PD-1通过调控Treg细胞和巨噬细胞促进挫伤骨骼肌修复再生
发布时间：2020-12-08 20:20
研究背景:骨骼肌挫伤是运动性骨骼肌损伤的常见形式,并且伴随着多种免疫细胞的浸润。巨噬细胞的M1/M2极化对挫伤骨骼肌修复具有重要作用,而Treg细胞可调节巨噬细胞M1/M2极化,同时促进损伤骨骼肌修复。但Treg细胞在损伤骨骼肌中聚集,从而调控巨噬细胞极化,参与骨骼肌修复再生的具体机制尚未阐明。另有研究表明,PD-1可调节巨噬细胞M1/M2极化;而Treg细胞也表达PD-1,PD-1可促进外周组织中Treg细胞的产生,对维持Treg细胞的正常功能有着重要作用。因此,本研究的目的是探索PD-1在损伤骨骼肌修复再生过程中的作用,阐明PD-1对Treg细胞生成以及巨噬细胞M1/M2极化的调控,这将加深我们对免疫系统与骨骼肌再生关系的认识。研究方法:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为损伤后1天、3天、7天、14天以及未损伤组(WT1、WT 3、WT 7、WT 14、WT con,n=8);30只雄性PD-1敲除C57BL/6小鼠随机分为损伤后1天、3天、7天、14天以及未损伤组(P1、P3、P7、P14、Pcon,n=6)。骨骼肌挫伤后1天、3天、...
【文章来源】：上海体育学院上海市
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨骼肌挫伤后各时间点WT组PD-1表达情况
PD-1通过调控Treg细胞和巨噬细胞促进挫伤骨骼肌修复再生19图2:WT组和PD-1-/-组小鼠骨骼肌挫伤修复的形态学表现WT:野生型小鼠；PD-1-/-:PD-1敲除小鼠。a：HE染色结果；b：伤后14天再生肌纤维直径对比。数据为平均值±标准差,*与WT14相比，P<0.05。4.3PD-1敲除对挫伤骨骼肌纤维化程度的影响Masson染色结果显示，WT14组(图3a)与P14(图3b)组骨骼肌均出现蓝色胶原纤维，表明挫伤骨骼肌出现纤维化修复。但WT14组与P14组蓝色胶原纤维面积大小无显著性差异(P>0.05)(图3a、b、c)。此外，WT组与PD-1-/-组Col1a1、Col3a1mRNA水平在损伤后1、3、7、14天都显著高于未损伤组(P<0.05)。但PD-1-/-组与WT组相比仍然没有显著差异(P>0.05)(图3d、e)。这些结果表明，虽然在挫伤骨骼肌修复过程中出现了纤维化修复，但PD-1敲除并不影响挫伤骨骼肌纤维化水平。
PD-1通过调控Treg细胞和巨噬细胞促进挫伤骨骼肌修复再生20图3：WT组和PD-1-/-组骨骼肌挫伤后纤维化情况WT:野生型小鼠；PD-1-/-:PD-1敲除小鼠。a:WT组以及PD-1-/-组Masson染色结果，红色部分为肌细胞质，蓝色部分为胶原纤维；b:WT组以及PD-1-/-组蓝色胶原纤维面积与总面积之比；c:骨骼肌挫伤后各时间点Col1a1mRNA表达水平；d:骨骼肌挫伤后各时间点Col3a1mRNA表达水平。数据为平均值±标准差,n(WT)=8，n(PD-1-/-)=6。a与WTcon组相比，P<0.05；b与Pcon组相比，P<0.05。4.4PD-1敲除对挫伤骨骼肌Treg细胞的影响Treg细胞标志物Foxp3[100]的免疫荧光结果显示(图4a)，在骨骼肌挫伤后1天，WT组与PD-1-/-组骨骼肌出现少量Treg细胞浸润，并且此时WT组与PD-1-/-组Treg细胞数量无明显差距。在骨骼肌挫伤后3天，WT组出现大量Treg细胞浸润，而PD-1-/-组Treg细胞数量少量增多，并且PD-1-/-组Treg细胞数量少于WT组。在骨骼肌挫伤后7天，WT组Treg细胞数量大量减少，而PD-1-/-组Treg细胞数量变化不大，但PD-1-/-组Treg细胞数量依旧少于WT组。在骨骼肌挫伤后14天，WT组Treg细胞数量进一步减少，接近正常水平，而PD-1-/-组Treg细胞数量仍然变化不大，维持一个中等水平，但此时PD-1-/-组Treg细胞数量多于WT组。说明此时挫伤骨骼肌仍未完全修复，PD-1-/-小鼠挫伤骨骼肌修复受损。WT组AREGmRNA水平在损伤后1、3、7天显著高于WTcon组(P<0.05)；PD-1-/-组AREGmRNA水平在损伤后1、3、7、14天与Pcon组相比无显著差异(P>0.05)。此外，在损伤后1、3、7天PD-1-/-组AREGmRNA水平都显著低于WT组(P<0.05)(图4b)。这些结果表明，与正常挫伤骨骼肌相比，PD-1敲除的挫伤骨骼肌Treg细胞生成减少，并且功能受损，挫伤骨骼肌修复受损。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Avenanthramides attenuate inflammation and atrophy in muscle cells[J]. Dongwook Yeo,Chounghun Kang,Tianou Zhang,Li Li Ji. Journal of Sport and Health Science. 2019(02)
[2]The effect of fitness level on cardiac autonomic regulation, IL-6,total antioxidant capacity, and muscle damage responses to a single bout of high-intensity interval training[J]. Lukas Cipryan. Journal of Sport and Health Science. 2018(03)
[3]Time for a paradigm shift in the classification of muscle injuries[J]. Bruce Hamilton,Juan-Manuel Alonso,Thomas M.Best. Journal of Sport and Health Science. 2017(03)
