CLDN6通过JAK2/STAT3信号通路抑制乳腺癌细胞MCF-7的迁移和侵袭

发布时间：2020-12-08 19:11

　　乳腺癌在女性肿瘤中发病率较高,患者死亡的主要原因是肿瘤发生转移。研究发现,紧密连接蛋白claudins（CLDNs）的表达异常能影响紧密连接（tight junctions,TJs）的结构和功能,并通过某些信号通路参与细胞信号转导,进而在肿瘤转移过程中发挥作用。本课题组在前期工作中发现,乳腺癌细胞MCF-7中CLDN6低表达,过表达CLDN6能抑制MCF-7细胞的迁移和侵袭。为了探讨CLDN6的作用机制,我们利用基因芯片技术筛查和分析CLDN6的靶基因及相关的信号通路,结果表明,CLDN6过表达后MCF-7细胞的JAKs/STATs信号通路中JAK2、STAT3等表达上调。JAKs/STATs信号通路是细胞因子、趋化因子和生长因子受体下游最主要的信号通路,参与细胞生长、增殖、迁移及侵袭等生物过程。因此,我们推测CLDN6可能直接或间接地激活JAK2/STAT3信号通路,从而发挥抑制MCF-7细胞迁移和侵袭的作用。但其具体作用机制目前尚不清楚。目的:探讨紧密连接蛋白CLDN6通过JAK2/STAT3信号通路抑制乳腺癌细胞MCF-7迁移和侵袭的作用,为乳腺癌的治疗提供新的靶点。方法:以前期... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第1章 文献综述
    1.1 紧密连接的功能
    1.2 CLDNs的结构和功能
        1.2.1 CLDNs的结构
        1.2.2 CLDNs的功能
    1.3 CLDNs的表达调控
    1.4 CLDNs与肿瘤
        1.4.1 CLDNs与卵巢癌
        1.4.2 CLDNs与前列腺癌
        1.4.3 CLDNs与乳腺癌
    1.5 CLDNs与JAKs/STATs信号通路
    1.6 展望与挑战
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 主要的试剂耗材
        2.1.3 主要的仪器设备
        2.1.4 主要试剂的配制
        2.1.5 引物和抗体
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 RT-PCR技术检测CLDN6的表达
        2.2.3 Western-Blot技术检测CLDN6的表达
        2.2.4 Western-Blot技术检测p-JAK2、p-STAT3、JAK2和STAT3的表达
        2.2.5 iCelligence实时细胞功能分析仪检测AG490对克隆组细胞的IC50值
        2.2.6 Western-Blot检测AG490抑制JAK2激活的最佳作用条件
        2.2.7 细胞划痕实验检测AG490对细胞迁移的影响
        2.2.8 Transwell小室实验检测AG490对细胞侵袭的影响
        2.2.9 Western-Blot技术检测E-cadherin和Vimentin的表达
    2.3 统计方法
第3章 结果
    3.1 克隆组细胞CLDN6表达的鉴定
    3.2 CLDN6对MCF-7细胞EMT的影响
    3.3 CLDN6对MCF-7细胞中JAK2、STAT3表达和激活的影响
    3.4 AG490处理克隆组细胞的IC50值
    3.5 AG490抑制JAK2激活的最适浓度
    3.6 AG490抑制JAK2激活的最适时间
    3.7 AG490对细胞迁移的影响
    3.8 AG490对细胞侵袭的影响
    3.9 AG490对EMT的影响
第4章 讨论
    4.1 序言
    4.2 CLDN6抑制MCF-7细胞的迁移、侵袭及EMT
    4.3 CLDN6抑制MCF-7细胞迁移和侵袭作用的机制
第5章 结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
硕士论文
[1]MCF-7细胞中CLDN6靶基因的筛选及CLDN6通过Tyk-2/Stats通路影响MCF-7细胞的恶性表型[D]. 张婷.吉林大学 2012



本文编号：2905546