山蜡梅花萃取物的抗氧化和灭螺活性研究

发布时间：2020-11-12 03:42

　　 山蜡梅(Chimonanthus nitens Oliv.)是中国特有的中草药,分布广泛,资源丰富,其根、茎、叶、花蕾和果均可入药,是传统的庭院名花和民间用药,具有巨大的开发前景。福寿螺(Pomacea canaliculata Lamarck)是世界100种恶性外来入侵物种之一,对农业、经济和人身体健康都有严重的危害。如何有效防控福寿螺带来的危害,已经成为全社会关注的问题。本文以山蜡梅的花为实验材料,取干燥的山蜡梅花粉末用体积分数为70%乙醇超声波辅助冷浸提取,乙醇提取物用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇依次萃取,得到石油醚萃取物(PEEE)、乙酸乙酯萃取物(EAEE)和水饱和正丁醇萃取物(SBEE)。对山蜡梅花不同萃取物的抗氧化活性和对福寿螺的灭螺活性进行了筛选,从中挑选灭螺活性最好的组分研究其致死率分别为25%、50%和75%时福寿螺体内的生理生化变化以及肝脏组织的受损情况及对生理生化的影响,阐明灭螺活性组分的作用机理,为山蜡梅花的进一步开发利用提供科学的理论依据。体外抗氧化活性研究结果表明:山蜡梅花的PEEE、EAEE和SBEE对DPPH自由基和ABTS~+自由基均具有清除作用,对α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶有一定的抑制作用,其中EAEE的抗氧化活性最强,通过总酚和总黄酮含量的测定,山蜡梅花PEEE、EAEE和SBEE中均含有酚类和黄酮类物质,其中EAEE中的酚类物质和黄酮含量均是最高的,总黄酮为9.33 mg/g,总酚为2.93 mg/g。灭螺活性研究结果表明:山蜡梅花的PEEE、EAEE和SBEE对福寿螺都具有一定的毒杀作用,其中PEEE的灭螺活性最强(24 h,IC_(50)=0.287 mg/mL)。将福寿螺暴露于不同浓度PEEE中24 h后,肝脏表面整体松散,内部组织出现大面积坏死,损伤严重;肝细胞内粗面内质网数量减少,出现了肿胀、断裂和脱颗粒等现象;线粒体数量减少,出现形状不规则肿胀;肝脏内可溶性糖、可溶性蛋白和白蛋白(Alb)的含量随PEEE浓度的升高而降低,而谷丙转氨酶(GPT),谷草转氨酶(GOT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性随PEEE浓度的升高而升高。通过GC-MS分析,从山蜡梅花的PEEE中共鉴定出29种化合物,其中主要成分是酯类(48.13%)、醇类(18.43%)和蜡梅碱(14.70%)。
【学位单位】：江西师范大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2020
【中图分类】：R284;R285.5
【部分图文】：

山蜡梅花提取物的抗氧化和灭螺活性研究23最高的。表3-1山蜡梅花不同萃取物总酚和总黄酮含量Table3-1ThetotalphenolicandflavonoidscontentsindifferentextracsfromC.nitensflowers萃取物Extracts总酚含量Totalphenoliccontents(mg/g)总黄酮含量Totalflavonoidscontents(mg/g)石油醚萃取物PEEE1.21±0.284.58±0.13乙酸乙酯萃取物EAEE2.93±0.259.33±0.65水饱和正丁醇萃取物SBEE0.80±0.093.99±0.033.3.2DPPH自由基清除能力DPPH自由基清除能力结果如图3-1可示，结果表明山蜡梅花的PEEE、EAEE和SBEE组分对DPPH自由基均具有一定的清除作用，并且山蜡梅花不同萃取物对DPPH自由基清除率随着处理液浓度的升高而升高。采用IBMSPSSStatistics19.0软件进行线性拟合，得到PEEE、EAEE、SBEE和槲皮素的IC50值分别为11.767、9.353、20.188和0.083mg/mL。IC50值越大，抗氧化能力越弱，因此山蜡梅花不同萃取物清除DPPH自由基的能力由强到弱依次为槲皮素＞EAEE＞PEEE＞SBEE。这表明山蜡梅花的PEEE、EAEE和SBEE抗氧化能力存在差异，EAEE的抗氧化能力最强，PEEE次之，SBEE的抗氧化能力最弱。图3-1山蜡梅花不同萃取物对DPPH自由基的清除效果Fig.3-1DPPHradicalscavengingcapacityindifferentextracsfromC.nitensflowers

硕士学位论文243.3.3ABTS+自由基清除能力ABTS+自由基清除能力结果如图3-2可示，结果表明山蜡梅花的PEEE、EAEE和SBEE组分对ABTS+自由基均具有一定的清除作用，并且在实验浓度范围内山蜡梅花不同萃取物对ABTS+自由基清除率随着处理液浓度的升高而升高，浓度与清除率呈现一定的正比关系。采用IBMSPSSStatistics19.0软件进行线性拟合，得到PEEE、EAEE、SBEE和槲皮素的IC50值分别为11.795、23.447、28.86和2.532mg/mL。IC50值越大，抗氧化能力越弱，因此山蜡梅花不同萃取物清除ABTS+自由基的能力由强到弱依次为槲皮素＞PEEE＞EAEE＞SBEE。这表明山蜡梅花不同萃取物的抗氧化能力存在差异，PEEE的抗氧化能力最强，EAEE次之，SBEE的抗氧化能力最弱。图3-2山蜡梅花不同萃取物对ABTS+自由基的清除效果Fig.3-2ABTS+radicalscavengingcapacityindifferentextracsfromC.nitensflowers3.3.4α-葡萄糖苷酶活性抑制能力结果如图3-3所示，山蜡梅花不同萃取物对α-葡萄糖苷酶均有抑制作用，采用IBMSPSSStatistics19.0软件进行线性拟合，得到PEEE、EAEE、SBEE和阿卡波糖的IC50值分别为25.617、15.401、249.042和8.31mg/mL。IC50值越小，对α-葡萄糖苷酶抑制能力越强，因此山蜡梅花不同萃取物对α-葡萄糖苷酶的抑制能力由强到弱依次为阿卡波糖＞EAEE＞PEEE＞SBEE。

山蜡梅花提取物的抗氧化和灭螺活性研究25图3-3山蜡梅花不同提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制效果Fig.3-3α-GlucosidaseinhibitoryresultindifferentextractsofC.nitensflowers3.3.5酪氨酸酶活性抑制能力测定结果如图3-4所示，山蜡梅花不同萃取物对酪氨酸酶均有抑制作用，采用IBMSPSSStatistics19.0软件进行线性拟合，得到PEEE、EAEE、SBEE和曲酸的IC50值分别为21.542、9.429、17.123和1.069mg/mL。IC50值越小，对酪氨酸酶抑制能力越强，因此山蜡梅花不同萃取物对酪氨酸酶的抑制能力由强到弱依次为曲酸＞EAEE＞SBEE＞PEEE。图3-4山蜡梅花不同提取物对酪氨酸酶的抑制效果Fig.3-4TyrosinaseinhibitoryresultindifferentextractsofC.nitensflowers
【参考文献】

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本文编号：2880190