鸡血藤野生资源调查及其品质与自然生态因子相关性研究

发布时间：2018-03-03 18:04

本文选题：鸡血藤　切入点：野生种质资源　出处：《广州中医药大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：鸡血藤是一味具有鲜明岭南特色的活血化瘀类常用药材,《中国药典》(2015年版一部)收载其为豆科(Legumiinosae)密花豆属植物密花豆(Spatholobus suberectus Dunn.)的干燥藤茎[1]。具有极高的药用价值,药用需求量大,为多种中成药原料药。本论文在对鸡血藤主产区(广东、广西等地)野生资源调查的基础上,开展不同居群种质资源的收集鉴定、药材品质分析与评价及其与自然生态因子的相关性研究,以摸清其野生资源状况及生境特征,了解其生长特性与生态习性,从而为鸡血藤野生转家种技术研究提供技术支撑和理论依据。本文主要研究内容如下:第1章文献综述在查阅了大量有关鸡血藤野生资源分布及与本研究相关的文献资料的基础上,对鸡血藤野生资源分布、化学成分、药材质量分析、药理作用、自然生态因子对药材品质影响等方面的研究进展进行了归纳、整理与总结。第2章鸡血藤野生资源实地考察通过实地调查以及走访等方法,开展完成了广东广州、深圳、梅州、惠州、韶关、清远及广西贺州等地20余个鸡血藤野生居群生态环境及种质资源的调查,观察记录了每个野生居群的地理位置(经纬度、海拔)、种群的数量特征、伴生物种及所处群落的光照强度、坡度和坡向;采集了土壤样品及药材样品;此外还收集了广西百色、云南西双版纳州等地野生鸡血藤药材。通过实地调查,初步摸索清了广东、广西两省鸡血藤的野生资源及栽培基地的状况,了解了鸡血藤野生生境地的特征[2]。目前广东、广西两省的野生种群破坏较为严重,种群更新较慢。第3章鸡血藤药材质量分析与评价1、不同居群鸡血藤药材质量分析比较按照《中国药典》(2015年版一部)附录XA法及紫外-可见分光光度法测定了鸡血藤药材醇溶性浸出物及总黄酮含量,并采用HPLC法分别测定了不同居群鸡血藤药材指标性成分原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素和染料木素的含量。对不同居群(藤茎粗度约为5-8cm)鸡血藤药材进行质量分析,结果发现广东、广西及云南产区不同野生居群样品中此五种指标性成分的含量差异明显,不同居群药材质量差异较大;对不同居群相同环纹数(3环)鸡血藤药材的总黄酮及五种指标性成分含量进行主成份分析并计算综合得分发现梅州梅县鸡血藤药材质量最优,惠州、韶关、广西产地鸡血藤质量次之,广州、深圳两地鸡血藤质量排名最后;对栽培品4、7、9、10年生鸡血藤药材进行质量分析,结果发现并非生长年限越长各化学成分含量便越高,总黄酮、表儿茶素、儿茶素含量变化幅度较大,芒柄花素、染料木素含量变化较小。采用HPLC法测定了不同居群相同环纹数(3环)鸡血藤药材指纹图谱,用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件》(2010版)计算相似度,结果显示,广东省内清远、韶关、梅州及惠州等地各居群样品的相似度较高(均在0.85以上),广西与广东惠州地区的相似度亦较高;广州、深圳等地不同居群鸡血藤及云南西双版纳州与两广地区的鸡血藤的相似度都很低。2、同一植株不同树脂环纹数血藤质量分析研究分别按照《中国药典》(2015年版一部)附录XA法及紫外-可见分光光度法测定了鸡血藤药材醇溶性浸出物及总黄酮含量,并采用HPLC法分别测定了指标性成分原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素、染料木素的含量。