苦丁茶冬青及大叶冬青的质量控制研究

发布时间：2019-11-20 12:18

【摘要】：苦丁茶冬青(Ilex Kudingcha C.J.Tseng)和大叶冬青(Ilex latifolia Thunb.)的干燥叶子同被认为是我国传统中药苦丁茶的主要来源,目前市售苦丁茶质量参差不齐,产地不明,以次充好现象依然存在,亟待建立能真正反应苦丁茶品质且具有专属性的质量控制标准。本文将从以下三个方面对苦丁茶冬青及大叶冬青进行质量控制研究:苦丁茶冬青及大叶冬青中多酚、总皂苷的含量分析;苦丁茶冬青及大叶冬青单体化合物的含量分析;苦丁茶冬青及大叶冬青HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究。现将主要研究内容概括如下:1.苦丁茶冬青及大叶冬青的多酚的含量分析通过对不同提取方法的比较,确定了苦丁茶冬青及大叶冬青多酚的提取方法为:8倍量70%乙醇超声提取3次。采用AB-8大孔树脂对苦丁茶冬青及大叶冬青70%乙醇超声提取物中多酚进行纯化,提取物上样后收集水洗部分,水浴挥去大部分水后减压干燥,即得苦丁茶冬青与大叶冬青多酚。采用F-C显色法,以绿原酸为对照品,进行方法学考察。结果表明,此方法线性关系、精密度、重复性、稳定性、回收率良好。对苦丁茶冬青及大叶冬青多酚含量进行测定,海南、广西、贵州苦丁茶冬青中多酚含量在1.26%~1.57%,浙江、江西、安徽大叶冬青中多酚含量在0.82%~0.87%。2.苦丁茶冬青及大叶冬青的总皂苷的含量分析采用三氧化二铝与XAD-2型大孔树脂联用的方法对苦丁茶冬青及大叶冬青70%乙醇超声提取物中总皂苷进行纯化。提取物上样后先用水洗脱,再用75%乙醇洗脱,收集75%乙醇洗脱部分,水浴挥去大部分溶剂后减压干燥,即得苦丁茶冬青与大叶冬青总皂苷。采用香草醛-冰醋酸法,以苦丁冬青皂苷D为对照品,对苦丁茶冬青中总皂苷进行方法学考察及含量测定;以苦丁冬青皂苷G为对照品,对大叶冬青中总皂苷进行方法学考察及含量测定。结果表明,此方法线性关系、精密度、重复性、稳定性、回收率良好;海南、广西、贵州苦丁茶冬青中总皂苷含量在10.83%~11.93%,浙江、江西、安徽大叶冬青总皂苷含量在7.14%~8.10%。3.苦丁茶冬青及大叶冬青中六种成分的含量分析采用一测多评法,采用高效液相色谱法,以苦丁冬青皂苷C为内参物,同时测定了苦丁茶冬青中山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷、苦丁冬青皂苷A、苦丁冬青皂苷E、苦丁冬青皂苷D的相对校正因子,并利用相对校正因子计算其他五种成分的含量。对不同色谱柱5种成分与苦丁冬青皂苷C的相对校正因子及色谱峰定位的重复性进行考察。同时采用外标法对这6种成分的含量进行测定,比较外标法和一测多评法的差异,验证一测多评法的可行性及准确性。结果表明不同色谱柱下相对校正因子及色谱峰定位的重复性良好,利用一测多评法计算得到的苦丁茶冬青中6种成分的含量与外标法测定值之间无显著性差异。一测多评法测定苦丁茶冬青中6种成分的含量简便、可行、准确。采用高效液相色谱法,分别测定大叶冬青中大叶冬青皂苷F、大叶冬青皂苷H、大叶冬青皂苷C、大叶冬青皂苷D、苦丁冬青皂苷F、苦丁茶冬青皂苷E的含量,并进行方法学考察。结果表明,此方法线性关系、精密度、重复性、稳定性、回收率良好。在不同产地及批次的大叶冬青中,大叶冬青皂苷F含量在0.33%~0.47%,大叶冬青皂苷H含量在0.23%~0.32%,大叶冬青皂苷C含量在2.00%~2.44%,大叶冬青皂苷D含量在0.32%~0.44%,苦丁冬青皂苷F含量在0.18%~0.29%,苦丁茶冬青皂苷E含量在0.15%~0.21%。4.苦丁茶冬青和大叶冬青的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究建立了苦丁茶冬青的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版对图谱进行处理,10批苦丁茶冬青HPLC-DAD指纹图谱中,确定了18个共有峰为指纹图谱峰,指认了其中7个峰,分别为绿原酸、山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷、苦丁冬青皂苷C、苦丁冬青皂苷A、苦丁冬青皂苷E、苦丁冬青皂苷D,对10批药材相似度进行评价,相似度在0.911~0.970之间。苦丁茶冬青HPLC-ELSD指纹图谱中,确定了11个共有峰为指纹图谱峰,10批药材HPLC-ELSD指纹图谱相似度在0.914~0.962之间。建立了大叶冬青的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版对图谱进行处理,在10批大叶冬青HPLC-DAD指纹图谱中,确定了15个共有峰为指纹图谱峰,指认了其中7个峰,分别为绿原酸、大叶冬青皂苷F、大叶冬青皂苷H、大叶冬青皂苷C、大叶冬青皂苷D、苦丁冬青皂苷F、苦丁茶冬青皂苷E,对10批药材相似度进行评价,相似度在0.915~0.984之间。大叶冬青HPLC-ELSD指纹图谱中,确定了14个共有峰为指纹图谱峰,10批药材HPLC-ELSD指纹图谱相似度在0.909~0.970之间。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284.1

【参考文献】