IL-33联合Dectin-1信号活化DCs强力促进Th9细胞介导的抗肿瘤免疫反应

发布时间：2018-07-06 08:05

  本文选题：Dectin-1-DC + IL-33　； 参考：《吉林大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:恶性肿瘤是威胁人类生命和健康的主要疾病之一,亟待开发有别于传统治疗的肿瘤治疗新策略。树突状细胞(Dendritic cells,DCs)疫苗免疫治疗是一种很有前景的肿瘤治疗方法。DCs是最有效的抗原提呈细胞(antigen-presenting cells,APCs),在诱导机体抗肿瘤免疫过程中起到重要作用。DCs通过体内诱导效应T细胞而发挥抗肿瘤效应。我们以及其他研究团队发现分泌IL-9的Th9细胞在小鼠体内具有很强的抗肿瘤活性,因而开发体内能够特异性诱导和扩增Th9细胞的DC疫苗必将强有力地增强DC疫苗的抗肿瘤效果。我们最近的研究结果显示Dectin-1信号活化的DCs(Dectin-1-DCs)体内体外能够强有力促进Th9细胞生成,其机制有待进一步阐明。我们发现Dectin-1-DCs表达大量的IL-33,然而我们对IL-33在Dectin-1-DCs诱导Th9和抗肿瘤免疫反应中的作用还不清楚。IL-33是一种多功能细胞因子。以往的研究证实,IL-33促进CD8+T、ILC2、Th2和Th1细胞反应等对于抗肿瘤免疫有利一面,IL-33也能促进Treg的产生等对于抗肿瘤免疫不利一面。因此,在本项研究中,我们将深入探讨IL-33在Dectin-1-DCs体内诱导Th9及抗肿瘤免疫中的作用及其内在机制。方法:首先,我们用基因表达谱(Gene expression profile,GEP)分析Dectin-1-DCs中上调的基因,找到上调幅度显著的IL-33。为了验证dectin-1信号促进DCs表达大量IL-33,我们用C57BL/6骨髓来源的DCs体外生成BMDCs及两种Dectin-1-DCs:CurDCs和SclDCs,通过QPCR、ELISA和FCM检测其表达的IL-33 mRNA和蛋白水平,并用同样的方法在dectin-1-/-小鼠骨髓来源的DCs中进行验证,检测敲除基因dectin-1后IL-33 mRNA和蛋白水平是否下降。其次,为研究Dectin-1-DCs体内诱导的主要抗肿瘤效应细胞是否为Th9细胞,我们以OT2小鼠为模型,对其进行DCs免疫,并通过FCM,ELISA及QPCR方法检测OT2小鼠脾脏中CD4+T细胞是否表达Th9、Th1和Th17细胞的相关细胞因子和转录因子。接下来,为研究Dectin-1-DCs如何诱导Th9细胞,我们分别以OT2小鼠和C57BL/6小鼠为模型,对其进行DCs免疫,FCM及QPCR方法检测Dectin-1-DCs体内诱导的CD4+T细胞表达IL-33受体ST2的情况。为进一步验证Dectin1-DCs通过ST2促进Th9细胞分化,加入ST2的封闭抗体,检测封闭ST2能否影响Dectin-1-DCs对Th9细胞生成的促进作用。由于Dectin-1-DCs分泌到胞外的IL-33浓度很低,为了研究IL-33对Dectin-1-DCs体内诱导Th9的促进作用,我们以OT2小鼠为模型,对其进行DCs免疫的同时加入外源IL-33,通过FCM,ELISA及QPCR方法检测ST2及Th细胞特征性细胞因子的mRNA和蛋白水平。然后,我们以OT-2小鼠B16-OVA黑色素瘤为模型,对其进行DCs疫苗免疫治疗,以研究IL-33是否对Dectin-1-DCs体内的抗肿瘤免疫起到促进作用。最后,作为对照我们也研究了IL-33联合BMDCs体内是否有助于诱导Th9及抗肿瘤免疫反应。结果:Dectin-1信号促进DCs表达IL-33。Dectin-1-DCs体内能够诱导大量的Th9细胞及一定量的Th1细胞,其中具有抗肿瘤效应的Th9细胞占主导地位。Dectin1-DCs体内促进CD4+T细胞产生ST2,封闭ST2显著抑制了Dectin1-DCs对Th9细胞的诱导。加入外源IL-33显著促进了Dectin-1-DCs体内诱导Th9的生成,而对BMDCs体内诱导Th9及其抗肿瘤效应没有作用。加入外源IL-33显著提高Dectin-1-DCs的抗肿瘤效应。但外源IL-33促进BMDCs体内诱导Treg细胞,抑制BMDCs诱导的CD4+T细胞表达T细胞生长因子IL-2,促进T细胞表达PD-1免疫抑制分子,从而抑制BMDCs的抗肿瘤效应。结论:IL-33促进Dectin-1-DCs在体内诱导Th9细胞并进一步增强Dectin-1-DCs在体内的抗肿瘤免疫效应。
[Abstract]:Objective : To study the effect of IL - 33 on anti - tumor immune responses induced by Dectin - 1 - DCs . The results showed that IL - 33 stimulated CD8 + T , ILC2 , Th2 and Th1 cell responses . We also studied whether IL - 33 could induce Th9 and anti - tumor immune responses in Dectin - 1 - DCs . Conclusion : IL - 33 promotes the expression of Th9 cells in the body of Dectin - 1 - DCs .
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R730.3

【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 Terence Moyana;Jicheng Yang;Jim Xiang;;Type 1 CD8~+ T Cells are Superior to Type 2 CD8~+ T Cells in Tumor Immunotherapy due to Their Efficient Cytotoxicity,Prolonged Survival and Type 1 Immune Modulation[J];Cellular & Molecular Immunology;2007年04期

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本文编号：2102094