对同一植株不同环纹数鸡血藤药材进行质量分析,结果发现:同一植株不同部位藤茎(具有不同的树脂环纹数)中儿茶素与表儿茶素的含量变化较为明显,但变化趋势基本一致。二者的含量在不同居群来源样品中的变化趋势则不相同。同一植株不同部位藤茎中芒柄花素与染料木素的含量变化差异较小,且具有较为一致的变化趋势。二者的含量在不同居群来源样品中的变化趋势亦较为相同。原儿茶酸含量在同一植株的不同部位中及不同居群中的含量均具有较为明显的变化趋势。同一植株不同部位藤茎中总黄酮含量随着树脂环纹数的增加呈较为平缓的上升趋势,而在6环以上的药材中则略微有所下降;三个不同居群的醇溶性浸出物测定结果显示,醇溶性浸出物的含量随着环纹数的增加先升高,在3环时含量相对较高,后有的呈下降趋势,有的先降后升,也有的变化较为平缓。3、鸡血藤药材不同环纹部位质量分析探讨分别照《中国药典》(2015年版一部)附录XA法及紫外-可见分光光度法测定了鸡血藤不同环纹环纹部位样品中醇溶性浸出物及总黄酮含量,并采用HPLC法分别测定了指标性成分原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的含量。结果发现醇溶性浸出物、总黄酮、儿茶素及表儿茶素在不同环纹部位中的含量,由内而外(最外一轮除外)基本上呈先上升后下降的趋势,其中浸出物与表儿茶素的含量在中间部位的样品中升降波动幅度稍大,而总黄酮与儿茶素含量波动幅动较为平缓。大部位样品在3-5轮时的含量基本上达最高,后则逐渐下降,而最内一轮的含量均较低。4、鸡血藤地上与地下部分药材质量分析探讨采用紫外-可见分光光度法测定了鸡血藤不同环纹环纹部位样品中测定了鸡血藤不同部位(根与茎,地上与地下)药材总黄酮含量,并采用HPLC法分别测定了指标性成分原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素、染料木素的含量。结果发现各化学组分含量在不同部位间有一定的差异,总黄酮含量地上部分比地下部分少,根含量少于茎含量;儿茶素、表儿茶素、芒柄花素、染料木素含量均是地下部分大于或等于地上部分,原儿茶酸在不同居群中地上、地下部分含量有一定的差异性。第4章鸡血藤质量与自然生态因子的相关性分析研究1、土壤养分与鸡血藤质量相关性分析研究测定土壤pH以及有机质、全氮、全磷、全钾、水解氮、有效磷、速效钾、有效硼、有效钼、有效铜、有效锌、有效铁、有效锰、有效钙、有效镁含量,用spss17.0软件对各土壤养分含量与不同居群鸡血藤相同环纹数各化学组分(总黄酮、原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素、染料木素)含量进行主成份分析法与多变量逐步回归分析。分析结果显示:全钾对总黄酮的含量几乎没有影响;全磷、有效钼、水解氮、有效铁对总黄酮含量的影响很小;有效镁、土壤pH对总黄酮含量有很大的促进作用;速效磷、有效铜、有效锌对总黄酮含量有很大的抑制作用。全磷、全氮、有机质、全钾、有效钼、有效锌、有效锰、有效铁对儿茶素含量影响很小;有效镁、土壤pH、有效钙对儿茶素含量有很大的促进作用;速效磷、有效硼、水解氮、有效铜对儿茶素有一定的抑制作用。有效铁对表儿茶素含量几乎没有影响;有机质、全磷、全钾、水解氮、有效硼、有效钼、有效锌、有效锰对表儿茶素含量的影响很小;有效镁、土壤pH、有效钙对表儿茶素含量有很大的促进作用;速效磷、有效铜对表儿茶素有一定的抑制作用。有机质、全氮、全钾对芒柄花素含量影响很小;全磷、有效钼对芒柄花素含量有很大的促进作用,有效铜、有效钙次之;有效锌对芒柄花素含量有明显的抑制作用,有效锰次之。有效硼对染料木素含量几乎没有影响;土壤pH、有机质、全氮、水解氮、速效钾、有效锰对染料木素含量影响很小;有效钼对染料木素有明显的促进作用,有效铜、全钾次之;有效锌、有效钙对染料木素有明显的抑制作用,有效镁、速效磷次之。