Nrf2-ARE通路激活在姜黄素拮抗甲基汞神经毒性中的作用研究

发布时间：2017-12-13 19:27

  本文关键词：Nrf2-ARE通路激活在姜黄素拮抗甲基汞神经毒性中的作用研究

  更多相关文章： 姜黄素 星形胶质细胞 甲基汞 Nrf2-ARE通路 蛋白激酶C

【摘要】：背景和目的:汞是一种全球性的污染物,而甲基汞在汞的各种存在形式中毒性最强。甲基汞对神经系统的损害尤为严重,但具体的神经毒性的机制尚不明确,并且目前无有效治疗甲基汞中毒的药物,寻求拮抗甲基汞毒性的药物显得尤为重要。姜黄素是从姜科植物中提取出的天然产物,大量研究发现,姜黄素对氧化应激、炎症、肿瘤、动脉粥样硬化的治疗有良好效果。研究表明姜黄素可与金属毒物形成毒性低的配合物,具有金属抑制作用。本文旨在探究姜黄素对甲基汞损伤星形胶质细胞的保护作用及其机制,为甲基汞中毒的治疗提供理论依据。方法:原代培养的大鼠新生胎鼠大脑皮层星形胶质细胞,传代生长14天后分组。分别为空白对照组、甲基汞(5μmol/L)染毒组、姜黄素预处理(2、5、10和20μmol/L)甲基汞染毒组。以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)为指标评价细胞毒性;检测谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)含量;免疫荧光法检测评价Nrf2核转位情况;蛋白印迹法测定核因子E2相关因子(Nrf2)及其下游醌氧化还原酶蛋白(NQO1)和抗氧化酶血红素加氧酶蛋白(HO-1)表达的变化;蛋白印迹法检测细胞浆、核分离后的Nrf2的表达变化情况;采用siRNA干扰Nrf2后,MTT法检测姜黄素细胞保护效应的变化;蛋白激酶C(PKC)广泛抑制剂Ro 31-8220和PKCδ抑制剂Rottlerin抑制PKC后,蛋白印迹法检测PKC和Nrf2蛋白表达变化,MTT法检测姜黄素保护效应的变化。结果:与空白对照组相比,甲基汞染毒组细胞活力显著降低、LDH释放量显著增加(P0.05),并呈现时间和剂量效应关系;与甲基汞染毒组相比较,姜黄素预处理组细胞活力显著提高、LDH释放量显著降低(P0.05),与姜黄素的处理呈剂量和时间效应依赖关系,5、10和20μmol/L的姜黄素预处理12 h可显著增加细胞活力;与甲基汞染毒组相比,姜黄素预处理组GSH水平显著升高、CAT水平明显升高(P0.05);与空白对照组及甲基汞染毒组相比,姜黄素预处理组促进Nrf2核转位,Nrf2总蛋白及核蛋白表达显著增加(P0.05),并激活下游NQO1、HO-1蛋白表达,使其表达显著升高(P0.05);siRNA干扰Nrf2后,姜黄素的保护作用明显下降(P0.05);PKC抑制剂作用后PKC及Nrf2表达下降,但是Nrf2蛋白表达下降有限,与siRNA干扰相比效果较弱,抑制剂作用后,甲基汞(7.5μmol/L)处理后姜黄素保护组与未加抑制剂组相比细胞活力显著下降(P0.05)。结论:姜黄素可通过激活Nrf2-ARE信号通路保护甲基汞所致大鼠星形胶质细胞损伤,姜黄素激活Nrf2的路径与PKC有关。
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R595.2

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 魏妍婷;马三梅;;姜黄素抗肿瘤的机制[J];生命的化学;2016年05期

2 王宁;马慧萍;漆欣筑;蒙萍;贾正平;;Nrf2-ARE信号通路在机体氧化应激损伤防护中的研究进展[J];解放军医药杂志;2015年12期

3 吴静;杨睿;刘树业;;蛋白激酶C抑制剂的研究新进展[J];天津医药;2016年01期

4 王奕智;张宁;;姜黄素抗肿瘤作用的研究进展[J];宝鸡文理学院学报(自然科学版);2015年01期

5 冯新斌;陈玖斌;付学吾;胡海燕;李平;仇广乐;闫海鱼;尹润生;张华;朱伟;;汞的环境地球化学研究进展[J];矿物岩石地球化学通报;2013年05期

6 王春战;景华;;姜黄素抗炎抗氧化作用的研究进展[J];医学研究生学报;2012年06期

7 ;Curcumin attenuates Nrf2 signaling defect, oxidative stress in muscle and glucose intolerance in high fat diet-fed mice[J];World Journal of Diabetes;2012年05期

8 石峰;崔平;;姜黄素抗肿瘤作用机制研究进展[J];肿瘤基础与临床;2011年06期

9 李薇;李海浪;;姜黄素对高氧致新生大鼠肺纤维化的保护作用及机制探讨[J];医学研究生学报;2009年06期

10 邵建林;周银燕;陈华梅;王雁;赵国良;吕强;衡新华;罗用宇;;七氟烷通过P~(70S6K)/Nrf2信号通路诱导神经元HO-1mRNA表达[J];中国药理学通报;2009年02期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 金赛;姜黄素对镉致心脏损伤的保护作用及机制研究[D];陕西科技大学;2015年

，

本文编号：1286320