银杏叶提取物对新生鼠缺氧缺血后脑p-Tau蛋白表达的影响研究

发布时间：2021-01-22 08:03

　　目的:通过制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic ischemic brain damage,HIBD）模型,观察银杏叶提取物注射液（Ginkgo biloba extract,EGB）治疗HIBD过程中磷酸化Tau（phosphorylated Tau protein,p-Tau）蛋白表达情况,为EGB应用于新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE）的临床治疗提供新的理论依据。方法:将60只新生7日龄清洁级SD大鼠随机分为假手术组20只、NS治疗组（NS组）20只和EGB治疗组（EGB组）20只,按治疗时间点分为6h、12h、24h、48h、72h分为5个亚组,每个亚组各4只动物。分组及术后均与母鼠同笼正常生活。假手术组切开颈部皮肤,分离右侧颈总动脉,不结扎。NS治疗组以及EGB治疗组均参照Rice法建立HIBD动物模型,观察造模前后新生大鼠的行为学改变,EGB组每日腹腔注射一次EGB0.01g/g,NS组每日腹腔注射一次生理盐水0.01g/g。在各时间点断头取脑组织。分别对脑组织采用HE染色方法观察脑神经细胞病理损伤;采用免... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1两组小鼠术后6小时脑组织病理改变（Z6

遵义医科大学硕士学位论文李羚玮172结果2.1行为学观察在实验前各组新生大鼠行为能力均属于正常状态。缺血术后新生鼠一般情况良好，活动自由，休息半小时后进行缺氧实验时则情况不同。新生大鼠在缺氧后，迅速出现呼吸变浅加快、烦躁不安症状，缺氧1小时左右后，逐渐出现减少活动、头颤、四肢抖动、无法站立甚至抽搐等症状。2小时缺氧过程中均无新生大鼠死亡。HIBD术后新生大鼠可以缓慢爬行但不灵活，表现为点头颤动、不能翻身、四肢颤抖、懒于活动等。在HIBD后48h上述基本完全消失。假手术组上述行为均无异常。2.2HE染色观察各组新生鼠脑组织病理改变假手术组中脑组织神经元形态结构正常，细胞排列规则有序，神经元细胞数量丰富，可见致密组织结构；未见明显病理损伤改变，脑组织整体基本结构正常。从所选5个时间点来看每个时间点无论是NS组或EGB组脑组织均出现不同程度的损伤情况：新生鼠脑组织可见脑细胞有不同程度的肿胀，细胞核排列紊乱，部分视野可见核固缩。NS组中6h组细胞核排列有少许紊乱，随着时间的增长，细胞出现肿胀，12h组可见脑神经细胞坏死，组织结构疏松，可见较多空泡化结构伴有小胶质细胞浸润；该视野仅可见少量细胞神经元，且神经元固缩；脑血管充血，血管周围伴炎症细胞浸润，72h组较12h组细胞排列整齐，细胞肿胀程度减弱。EGB组中6h组细胞核排列有少许紊乱，12h组可见少量神经元固缩，局部区域细胞数量稀少，组织结构疏松，72h组较12h组细胞排列整齐，细胞肿胀程度减弱，且可见小胶质细胞。EGB组整体细胞排列较NS组整齐，细胞肿胀及核固缩程度较轻。（详见图1-5）图1两组小鼠术后6小时脑组织病理改变（HE×400）Z6.假手术组N6.NS组G6.EGB组Z6N6G6

遵义医科大学硕士学位论文李羚玮18图2两组小鼠术后12小时脑组织病理改变（HE×400）Z12.假手术组N12.NS组G12.EGB组图3两组小鼠术后24小时脑组织病理改变（HE×400）Z24.假手术组N24.NS组G24.EGB组图4两组小鼠术后48小时脑组织病理改变（HE×400）Z48.假手术组N48.NS组G48.EGB组图5两组小鼠术后72小时脑组织病理改变（HE×400）Z72.假手术组N72.NS组G72.EGB组2.3免疫组化方法检测新生鼠脑组织中p-Tau蛋白的阳性表达p-Tau蛋白在光学显微镜下，其阳性表达为染色均呈棕黄色或深棕色的颗粒沉积。采用免疫组化阳性细胞百分比分析方法，使用Image-ProPlus6.0软件分析结果为：假手术组、NS组以及EGB组中p-Tau蛋白阳性细胞数动态变化相似：6h组p-Tau蛋白阳性细胞数开始升高，12h组阳性细胞数最多，随着时间的推移，阳性细胞数逐渐下Z12N12G12Z24N24G24Z48G48N48Z72N72G72

【参考文献】：
期刊论文
[1]亚低温联合神经节苷脂治疗新生儿缺氧缺血性脑病的疗效分析[J]. 周伟,毕叶,魏燕燕,邹玲,傅大干.  解放军医学院学报. 2020(01)
[2]银杏叶提取物对神经退行性疾病的作用机制及研究进展[J]. 张徽,王淑静,袁天宇,杨骄,代民言,张琦,金成斌.  药学研究. 2020(01)
[3]中重度新生儿缺氧缺血性脑病患儿血清尿酸、Tau蛋白水平变化及其与窒息程度、神经发育预后的相关性研究[J]. 王秋丽,吕红艳,董志勇,李军勤,温志杰,霍海花,杨志华.  实用心脑肺血管病杂志. 2019(12)
[4]亚低温治疗新生儿缺血缺氧脑病疗效及远期预后的Meta分析[J]. 刘鹏,何珊,左泽兰.  重庆医学. 2020(05)
[5]银杏叶提取物调控TLR4/NF-κB通路减轻急性脑缺血小鼠脑皮质缺血研究[J]. 刘磊,卫昊,陈丹丹,贾瑞,张巍岚.  中草药. 2019(21)
[6]Tau蛋白对突触结构和功能的调控及其相关机制[J]. 陈艳清,陈峥,于佳.  脑与神经疾病杂志. 2019(11)
[7]新生儿缺氧缺血性脑病的发病机制及相关治疗进展[J]. 吴静静,包蕾.  现代医药卫生. 2019(20)
[8]线粒体凋亡在中枢神经系统疾病的作用及机制研究进展[J]. 俞睿,祝美珍,刘倩菁,向昱臻,苏萍,韦亮,孙诗杰.  中国医药导刊. 2019(10)
[9]新生儿脑损伤生物标志物研究进展[J]. 张琦,姜泓,冯慧玲.  新乡医学院学报. 2019(10)
[10]Caspase家族与神经细胞凋亡的研究进展[J]. 苏胜有.  世界最新医学信息文摘. 2019(80)

硕士论文
[1]新生儿缺氧缺血性脑病的亚低温治疗临床疗效及预后危险因素分析[D]. 陈晓.山东大学 2019
[2]缺血性脑卒中大鼠脑组织细胞凋亡与tau蛋白的作用机制研究[D]. 刘兵兵.北京中医药大学 2018
[3]新生大鼠HIBD后海马Tau蛋白及p-tau蛋白的表达与细胞凋亡的关系[D]. 张冬秀.郑州大学 2014
[4]足月儿窒息后血清脑源性神经营养因子、S100B蛋白及Tau蛋白的动态研究[D]. 杨素艳.河北医科大学 2011



本文编号：2992883