Nur77-GRP78通路与糖尿病心肌缺血再灌注损伤敏感性增加的关系

发布时间：2021-01-08 23:29

　　目的:研究Nur77与GRP78在糖尿病心肌缺血再灌注损伤敏感性增加中的作用,以及上述过程发生的潜在分子通路。方法:分别将正常、高糖培养基中培养的H9C2心肌细胞置于无氧条件下进行培养2h建立心肌缺血再灌注（I/R）模型,得到正常培养+缺氧诱导组（NC+I组,n=9）和高糖培养+缺氧诱导组（H/H+I组,n=9）;正常细胞作为空白对照组（NC组,n=9）。用Annexin-V FITC/PI双染法、分光光度法测Caspase3活性及JC-1染色法测线粒体膜电位,评估各组凋亡差异;用荧光染色法、Western blot法检测胞内Nur77、GRP78的分布与相对表达量,并用Co-IP法测定Nur77与GRP78在胞内的结合情况。结果:检测各组心肌细胞的凋亡差异:与NC组相比,其他两组（NC、H/H+I）细胞凋亡明显增加（P<0.01）;与NC+I组相比,H/H+I组细胞凋亡明显增加（P<0.01）。检测各组细胞Nur77、GRP78亚细胞分布比较:与NC组相比,NC+I组及H/H+I组细胞核周围Nur77分布明显增加（P<0.01）;与NC+I组相比,H/H+I组细胞核... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组间Annexin-VFITC/PI双染法检测细胞凋亡比较

山西医科大学硕士学位论文14与NC组相比，NC+I组及H/H+I组Caspase3活性明显升高，差异有统计学意义；与NC+I组相比，H/H+I组细胞Caspase3活性明显升高，差异有统计学意义（图2）。说明NC+I组细胞凋亡水平较NC组明显升高，H/H+I组细胞凋亡水平较其他两组明显升高。表1：各组间分光光度法检测Caspase3活性比较图2：各组间分光光度法检测Caspase3活性比较注：与NC组相比，aP<0.01，bP<0.01；与NC+I组相比,bP<0.01。2.3各组间细胞JC-1染色法检测线粒体膜电位比较分组NCNC+IH/H+I阴性OD405（单位：nm）0.061±0.0040.073±0.0050.094±0.0060.049±0.003activationpercent124.21%±3.59%149.74%±4.47%192.78%±3.80%

山西医科大学硕士学位论文15与NC组相比，NC+I组及H/H+I组细胞凋亡明显增加，差异有统计学意义；与NC+I组相比，H/H+I组细胞凋亡明显增加，差异有统计学意义（图3）。图3：各组间细胞JC-1染色法检测线粒体膜电位比较注：与NC组相比，aP<0.01，bP<0.01；与NC+I组相比,bP<0.01。2.4荧光显微镜下各组间Nur77、GRP78的亚细胞分布比较与NC组相比，NC+I组及H/H+I组细胞核周围Nur77分布明显增加，差异有统计学意义；与NC+I组相比，H/H+I组细胞核周围Nur77分布明显增加，差异有统计学意义。与NC组相比，NC+I组及H/H+I组细胞线粒体周围Nur77分布明显增加，差异有统计学意义；与NC+I组相比，H/H+I组细胞线粒体周围Nur77分布明显增加，差异有统计学意义（图4-1）。与NC组相比，NC+I组及H/H+I组细胞线粒体周围GRP78分布明显增加，差异有统计学意义；与NC+I组相比，H/H+I组细胞GRP78线粒体周围分布稍有增加，差异无统计学意义（图4-2）。与NC组相比，NC+I组及H/H+I组细胞内质网GRP78分布明显增加，差异有统计学意义；与


本文编号：2965517