外周血间充质干细胞通过STAT3介导的IL-10信号调控巨噬细胞极化的机制研究

发布时间：2021-01-19 20:53

　　目的:1、研究IL-10/STAT3信号通路在大鼠外周血间充质干细胞（PBMSCs）体外调节巨噬细胞极化中的作用。2、初步探索大鼠外周血间充质干细胞（PBMSCs）与大鼠外周血间充质干细胞条件培养基（P-CM）对于体外调节巨噬细胞极化的差异。方法:1、大鼠PBMSCs的分离、培养与鉴定:收集粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员后的SD大鼠血液,运用淋巴细胞分离液（Ficoll）吸取单核细胞层,将收集到的细胞接种、培养并传代。取P3代细胞,采用流式细胞术（FCM;CD29、CD90、CD44、CD45、CD79和CD11b）、免疫细胞化学染色（ICC;CD34、CD73、CD105和HLA-DR）及三系分化实验鉴定分离、培养的PBMSCs。2、大鼠M0型巨噬细胞的分离、培养与鉴定:（1）采用L929细胞制备L929条件培养基。（2）收集SD大鼠股骨骨髓腔冲洗液,离心并收集细胞,使用巨噬细胞培养基（含20%L929条件培养基）接种并培养6d,将得到的细胞经FCM（CD68和CD11b）进行表型鉴定。3、PBMSCs与M0型巨噬细胞共培养:本次实验共分为5组:PBMSCs组、巨噬细胞（M0）... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

外周血所提原代细胞生长形态及三系分化特性

遵义医科大学硕士学位论文杨睿222.2所提外周血细胞表型特征经流式细胞术及免疫细胞化学染色分析显示，外周血所提细胞高表达CD29、CD90、CD44、CD73、CD105，不表达或若表达CD45、CD79、CD11b、CD34及HLA-DR（图2、3）。图2FCM分析外周血所提原代细胞表型Figure2PhenotypesofthecollectedcellsfromperipheralbloodanalyzedbyFCM

遵义医科大学硕士学位论文杨睿23图3ICC分析外周血所提原代细胞表型Figure3PhenotypesofthecollectedcellsfromperipheralbloodanalyzedbyICC2.3所提骨髓细胞形态及表型特征由大鼠骨髓所提细胞，在使用巨噬细胞培养基培养10天后，通过光镜可观察到其大体形态呈圆形，周围有细小伪足伸出且贴壁生长（图4A）。经流式鉴定，所培养细胞高表达CD11b与CD68（图4B）。

【参考文献】：
期刊论文
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[2]三种方法提取大鼠原代巨噬细胞的生物学特点比较[J]. 禹茜,胡军涛,赖洁,王睿之,马兰兰,汤展宏.  中国组织工程研究. 2018(24)
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本文编号：2987693