金福安汤通过调控P120ctn及其转录因子Kaiso干预肺癌转移机制的研究
本文选题：肺癌 + 连环蛋白p120ctn ； 参考：《广州中医药大学》2017年硕士论文
【摘要】：目的:课题组前期的实验研究发现,金福安汤不仅下调Lewis小鼠肺癌组织p120ctn的异位表达,还降低A549细胞p120ctn磷酸化程度,而p120ctn又是Kaiso重要的和肺癌转移密切相关的结合蛋白,推测金福安汤可能是通过调控p120ctn及其转录因子Kaiso的表达而干预肺癌转移的。本研究拟通过体外实验观察金福安汤对肺癌各种细胞系的增殖、迁移和侵袭能力的影响,探究p120ctn各亚型、其相关转录因子Kaiso和p120ctn丝氨酸288位点的磷酸化的表达,以探究金福安汤是通过连环蛋白p120ctn的哪些亚型发挥作用,和其如何调控转录因子Kaiso发挥抗肿瘤转移的作用,以及其如何通过影响p120ctn丝氨酸288位点的磷酸化状态来干预肺癌转移的机制,为揭示中药复方干预肺癌转移机制的研究提供了理论支持和实验依据。方法:将人肺腺癌细胞株H1299、H1650和A549细胞以及人肺鳞癌细胞株H520进行细胞培养传代。运用CCK8法观察金福安汤对不同类型肺癌细胞增殖能力的抑制作用。通过体外基质胶迁移和侵袭实验(transwell)检测金福安汤对各种类型肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。运用免疫荧光、Western-Blot方法探讨金福安汤对不同肺癌细胞中 p120ctn、p120ctn 亚型 1A(p120ctn1A)、p120ctn 亚型 3A(p120ctn3A)和相关转录因子Kaiso的表达以及p120ctn丝氨酸288位点的磷酸化的影响。结果:1.金福安汤对人肺腺癌细胞株H1299、H1650和A549细胞以及人肺鳞癌细胞株H520有增殖抑制作用,且不仅具有一定的时间依赖性还具有一定的浓度依赖性(p0.05),顺铂组也能显著抑制各肺癌细胞的增殖能力,其和空白对照组相比均具有显著的统计学差异(p0.05)。2.体外基质胶迁移和侵袭实验中,中药金福安汤低、中、高剂量组可发现不同类型肺癌细胞株中迁移和穿透小室底部的细胞数目均在下降,且迁移和侵袭能力的抑制作用随着浓度的增加逐渐增强(p0.05),顺铂也可抑制肺癌细胞迁移和侵袭,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(p0.05)。3.免疫荧光结果发现,空白对照组中的人肺鳞癌细胞H520和人肺腺癌细胞H1650中的连环蛋白p120ctn在细胞浆和细胞膜上均呈现明亮的绿色荧光,呈现强表达,而在细胞核的绿色荧光较弱,而肺腺癌H1299细胞中空白对照组中的p120ctn蛋白表达主要定位于胞浆和胞核,细胞膜几乎不表达,并且胞浆和胞核的荧光强度较弱。我们还观察到在空白对照组中肺腺癌H1299、H650细胞及鳞癌细胞H520中Kaiso的表达,发现H1299中Kaiso主要表达于细胞核内,弱表达于细胞质,却还发现Kaiso在H520和H1650中的表达很弱,而且主要表达于细胞质。但中药组处理后的肺癌不同类型细胞系H1299和H520中连环蛋白p120ctn和Kaiso的表达较空白对照组明减少,且差异具有统计学意义(p0.05),而在H1650中连环蛋白p120ctn的表达下调,但Kaiso的表达水平是增加的。4.Western-Blot结果发现金福安汤可下调肺癌细胞系H1299、A549、H1650和H520中的连环蛋白p120ctn和其p120ctn亚型1A(p120ctn1A)的表达,减弱其相关转录因子Kaiso的表达,而处理后的H1650细胞中Kaiso的表达水平却增高。同时还发现金福安汤可减弱连环蛋白p120ctn丝氨酸288位点的磷酸化的程度。结论:1.在体外实验研究中,我们发现金福安汤可显著抑制人肺腺癌细胞株H1299、H1650和A549细胞以及人肺鳞癌细胞株H520的生长和增殖能力,具有一定的时间依赖性和浓度依赖性,还发现金福安汤可显著抑制肺癌细胞迁移和侵袭能力。2.金福安汤可能通过介导与肺癌侵袭和转移密切相关的连环蛋白p120ctn及p120ctn1A的表达来调控其相关转录因子Kaiso的表达水平来降低肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力从而干预肺癌的转移。3.我们还发现金福安汤也可能通过减弱连环蛋白p120ctn丝氨酸288位点的磷酸化的程度从而抑制肺癌的侵袭转移能力。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of Jin Fu ' an Decoction on the proliferation , migration and invasion of lung cancer cell line H520 by regulating the expression of p120ctn , p120ctn subtype 1A ( p120ctn1A ) , p120ctn subtype 3A ( p120ctn3A ) and human lung squamous cell carcinoma cell line H520 . The expression level of p120ctn , p120ctn and p120ctn1A of human lung cancer cell line H520 was regulated by Western - Blot .
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R734.2
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 陈钟;潘夏薇;郑晓丹;;P120~(ctn)/E-cad在口腔鳞癌细胞迁移和侵袭中的功能[J];临床口腔医学杂志;2016年11期
2 孙哲;曹洋;;p120ctn与肺癌浸润、转移的相关性研究进展[J];诊断病理学杂志;2016年09期
3 刘洋;苗原;韩强;王恩华;;p120-catenin通过Kaiso在转录水平上调控肺癌细胞系LTEP-a-2中β-catenin的表达[J];现代肿瘤医学;2016年12期
4 田玲;毛熙光;;P120ctn及Rho GTP酶在肿瘤侵袭转移中的研究进展[J];中国医药指南;2015年07期
5 魏敏;毛qU光;;P120-连环蛋白在肿瘤浸润和转移中的研究进展[J];海南医学;2015年03期
6 桂德春;李小冬;江平;胡f庠;;P120ctn/E-cadherin与肿瘤关系的研究[J];吉林医学;2014年30期
7 娜仁;饶翔;李乾;卢玉娟;;乳腺癌组织中P120ctn蛋白表达和基因扩增的研究[J];中国妇幼保健;2014年22期
8 梁凯;卢德祥;;膀胱移行细胞癌中Kaiso与p120ctn交互作用机制研究[J];黑龙江医学;2014年07期
9 李莉;谢成耀;王妍;王恩华;;p120ctn、Kaiso及MTA2基因在胸腺瘤中的表达及临床病理意义[J];诊断病理学杂志;2013年06期
10 于涓瀚;苗原;刘洋;张勇;徐洪涛;王恩华;;P120连环蛋白亚型1在非小细胞肺癌中的表达及与E-cadherin表达的关系[J];中华临床医师杂志(电子版);2013年03期
相关博士学位论文 前1条
1 戴顺东;p120ctn对Kaiso的调控及两者在肺癌中作用的研究[D];中国医科大学;2009年
相关硕士学位论文 前1条
1 张朋新;P120连环蛋白亚型三的磷酸化增强携带Kaiso出核促进肺癌细胞的侵袭[D];中国医科大学;2010年
，本文编号：2047316
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/2047316.html