2、气候生态因子与鸡血藤质量相关性分析研究以市为单位收集各产地主要气候资料,用spss17.0软件对气候因子与相同环纹数鸡血藤各化学组分含量进行偏相关分析。结果表明:总黄酮含量与平均日照时数呈显著性正相关,与极端最低温度、年平均降雨量呈显著性负相关;儿茶素含量与各气候因子的相关性不大,只与平均日照时数呈一定的正相关,其余均是负相关;平均日照时数与表儿茶素含量呈正相关,极端最高温度与年平均降雨量与表儿茶素含量呈显著性负相关。第5章结语1、广东省内鸡血藤野生种群主要分布在粤北、粤东北、粤中及粤西部分地区的山区县。广西主要分布于其南部地区的山地林中。云南主要分布于云南南部地区。鸡血藤主要分布于亚热带常绿阔叶林或次生毛竹林的中下层,一般沿着水源丰富的山沟两侧山坡地生长,野生居群内少见实生幼苗群,伴生物种较为丰富。不同野生居群的药材性状特征具有一定的差异性。鸡血藤栽培产区主要分布于广东梅州及广西贺州等地,栽培模式有单品种种植和仿野生栽培两种。2、以醇溶性浸出物、总黄酮及指标性成分原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素和染料木素等为作含量测定指标,并研究分析相应样品的HPLC指纹图谱,系统开展了不同居群、不同树脂环纹数及不同环纹部位等药材品质的综合分析与评价工作。不同居群鸡血藤中上述各指标的含量测定结果表明,不同居群鸡血藤药材的质量差异较大,醇溶性浸出物含量均达到了现行版《中国药典》入药要求;五个指标性成分中以表儿茶素和儿茶素的含量相对较高,建议将表儿茶素和儿茶素的含量测定纳入鸡血藤质量控制体系(表儿茶素含量≥1.5mg/g,儿茶素含量≥0.9mg/g);原儿茶酸、芒柄花素及染料木素可作为鸡血藤药材质量控制与评价的参考指标。不同居群具有相同树脂环纹数的鸡血藤药材主成份分析结果显示梅县雁洋镇及惠州地区各居群的鸡血藤质量较优,而广州从化、深圳、韶关及贺州的质量相对较差。结合各居群资源调查结果,综合分析来看,群落生态环境未受破坏及种群保存完好的的鸡血藤样品质量较优,而遭受砍伐与破坏后恢复的野生种群的质量相对较差。HPLC指纹图谱研究结果显示地理位置的远近对鸡血藤次生代谢产物的种类组成有一定的影响。3、具有不同偏心性树脂环纹数的鸡血藤中醇溶性浸出物、总黄酮、儿茶素及表儿茶素的含量差异较大,且与树脂环纹数间没有一定变化规律;染料木素与芒柄花素含量在不同环纹数鸡血藤中的差异较小。鸡血藤断面树脂环纹数的多少不能用于评价鸡血藤药材品质好坏的依据。4、鸡血藤皮部、髓部及木质部中化学组分含量相对较低,次生代谢物质主要集中于树脂环纹部位。5、土壤养分中的有效钙、有效镁、土壤pH对总黄酮、儿茶素、表儿茶素含量影响有着明显的促进作用,有效钼、有效铜对芒柄花素、染料木素含量有着明显促进作用;速效磷、有效铜对总黄酮、儿茶素、表儿茶素含量影响有着明显的抑制作用,有效锌对芒柄花素、染料木素含量有着明显抑制作用;全钾、有效铁、全磷对总黄酮、儿茶素、表儿茶素含量影响很小,有机质、全氮对芒柄花素、染料木素含量影响很小。总黄酮含量与平均日照时数呈显著性正相关,与极端最低温度、年平均降雨量呈显著性负相关;儿茶素含量与各气候因子的相关性不大,只与平均日照时数呈一定的正相关,其余均是负相关;平均日照时数与表儿茶素含量呈正相关,极端最高温度与年平均降雨量与表儿茶素含量呈显著性负相关。
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【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R281.4

【参考文献】