米诺环素对氧化应激诱导角质形成细胞CXCL16产生的作用及机制研究

发布时间：2020-12-24 00:06

　　目的:通过构建体外细胞模型,探明米诺环素对氧化应激诱导角质形成细胞CXCL16产生的作用及机制;扩展和深化对米诺环素药理作用机制的认识,为今后进一步开发及应用米诺环素作为白癜风类疾病的治疗新手段提供坚实的理论依据。方法:体外建立细胞模型。人角质形成细胞系（HaCat）培养在含有10%FBS的DMEM培养基中。不同浓度的H₂O₂（125、250、500、1000、10000 uM）;不同浓度的米诺环素（125、250、500、1000 uM）;1000 uM H₂O₂+米诺环素（500、1000 uM）作用于HaCat细胞;PBS处理组作为空白对照组。处理后各组用CCK8法测试细胞活力。趋化因子芯片检测确定试验的细胞因子。提取总RNA,依此为模版逆转录为cDNA,再应用实时QRT-PCR检测细胞因子CXCL16 mRNA的表达水平进行检测。收集上述各组细胞培养上清,用ELISA检测细胞释放趋化因子CXCL16水平。Transwell趋化实验和流式细胞术检测上述各处理组细胞上清对外周血PBMC CD8<... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：37 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CCK8测试不同浓度H2O2对HaCat细胞活性的影响

13图2CCK8测试不同浓度米诺环素和H2O2对HaCat细胞活性的影响。Figure2CCK8teststheeffectsofdifferentconcentrationsofminocyclineandH2O2ontheactivityofHaCatcells.2.3H2O2诱导下HaCat细胞趋化因子的选择如图3所示，与对照组相比，H2O2（1000uM）作用于HaCat细胞后，细胞因子CXCL16表达明显；而H2O2（1000uM）+米诺环素（1000uM）干预组，中CXCL16的表达明显降低。实验选择细胞因子CXCL16作为实验目标。图3芯片筛选H2O2诱导的HaCat相关细胞趋化因子的变化。Figure3ChipscreeningforH2O2-inducedchangesinHaCat-relatedchemokines.2.4PCR检测CXCL16因子mRNA表达的变化如图4所示，与阳性对照组相比，H2O2（1000uM）作用于HaCat细胞后，细胞因子CXCL16的表达明显增加，用H2O2（1000uM）+米诺环素（分别500、

13图2CCK8测试不同浓度米诺环素和H2O2对HaCat细胞活性的影响。Figure2CCK8teststheeffectsofdifferentconcentrationsofminocyclineandH2O2ontheactivityofHaCatcells.2.3H2O2诱导下HaCat细胞趋化因子的选择如图3所示，与对照组相比，H2O2（1000uM）作用于HaCat细胞后，细胞因子CXCL16表达明显；而H2O2（1000uM）+米诺环素（1000uM）干预组，中CXCL16的表达明显降低。实验选择细胞因子CXCL16作为实验目标。图3芯片筛选H2O2诱导的HaCat相关细胞趋化因子的变化。Figure3ChipscreeningforH2O2-inducedchangesinHaCat-relatedchemokines.2.4PCR检测CXCL16因子mRNA表达的变化如图4所示，与阳性对照组相比，H2O2（1000uM）作用于HaCat细胞后，细胞因子CXCL16的表达明显增加，用H2O2（1000uM）+米诺环素（分别500、


本文编号：2934590