太岁的抑菌作用及对小鼠免疫功能影响的研究
本文关键词:太岁的抑菌作用及对小鼠免疫功能影响的研究 出处:《西南交通大学》2017年硕士论文 论文类型:学位论文
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【摘要】:目的:对太岁进行菌种分离和分子鉴定,探索太岁的组成成分;观察太岁及其分离菌株发酵液的抑菌效果;探讨太岁对免疫低下小鼠的免疫功能,以及对体外培养的巨噬细胞RAW264.7的影响。方法:对太岁中的菌株进行分离纯化,提取所纯化的太岁分离菌株的基因组DNA,以之为模板,用16SrRNA、18SrRNA和TIS序列进行PCR扩增,通过序列对比对太岁菌种进行分子鉴定;观察太岁及其分离菌株发酵液的抑菌作用。用环磷酰胺制备免疫低下小鼠模型,太岁溶液灌胃后,通过体征观察,脏器指数测定;用ELISA检测血清IL-2;用CCK-8检测淋巴细胞增值;用SRBC溶血实验测定抗体形成细胞数量;用中性红检测巨噬细胞吞噬能力,观察太岁对免疫低下小鼠的免疫功能影响。用不同终浓度太岁处理静息和被LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7,CCK-8测定细胞的活性,用中性红测定细胞吞噬能力;用ELISA试剂盒测定细胞分泌的NO、IL-1、IL-12,观察太岁对巨噬细胞RAW264.7的影响。结果:从太岁中分离纯化出了三个菌株,通过鉴定,一种是真菌Pseudeurotium ovale(假散囊菌属),另外两个是细菌分别是BetaproteobacteriumMBIC3293(β变形菌属),bacterium YC-ZS S-LK J183(微小杆菌属)。太岁及这三个菌株的发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制作用不明显。在免疫低下小鼠实验中,模型组脾脏指数、T淋巴细胞增值、抗体形成细胞数量及巨噬细胞吞噬能力降低;与模型组比较,太岁组脾脏指数、T淋巴细胞增值、抗体形成细胞数量及巨噬细胞吞噬能力升高。用不同终浓度太岁作用于静息的巨噬细胞RAW264.7,能够促进其分泌NO、IL-1、IL-12,促进其吞噬能力;LPS诱导后,太岁能抑制细胞分泌NO、IL-1、IL-12,抑制其吞噬能力。结论:太岁是一种复杂的生命体,其中包含有真菌Pseudeurotiumovale(假散囊菌属)、细菌Beta proteobacterium MBIC3293(β 变形菌属)和 bacterium YC-ZS S-LK J183(微小杆菌属)。本研究是第一次从太岁中分得这三个菌株。太岁及以上三个菌株的发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌无明显抑制作用。太岁能够提高免疫低下小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能和非特异性免疫功能。太岁对巨噬细胞RAW264.7有明显的激活作用,同时能降低LPS对RAW264.7刺激作用。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:西南交通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R285.5
【参考文献】
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,本文编号:1352801
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