四逆汤诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对MAPK信号通路影响研究

发布时间：2017-12-18 19:17

  本文关键词：四逆汤诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对MAPK信号通路影响研究

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【摘要】：目的:本课题通过观察四逆汤对人肺腺癌细胞株A549的生长抑制作用、凋亡情况及对MAPK信号通路影响,为完善温阳法抗癌理论提供进一步的实验依据,为进一步提高临床疗效提供科学理论依据。对施展中医药在肺癌治疗中的特色与优势具有积极的意义,指导温阳中药在临床防治肺癌中的合理应用,同时为进一步的新药研究提供新的方向,是中西医结合抗肺癌研究的一个新思路。方法:采用MTT法,观察四逆汤对人肺腺癌细胞A549作用24、48、72小时后的生长抑制情况,并用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,分析不同药物浓度的四逆汤对人肺腺癌细胞A549凋亡的影响。采用Western Blot检测ERK,JNK,P38,P-ERK,P-JNK,P-P38,进行四逆汤对MAPK信号通路影响的研究,检测Caspase3,8,9,Bax,Bcl-2活性,进行四逆汤诱导肺癌细胞A549凋亡机制的初步研究。结果:(1)四逆汤对人肺腺癌细胞A549的生长起抑制作用,在一定程度上与时间、剂量呈正相关,四逆汤作用时间24、48、72小时后抑制率也在增高,且四逆汤药物浓度越高,抑制率也越高。(2)四逆汤能诱导人肺腺癌细胞A549的凋亡,其凋亡率与药物浓度在一定程度上呈正相关,四逆汤药物浓度越高凋亡率也越高。(3)四逆汤能抑制Erk,能使MAPK通路异常激活被抑制,从而抑制肺腺癌A549细胞的增殖趋势;四逆汤能激活bax,抑制bcl-2,具有促进凋亡蛋白激酶激活的的效应,从而抑制肺腺癌A549细胞的增殖趋势。结论:四逆汤对人肺腺癌细胞A549的生长起抑制作用,在一定程度上呈时间、剂量的依赖性。在一定范围上,四逆汤药物浓度越高、作用时间越长,抑制率也越高。四逆汤能诱导人肺腺癌细胞A549的凋亡,其凋亡率与浓度在一定程度上呈剂量依赖性,在一定范围内四逆汤浓度越高人凋亡率也越高。四逆汤能抑制MAPK通路异常激活的效应,从而抑制肿瘤细胞的增殖趋势;四逆汤具有促进凋亡蛋白激酶激活的效应,从而抑制肿瘤细胞的增殖趋势。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R273

【参考文献】

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本文编号：1305322