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中国大样本患者来源的乙型肝炎病毒rtA181S+T184I+M204I新型多重耐药突变特点分析

发布时间:2021-01-20 04:56
  目的分析大样本慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者HBV逆转录酶区rtA181S+T184I+M204I突变的临床发生特点和表型特征。方法回顾性收集2007年7月–2016年6月就诊于解放军总医院第五医学中心(原解放军302医院)并接受核苷(酸)类似物(NAs)耐药突变检测的22 009例慢性HBV感染者的临床资料和序列信息,统计NAs经典耐药突变以及rtA181S相关突变类型;对检出率最高的rtA181S+T184I+M204I突变样本进行克隆测序(≥20个克隆/样本);表型分析病毒的复制力及药物敏感性。结果22 009例慢性HBV感染者中,0.82%(180/22 009)的患者检出rtA181S突变,与rtA181S阴性患者相比,rtA181S阳性患者有更高的拉米夫定(LAM)、阿德福韦酯(ADV)和恩替卡韦(ETV)的抗病毒用药史。180例rtA181S阳性患者中,138例检出与NAs经典耐药突变共存。其中34例与LAM耐药突变共存;17例与ADV耐药突变(ADVr)共存;87例与ETV耐药突变(ETVr)共存,包括1例ADVr+ETVr突变。rtA181S+T184I+M204... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:65 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

中国大样本患者来源的乙型肝炎病毒rtA181S+T184I+M204I新型多重耐药突变特点分析


例患者HBVrtA181S相关突变株基因型进化树分析

电泳图,基因扩增,样本,代表性


重庆医科大学硕士研究生学位论文32图2代表性患者样本的HBVRT基因扩增电泳结果Figure2.ElectrophoresisresultsoftheHBVRTgeneamplificationfromfourrepresentativesamples注:m2000为DNAMarker;s7945、s11016、s19671、s23124为样本编号;-为阴性对照。2.3.2rtA181S+T184I+M204I代表性患者HBVRT基因克隆将HBVRT区片段胶回收后连接至T-easy载体上进行基因克隆,样本菌落PCR结果如图3,目的条带约1200bp。每样本选取至少20个阳性克隆进行测序,重点分析rtA181S突变及经典耐药突变位点,18个克隆为rtA181S+T184I+M204I突变、1个克隆为rtA181S+T184I+M204V突变、1个克隆为rtA181S+T184I+M204I+M250V突变,测序结果如图4。

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重庆医科大学硕士研究生学位论文33图3HBVRT区菌落PCR电泳结果Figure3.TheelectrophoresisresultsofHBVRTcloning注:m2000为DNAMarker;s11016-1~24为样本克隆编号;-为阴性对照。


本文编号:2988420

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