桂枝基于FXR相关通路治疗ANIT诱导的肝内胆汁淤积大鼠的作用机制研究

发布时间：2020-11-12 19:53

　　 第一部分中医药治疗黄疸病的用药规律的文献研究目的:分析总结中药治疗黄疸的用药规律,挖掘分析辛温药物是否为黄疸病的治疗的常用药。方法:检索中国知网、万方、维普三大中文数据库中中药治疗黄疸的文献,建立黄疸用药的数据库,对药物的异名、合名进行统一规范,经数据预处理后,利用频次分析、聚类分析等多种方法进行数据统计。结果:发现治疗黄疸以苦寒药物为主,辛温药物次之。结论:辛温药物也是黄疸病的常用药,为辛温药临床治疗黄疸提供了一些思路依据。第二部分桂枝改善ANIT诱导的肝内胆汁淤积大鼠模型的作用及机制研究目的:采用“ANIT+药物”建立病症结合模型,研究桂枝对肝内胆汁淤积模型大鼠FXR、SHP、BSEP、UGT2B4表达的影响,观察大鼠血清生化指标、肝脏组织病理变化,探讨桂枝治疗肝内胆汁淤积作用及机制。方法:将40只雄性SD大鼠(200±20g)随机分为正常组、模型组、熊去氧胆酸(UDCA)(60 mg·kg-1)组、桂枝60 mg·kg-1治疗组、桂枝20mg·kg-1治疗组5组,每组8只。除正常组和模型组外,其余各组按对应浓度连续水溶液0.005 m L·g-1体质量灌胃,每天1次,灌胃7 d,正常组与模型组予以同等体质量生理盐水灌胃,每天1次,灌胃7d;除正常组外,其余各组于灌胃第5天予100 mg·kg-1ANIT灌胃造模,每天1次,灌胃3 d。末次给药24小时后腹主动脉取血,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBi L)、总胆汁酸(TBA)水平;取大鼠肝脏组织1.5~2 cm,经10%甲醛固定,进行石蜡包埋切片,并行HE染色,免疫组化(IHC)分析FXR的表达;取大鼠肝脏组织提取RNA及蛋白,检测FXR m RNA表达及FXR下游分别与胆汁酸合成、解毒、转运相关的SHP,UGT2B4,BSEP蛋白的表达情况。结果:与正常组相比较,血清生化显示模型组ALT,AST,TBi L,TBA的水平升高(P0.05),免疫组化显示肝脏病理损伤严重、FXR蛋白和m RNA表达均降低,蛋白表达结果显示示SHP,UGT2B4,BSEP蛋白表达均降低(P0.05);与模型组相比较,药物组能在不同程度上降低大鼠血清中ALT,AST,TBi L,TBA的水平(P0.05),能在不同程度上改善肝脏组织的病理损伤,增加FXR蛋白灰度值,可在不同程度上促进FXR mRNA和FXR,SHP,BSEP和UGT2B4蛋白的表达(P0.05)。结论:桂枝可以在一定程度上缓解ANIT诱导的大鼠的肝内胆汁淤积,减轻其肝细胞的病理损伤,降低其血清中ALT,AST,TBi L以及TBA的水平。其机制可能是通过干预FXR-SHP,FXR-UGT2B4,FXR-BSEP信号通路来进行。
【学位单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2020
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

各组大鼠血清ALT，AST，TBA，TBiL的水平

各组大鼠肝组织FXR的表达

桂枝基于FXR相关通路治疗ANIT诱导的肝内胆汁淤积大鼠的作用机制研究21图4各组大鼠肝组织FXRmRNA和FXR，BSEP，SHP，UGT2B4蛋白表达水平4讨论肝内胆汁淤积根据其临床表现[1]：瘙痒、乏力、和黄疸，可归属于中医“黄疸”的范畴。关于黄疸的病名、病因病机第一部分讨论过，在此不再赘述。本段主要论述肝内胆汁淤积。胆汁淤积是因胆汁形成、分泌及排泄中任意环节或多个环节出现障碍的临床综合征。根据发生部位可分为肝内胆汁淤积或肝外胆汁淤积，本次研究主要探讨肝内胆汁淤积。早期患者常无明显不适，或仅有少部分患者出现目睛和（或）小便稍黄，临床不易发觉，待病情进一步加重，则可出现乏力，纳差，巩膜黄染，尿色加深，皮肤瘙痒等症状。肝内胆汁淤积的主要发病机制与胆汁的合成和重吸收、解毒以及转运等密切相关，胆汁主要由肝细胞分泌，其主要成分有水、胆汁酸、胆固醇、胆色素等等，其中大约有95%的成分是水，而胆汁酸又约占固体成分的50%-70%。通常，肝细胞分泌的胆汁会经毛细胆管通过各级胆管到达肝总管，然后大部分经胆囊管进入胆囊储存。
【参考文献】

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本文编号：2881172