[4]小鼠骨骼肌挫伤后基因表达的时间进程（英文）[J]. Weihua Xiao,Yu Liu,Beibei Luo,Linlin Zhao,Xiaoguang Liu,Zhigang Zeng,Peijie Chen. Journal of Sport and Health Science. 2016(01)
本文编号：2905630
【文章来源】：上海体育学院上海市
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨骼肌挫伤后各时间点WT组PD-1表达情况
PD-1通过调控Treg细胞和巨噬细胞促进挫伤骨骼肌修复再生19图2:WT组和PD-1-/-组小鼠骨骼肌挫伤修复的形态学表现WT:野生型小鼠；PD-1-/-:PD-1敲除小鼠。a：HE染色结果；b：伤后14天再生肌纤维直径对比。数据为平均值±标准差,*与WT14相比，P<0.05。4.3PD-1敲除对挫伤骨骼肌纤维化程度的影响Masson染色结果显示，WT14组(图3a)与P14(图3b)组骨骼肌均出现蓝色胶原纤维，表明挫伤骨骼肌出现纤维化修复。但WT14组与P14组蓝色胶原纤维面积大小无显著性差异(P>0.05)(图3a、b、c)。此外，WT组与PD-1-/-组Col1a1、Col3a1mRNA水平在损伤后1、3、7、14天都显著高于未损伤组(P<0.05)。但PD-1-/-组与WT组相比仍然没有显著差异(P>0.05)(图3d、e)。这些结果表明，虽然在挫伤骨骼肌修复过程中出现了纤维化修复，但PD-1敲除并不影响挫伤骨骼肌纤维化水平。
PD-1通过调控Treg细胞和巨噬细胞促进挫伤骨骼肌修复再生20图3：WT组和PD-1-/-组骨骼肌挫伤后纤维化情况WT:野生型小鼠；PD-1-/-:PD-1敲除小鼠。a:WT组以及PD-1-/-组Masson染色结果，红色部分为肌细胞质，蓝色部分为胶原纤维；b:WT组以及PD-1-/-组蓝色胶原纤维面积与总面积之比；c:骨骼肌挫伤后各时间点Col1a1mRNA表达水平；d:骨骼肌挫伤后各时间点Col3a1mRNA表达水平。数据为平均值±标准差,n(WT)=8，n(PD-1-/-)=6。a与WTcon组相比，P<0.05；b与Pcon组相比，P<0.05。4.4PD-1敲除对挫伤骨骼肌Treg细胞的影响Treg细胞标志物Foxp3[100]的免疫荧光结果显示(图4a)，在骨骼肌挫伤后1天，WT组与PD-1-/-组骨骼肌出现少量Treg细胞浸润，并且此时WT组与PD-1-/-组Treg细胞数量无明显差距。在骨骼肌挫伤后3天，WT组出现大量Treg细胞浸润，而PD-1-/-组Treg细胞数量少量增多，并且PD-1-/-组Treg细胞数量少于WT组。在骨骼肌挫伤后7天，WT组Treg细胞数量大量减少，而PD-1-/-组Treg细胞数量变化不大，但PD-1-/-组Treg细胞数量依旧少于WT组。在骨骼肌挫伤后14天，WT组Treg细胞数量进一步减少，接近正常水平，而PD-1-/-组Treg细胞数量仍然变化不大，维持一个中等水平，但此时PD-1-/-组Treg细胞数量多于WT组。说明此时挫伤骨骼肌仍未完全修复，PD-1-/-小鼠挫伤骨骼肌修复受损。WT组AREGmRNA水平在损伤后1、3、7天显著高于WTcon组(P<0.05)；PD-1-/-组AREGmRNA水平在损伤后1、3、7、14天与Pcon组相比无显著差异(P>0.05)。此外，在损伤后1、3、7天PD-1-/-组AREGmRNA水平都显著低于WT组(P<0.05)(图4b)。这些结果表明，与正常挫伤骨骼肌相比，PD-1敲除的挫伤骨骼肌Treg细胞生成减少，并且功能受损，挫伤骨骼肌修复受损。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Avenanthramides attenuate inflammation and atrophy in muscle cells[J]. Dongwook Yeo,Chounghun Kang,Tianou Zhang,Li Li Ji. Journal of Sport and Health Science. 2019(02)
[2]The effect of fitness level on cardiac autonomic regulation, IL-6,total antioxidant capacity, and muscle damage responses to a single bout of high-intensity interval training[J]. Lukas Cipryan. Journal of Sport and Health Science. 2018(03)
[3]Time for a paradigm shift in the classification of muscle injuries[J]. Bruce Hamilton,Juan-Manuel Alonso,Thomas M.Best. Journal of Sport and Health Science. 2017(03)
[4]小鼠骨骼肌挫伤后基因表达的时间进程（英文）[J]. Weihua Xiao,Yu Liu,Beibei Luo,Linlin Zhao,Xiaoguang Liu,Zhigang Zeng,Peijie Chen. Journal of Sport and Health Science. 2016(01)
本文编号：2905630
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/2905630.html
最近更新
教材专著
