膳食色氨酸激活AhR通路的抗帕金森病研究

发布时间：2021-01-12 05:35

　　[目的]探讨膳食色氨酸对鱼藤酮诱导帕金森（PD）大鼠运动症状的改善作用,并揭示其通过肠道菌群代谢从而激活AhR通路减轻神经炎症的抗PD作用机制。[方法]1.鱼藤酮（2mg/kg/d）皮下注射28天,建立PD大鼠模型。然后随机分为对照组（正常大鼠）,PD组,PD+色氨酸缺乏组（饲料中不含色氨酸）和PD+色氨酸组（饲料中含色氨酸）,应用旷场实验检测PD大鼠运动功能,Westernblot检测大鼠黑质区NF-kβ核移位,ELISA检测血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,观察色氨酸的抗PD作用。2.在膳食色氨酸饮食的PD大鼠中,分别进行氨苄西林（6mg/20g/d）灌胃1周和万古霉素（3mg/20g/d）灌胃1周进行处理,应用旷场实验检测PD大鼠运动功能,Westernblot检测大鼠黑质区NF-kβ核移位,ELISA检测血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,观察色氨酸的抗PD作用是否与肠道菌群相关。3.在膳食色氨酸组PD大鼠应用芳香烃受体抑制剂CH223191处理,Western blotting检测大鼠黑质区AhR靶基因CYP1B1表达、NF-kβ核移... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

膳食色氨酸改善鱼藤酮诱导的PD大鼠运动功能

第3章实验结果3.1膳食色氨酸具有抗PD作用3.1.1建立PD大鼠模型为了建立PD大鼠模型，我们使用单次鱼藤酮皮下注射的方式，建立大鼠PD模型。大鼠每天被注射鱼藤酮溶液（2.0mg/kg/d），持续28天，诱导PD模型。我们进行矿场实验评估大鼠运动能力，将平均速度作为评估大鼠运动能力的指标，如图1所示，与正常组大鼠相比，PD大鼠运动能力明显减慢，说明PD大鼠模型的建立是成功的。图1鱼藤酮处理后大鼠运动能力减低注：Control：对照组，Rot：鱼藤酮；*P<0.05,ControlVSRot3.1.2膳食色氨酸可改善PD模型大鼠运动功能为了研究膳食色氨酸是否具有抗帕金森病作用，我们进行旷场实验评估大鼠运动能力，结果显示色氨酸缺乏组，小鼠运动能力明显减慢，而色氨酸饮食组小鼠运动能力明显好于色氨酸缺乏组（图2）。图2膳食色氨酸改善鱼藤酮诱导的PD大鼠运动功能注：Rot鱼藤酮；Trpempty:色氨酸缺乏；Trpfeeding:色氨酸饮食；***P<0.001,Trpfeeding+RotVSTrpempty+Rot13

3.1.3膳食色氨酸降低PD大鼠NF-kβ核转位神经炎症是PD重要发病机制之一，有研究表明色氨酸可调节中枢脱髓鞘疾病的神经炎症，其是否可抑制PD神经炎症呢？NF-kB是调控神经细胞炎症反应的重要转录因子，NF-kB转位入核后，其P65蛋白亚基作为转录因子可以直接调节多种炎症因子的表达。本实验分别提取黑质中的核蛋白和总蛋白，Westernblot检测发现，在色氨酸缺乏组PD大鼠黑质中，NF-kB核蛋白含量升高，提示核转位增加，而在色氨酸组PD大鼠黑质中，NF-kB核蛋白含量较色氨酸缺乏组大鼠低，提示核移位减少。（图3）图3膳食色氨酸可降低PD大鼠NF-kβ核转位注：Control:正常大鼠组；Rot:鱼藤酮;Trpempty:色氨酸缺乏；Trpfeeding:色氨酸饮食。*P<0.05，Trpempty+RotvsControl3.1.4膳食色氨酸降低PD大鼠血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平为了进一步研究色氨酸对血清中炎性因子的影响，我们通过应用ELISA法检测血清各组促炎细胞因子IL-1β,IL-6与TNF-α的水平，发现色氨酸缺乏组PD大鼠血清中IL-1β,IL-6与TNF-α较正常组均显著上调，而色氨酸饮食组PD大鼠血清中IL-1β,IL-6与TNF-α水平显著低于色氨酸缺乏组（图4）。14


本文编号：2972257