艾叶挥发油抗真菌活性成分和白僵蚕对大鼠紫癜性肾炎治疗作用的研究

发布时间：2018-01-07 03:32

本文关键词：艾叶挥发油抗真菌活性成分和白僵蚕对大鼠紫癜性肾炎治疗作用的研究　出处：《新疆医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:1)通过对艾叶提取的挥发油进行有效成分的分离鉴定,对艾叶挥发油、桉树脑和4-松油烯醇等的抗真菌作用进行初步探讨,为深度开发、储存和利用艾叶提供有效的基础资料。2)探索并建立HSPN大鼠模型,观察白僵蚕对HSPN大鼠蛋白尿及肾组织病理形态的影响,探讨白僵蚕对HSPN大鼠的治疗作用及其可能作用机制。方法:1)采用水蒸气蒸馏法从艾叶中提取挥发油并GC/MS分析,用薄层色谱法和硅胶柱层析法从艾叶挥发油中分离桉树脑和4-松油烯醇,通过TLC法和GC/MS法定性鉴别,用NMR对其分子结构进行确认;用菌丝生长速率法计算艾叶挥发油及其分离的单体对疫霉、黑曲霉、粉红聚端孢、青霉、链格孢的抑菌率,用二倍梯度稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC);ATD、SPME、超声提取和燃烧等方法收集艾叶挥发性成分,分析艾叶不同状态下有效成分含量变化。2)将70只SD大鼠(雄性)按随机数字表法分为空白组、模型组、阳性对照组、白僵蚕低中高剂量组,每组10只。除了空白组,其他组以BSA+LPS+CC14方法造就IgA肾病模型,同时用热性药物灌胃造就瘀热模型,复合成为HSPN动物模型。造模及治疗结束后检测24h尿液中的尿蛋白、尿胆素、肌酐量;光镜下观察肾小球系膜变化;采用间接免疫荧光法检测肾小球IgA沉积;免疫组化法检测肾脏组织中凋亡因子Fas、转化生长因子-β1(TGF-β1);TUNEL末端标记法检测细胞凋亡。结果:1)艾叶挥发油(得油率0.65%)GC/MS分析总检测出30种化合物,其中有效成分桉树脑和4-松油烯醇百分含量分别为22.71%和7.34%。分离提纯后,TLC法和GC/MS分析样品和对照品,Rf值和保留时间基本一致,NMR确定桉树脑和4-松油烯醇的分子结构;艾叶挥发油对5种真菌抑菌率范围15.2%~74.5%,桉树脑对5种真菌抑菌率范围25.6%~69.4%,4-松油烯醇对物种真菌抑菌率范围18.2%~72.9%,对疫霉和黑曲霉抑菌效果较好。艾叶挥发油对疫霉、黑曲霉、粉红聚端孢、青霉的MIC为50μl.ml-1,对链格孢MIC为100μl.ml-1。桉树脑对5种真菌的MIC均50μl.ml-1。4-松油烯醇对5种真菌的MIC均40μl.ml-1;ATD、SPME法收集艾叶不做处理的挥发性成分,均含有桉树脑和4-松油烯醇成分,艾叶超声波提取的挥发油、燃烧烟气,均含有桉树脑成分,却检测不到4-松油烯醇。2)模型组24h尿蛋白量均显著高于空白组,差异有统计学意义(P0.01),病理结果提示造模后肾组织肾小球系膜明显增生,肾小管肿胀,肾小球上有IgA沉积,说明造模有效;给药6周后,与模型组相比较,白僵蚕各剂量组大鼠24h尿蛋白,尿胆素,尿肌酐含量降低,均有显著性差异(P0.01);HE染色和PAS染色结果,白僵蚕中、高剂量组肾小球系膜细胞轻度增生,系膜区轻度增宽,管腔无挤压现象,较模型组明显改善;免疫组化检测在模型组大鼠肾组织中Fas和TGF-β1表达,前者表达减弱,后者表达增强;TUNEL末端标记法检测细胞凋亡,模型组抑制凋亡。结论:1)艾叶挥发油、桉树脑、4-松油烯醇对5种真菌均有抗菌活性,随浓度的增加抗菌活性增加。自然状态下、溶剂提取和燃烧时艾叶均含有桉树脑,艾叶加工成艾绒、艾枝其挥发性成分变化,这为艾叶储存及更广泛应用于实际提供理论依据。2)白僵蚕能改善HSPN模型大鼠肾脏的病理变化,减轻蛋白尿,尿肌酐,改善肾组织炎症反应症状,其作用机制可能与抑制肾脏组织中Fas及TGF-β1表达和细胞凋亡有关。
[Abstract]:Objective : To study the antifungal effect of volatile oil extracted from Folium Artemisiae Argyi by extracting volatile oil from Folium Artemisiae Argyi by means of TLC and GC / MS . The results showed that the MIC of 5 kinds of fungi was 50 渭l 路 ml ~ ( -1 ) . The MIC of 4 - terpineol on 5 kinds of fungi was significantly higher than that in blank group ( P0.01 ) . 4 - terpineol has antibacterial activity on 5 fungi , and the antibacterial activity increases with increasing concentration . Under the natural state , the leaves of Folium Eucalypti and Folium Artemisiae Argyi both contain eucalyptol and Folium Artemisiae Argyi are processed into moxa , and the volatile components thereof are changed .

【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284;R285.5

【参考文献】