过敏体质IgE抗体类别转换相关分子表达及过敏康调体干预机制研究

发布时间：2019-11-22 12:53

【摘要】：目的:采用分子生物学技术明确过敏体质和平和体质人群IgE抗体类别转换相关分子表达的差异,寻找过敏体质特异性的潜在分子生物学标志,探寻过敏体质形成的微观机制;采用过敏康调理过敏体质,观察其对过敏体质人群相关疾病及生活质量的改善状况;明确过敏康调理过敏体质的作用靶点。方法:根据中医体质分类与判定、过敏原检测、过敏性鼻炎诊断标准,排除兼夹体质者、有明确西医诊断疾病者、服药期间者以及孕妇和哺乳期妇女,共纳入包含32例过敏体质者和20例平和体质者的样本群体52人,其中2例在实验过程中脱落。受试者来源分为两个部分,一部分为北京中医药大学国医堂中医门诊部、北京医圣堂中医门诊部、北京弘医堂中医门诊部就诊的过敏性鼻炎患者,另一部分为经张贴招募过敏体质及平和体质受试者海报获取的北京市各大高校学生志愿者。过敏康干预前,用普通采血管抽取受试者静脉血20ml,分离血清,用蛋白芯片技术检测平和体质与过敏体质者血清中IL-4、IL-13、CD40、BAFF、APRIL、IFN-y蛋白表达差异;用HDTA抗凝管抽取受试者静脉血5ml,并按QuantiGene plex试剂盒说明预处理全血,之后用QGP法检测平和体质与过敏体质AID、ID2 MmRNA表达水平,过敏康干预三个月后,再次抽取过敏体质者静脉血,并用以上方法做同样的检测。数据采用spss20软件分析,平和体质与过敏体质比较采用独立t检验,过敏体质干预前后比较采用配对t检验统计分析,数据以x±s表示,P0.5差异有统计学意义,P0.05差异没有统计学意义。观察过敏性鼻炎患者在过敏康干预开始前、干预4周后、干预8周后、干预12周后,干预结束1年时鼻症状总分表(TNSS)、伴随症状评价表(TNNSS)、变应性鼻炎患者生活质量评分表(RQLQ)的变化。数据采用spss20软件分析,两样本比较,差值满足正态分布,采用配对t检验。差值呈非正太分布,采用wilcoxon秩和检验。计量资料以x±s表示,P0.05差异有统计学意义。结果:1.与平和体质组比较,过敏体质组血清IL-4蛋白水平高于平和体质对照组,差异具有明显统计学意义(P0.01);IL-13、CD40蛋白浓度高于平和体质对照组,差异具有统计学意义(P0.05);IFN-γ蛋白水平低于平和体质对照组,差异具有统计学意义(P0.05);APRIL、BAFF蛋白浓度高于平和体质对照组,差异没有统计学意义(P0.05)。过敏体质组AID mRNA表达水平高于平和体质对照组,差异具有统计学意义(P0.05);Id2 mRNA表达水平低于平和体质对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。2.与干预前比较,过敏体质组干预后血清中IL-4、IL-13蛋白水平降低,差异具有统计学意义(P0.05);IFN-γ蛋白水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);CD40、BAFF、APRIL蛋白水平降低,差异没有统计学意义(P0.05);过敏体质组干预后AID mRNA表达水平略高于过敏体质干预前,但差异没有统计学意义(P0.05);Id2 mRNA表达水平较干预前升高,差异没有统计学意义(P0.05)。过敏体质组干预前后,血清中总IgE水平平均值下降,差异不具有统计学意义(P0.05);血清中sIgE水平平均值下降,差异不具有统计学意义(P0.05)。3.与干预前相比,过敏性鼻炎患者在过敏康干预4周后、干预8周后、干预12周后、干预结束1年时鼻症状总分(TNSS)、伴随症状评分(TNNSS)、变应性鼻炎患者生活质量评分(RQLQ)均有下降,其差异均有统计学意义(P0.05)。结论:1.IL-4、IL-13、IFN-γ是平和体质与过敏体质的差异性因子,参与过敏体质的形成机制,并作为过敏康调理过敏体质作用的靶点;过敏体质的形成涉及抗体类别转换过程中IL-4和CD40之间的协同关系对AID诱导的调节及Id2的缺失;但过敏体质的形成可能不涉及IgE抗体类别转换的替代途径。2.抗体类别转换过程中,所涉及的转录因子结合位点较多,过敏康调理过敏体质可能直接作用于抗体类别转换过程中NF-κB、STAT6、E2A等转录因子结合位点或蛋白激酶,这有待于将来实验的进一步研究。3.过敏康干预后,过敏症状有所改善,但IgE和sIgE的下降不具有统计学差异,可能是低亲和力的IgE与高亲和力的IgE发生有益竞争的结果,这有待于后期实验的进一步验证。4.过敏康从扶正祛邪的角度调理过敏体质,能明显改善过敏性鼻炎患者的症状,但体质是长期稳定存在的状态,改变十分缓慢,因此,后期实验需要进一步增加用药时间,或对病人进行饮食、起居上的综合指导使其体质得到进一步的改善。
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R229

【参考文献】