热疗联合顺铂抑制人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖及其分子机制的研究

发布时间：2020-12-16 01:40

　　目的:研究热疗（Hyperthermia,HT）联合顺铂（Cisplatin,DDP）对体外培养的人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP增殖的影响,并探讨其可能的分子机制。为热疗联合顺铂在胃癌耐药患者体内的研究和临床治疗提供依据。方法:在体外对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP进行常规培养,分为对照组、顺铂组、热疗组与热疗联合顺铂组。采用相差显微镜观察该细胞株分别在41℃、44℃、47℃及50℃下培养12 h、24 h、36 h后的细胞形态;MTT实验检测SGC-7901/DDP在不同时间和温度下的增殖情况,41℃、44℃、47℃与1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml顺铂在最适热疗时间下联合作用后的增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测对照组、顺铂组（2μg/ml）、热疗组（47℃）及热疗联合顺铂组（47℃和2μg/ml）SGC-7901/DDP细胞在最适热疗时间下的早期凋亡情况。采用高通量芯片技术检测对照组、顺铂组及热疗联合顺铂组细胞中的mRNA表达谱、lncRNA表达谱变化;通过实时荧光定量聚合酶链式反应验证热疗联合顺铂组比对照组中TCONS_0... 

【文章来源】：甘肃中医药大学甘肃省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

热疗温度和热疗时间梯度下SGC-7901/DDP细胞的形态

基于细胞形态观察结果，我们通过 MTT 实验做进一步验证。MTT 实验结果显示，细胞增殖抑制率随热疗温度增加及热疗时间的延长不断升高，见图 2，44℃热疗 36 h 后抑制率达到 24.74％，可见细胞在 41℃与 44℃条件下受抑制情况不明显；当热疗温度达到 47℃时，8.91％、55.75％与 67.40％分别为作用 12 h、24 h、36 h 后的细胞增殖抑制率，细胞明显受到抑制。热疗温度 50℃时，细胞增殖抑制率依次为 29.35％、83.51％与92.21％，见表 1。MTT 实验结果与细胞形态变化基本一致。基于热疗联合顺铂的处理方式，干预 36h 后细胞生长过密，导致除干预因素外的抑制因素，结合图 2 的结果，将选用 24 h 作为下文热疗与顺铂联合作用的培养时间。

热疗联合顺铂抑制人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖及其分子机制的研究253.4HT联合DDP影响SGC-7901/DDP细胞早期凋亡基于上述培养条件，SGC-7901/DDP细胞经过不同干预后的凋亡情况见图4。本次检测结果是根据特定门控内的细胞比例而获得细胞在不同凋亡时期的凋亡细胞比例。结果表明，顺铂与热疗分别诱导3.30％与9.01％的SGC-7901/DDP细胞早期凋亡。相比热疗组，热疗联合顺铂组细胞的早期凋亡率增加了1.8倍（16.5％），见图5。可见，顺铂对细胞的早期凋亡无明显诱导作用，而热疗联合顺铂可以使细胞的早期凋亡率增加。热疗增强了顺铂干预SGC-7901/DDP细胞的敏感性。图4对照组、顺铂组、热疗组、热疗联合顺铂组细胞凋亡率改变


本文编号：2919280