银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞干预作用及机制研究

  本文关键词：银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞干预作用及机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

《山东中医药大学》 2015年

银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞干预作用及机制研究

陈润赓  

【摘要】：目的:目前肺间质纤维化是一种难治性呼吸系统疾病,尚无理想的治疗药物,临床上银杏叶提取物在治疗特发性肺间质纤维化方面有一定疗效。通过观察银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡,以及对细胞外基质、炎症因子的影响,探讨其作用机理。方法:实验以人胚肺成纤维细胞为研究对象,设空白对照组、模型组、银杏叶提取物低、中、高浓度组,对照组加入人胚肺成纤维细胞,模型组在培养人胚肺成纤维细胞时加入TGF-β1,实验组在模型组的基础上加入不同浓度的银杏叶提取物,其药物浓度分别为5ul/m L、10ul/m L、20ul/m L。各组细胞均置于恒温培养箱中培养。1.银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞的增殖和凋亡的影响,用于MTT实验的各组人胚肺成纤维细胞经相关处理后,在波长490 nm处测定吸光度(OD)值,用于流式检测细胞凋亡的细胞,在药物作用24h后,测量人胚肺成纤维细胞的凋亡率,以上数据进行分析,P0.05为差异有显著性。2.银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞外基质的影响,应用ELISA实验检测各组人胚肺成纤维细胞的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA的蛋白含量,应用RT-PCR技术检测各组人胚肺成纤维细胞的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA的m RNA的含量,以上数据进行分析,P0.05为差异有显著性。3.银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞抗氧化作用的影响,应用ELISA实验和RT-PCR技术检测各组人胚肺成纤维细胞的ECSOD蛋白及m RNA的含量。4.银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞炎性细胞因子的影响,测量PDGF蛋白及m RNA的含量,以上数据进行分析,P0.05为差异有显著性。结果:1.银杏叶提取物明显抑制人胚肺成纤维细胞的增殖,并促进其凋亡。MTT实验结果显示实验组与模型组比较,细胞增殖OD值明显降低(P0.05),且随银杏叶提取物浓度的增加,细胞增殖OD值显著降低。流式检测细胞凋亡实验结果显示银杏叶提取物促进人胚肺成纤维细胞的凋亡。2.银杏叶提取物抑制人胚肺成纤维细胞外基质的合成,与模型组比较,Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA蛋白及m RNA等物质的含量明显降低(P0.05)。3.银杏叶提取物能提高细胞抗氧化能力。ELISA实验及RT-PCR检测结果显示:与模型组比较,实验组人胚肺成纤维细胞的ECSOD蛋白及m RNA的含量明显增加(P0.05)。4.银杏叶提取物降低人胚肺成纤维细胞炎性细胞因子的分泌,ELISA实验及RT-PCR检测结果显示:与模型组比较,实验组细胞的PDGF蛋白及m RNA的含量显著降低(P0.05)。结论:银杏叶提取物能有效地抑制TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞的增殖,促进人胚肺成纤维细胞的凋亡,提高人胚肺成纤维细胞的抗氧化能力,并减少细胞炎性细胞因子的合成量。

【关键词】：
【学位授予单位】：山东中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285
【目录】：

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