0.01)。与模型组相比,Hyp低、中、高剂量组可显著增加BK-α表达(P0.01),Hyp低、中、高剂量组、GBE组可明显降低BK-β4基因表达(P0.01),Hyp低、中、高剂量组、GBE组可显著增加PKC-α基因表达(P0.01)。5.Western blot结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠神经元中BK-α、PKC-α表达显著下降(P0.05),BK-β4表达显著升高(P0.01)。与模型组相比,Hyp中、高剂量组可显著增加BK-α表达(P0.01),Hyp低、中、高剂量组、GBE组可明显降低BK-β4表达(P0.01),显著增加PKC-α蛋白表达(P0.01)。与假手术组相比,模型组大鼠脑血管平滑肌中BK-β1表达显著下降(P0.01)。与模型组相比,Hyp中、高剂量组可显著增加BK-β1蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:1.缺血即刻的皮层血流变化与梗死体积具有较好的线性相关。小鼠脑血流量变化是除神经功能评分和脑梗死体积以外另一种可判断小鼠局灶性脑缺血模型制作成功的可靠且实用的方法。2.金丝桃苷可显著降低脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能评分和脑梗死体积,增加脑缺血区局部血流量。其机制可能与神经元和脑血管平滑肌细胞中BK通道激活相关。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 丁兰;陈志武;郭岩;;金丝桃苷对大鼠脑基底动脉的舒张作用及其作用机制[J];安徽医科大学学报;2016年11期

2 Yong Wang;Yan Shen;Hai-ping Lin;Zhuo Li;Ying-ying Chen;Shu Wang;;Large-conductance Ca~(2+)-activated K~+ channel involvement in suppression of cerebral ischemia/reperfusion injury after electroacupuncture at Shuigou(GV26) acupoint in rats[J];Neural Regeneration Research;2016年06期

3 崔煦然;刘钊;张志斌;钟菊迎;;大鼠局灶性脑缺血模型评价方法间关联性分析[J];中国实验动物学报;2015年05期

4 曹磊;兰新新;王林晓;丁建花;范益;胡刚;;银杏内酯注射液对大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的保护作用[J];中国临床药理学与治疗学;2015年07期

5 孔平;杨晖;郑刚;谢银月;林为民;;激光散斑血流成像技术研究新进展[J];光学技术;2014年01期

6 甄毅岚;王亚男;李晟;董金龙;盛汝祥;史开宇;董六一;;线栓法制备不同体重KM小鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的建立及评价[J];中国实验动物学报;2013年02期

7 唐颖馨;刘敏珍;丁凤菲;张强;潘邓记;王伟;;小鼠大脑中动脉栓塞模型的改良及评价[J];神经损伤与功能重建;2012年02期

8 陈志武,马传庚,赵维忠;金丝桃甙对脑缺血再灌损伤保护作用的实验研究[J];药学学报;1998年01期

9 陈志武，马传庚，方明，徐叔云;金丝桃甙对钙离子内流的影响[J];药学学报;1994年01期

，

本文编号：1284663