基于AKT和MAPK信号通路探讨丹酚酸B对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞氧化应激的调控作用

发布时间：2021-01-31 19:16

　　目的通过建立血管紧张素II（Angiotensin II,Ang II）诱导的人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）氧化应激模型,采用丹酚酸B（Salvianolic acid B,SalB）干预观察治疗效果,分析其抑制该氧化应激反应的过程,并探讨SalB的药理机制。方法1.采用MTT法筛选对HUVEC无毒性的SalB药物干预浓度;后采用Ang II干预HUVEC建立氧化应激反应模型,用相对应的荧光探针检测活性氧（ROS）、一氧化氮（NO）和细胞内钙离子浓度变化,TAB法检测丙二醛（MDA）含量;2.Western Blot法检测细胞内p-ERK1/2、ERK1/2、p-JNK、JNK、p-p38、p38、PI3K、p-AKT、AKT、p-NRF2、NRF2、NOX2、HO-1蛋白的表达水平。结果1.MTT检测显示,25μM、50μM、100μM的SalB干预HUVEC对细胞活力影响无统计学差异,表明所采用浓度对HUVEC无毒性。与Control组比较,HUVEC经1μM Ang II诱导后,细胞内ROS水平和MDA... 

【文章来源】：福建中医药大学福建省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩略词表
引言
实验材料与方法
    1 实验材料
        1.1 实验细胞株
        1.2 药物与制备
        1.3 实验试剂及耗材
        1.4 实验仪器
        1.5 实验使用试剂的配制方法
    2 实验方法
        2.1 HUVEC传代和换液
        2.2 HUVEC冻存
        2.3 HUVEC复苏
        2.4 HUVEC实验分组
        2.5 HUVEC计数和接板
        2.6 MTT实验
        2.7 活性氧（ROS）测定方法
        2.8 一氧化氮（NO）测定方法
        2.9 丙二醛（MDA）含量测定方法
        2.10 激光共聚焦实验检测细胞内钙离子的变化
        2.11 蛋白免疫印迹法（Western Blot）
    3 统计学处理
实验结果
    1 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC氧化应激的作用
        1.1 丹酚酸B对 HUVEC活力的影响
        1.2 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC内 ROS表达情况的影响
        1.3 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC上清液中MDA含量的影响
        1.4 丹酚酸对Ang Ⅱ诱导的HUVEC内 NOX2 蛋白活化的影响
        1.5 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC内 NO表达情况的影响
    2 丹酚酸B调控Ang Ⅱ诱导的HUVEC相关信号通路活化
        2.1 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC钙离子浓度变化的影响
        2.2 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC的PI3K/AKT信号通路相关蛋白活化的影响
        2.3 丹酚酸对Ang Ⅱ诱导的HUVEC的MAPK信号通路活化的影响
        2.4 丹酚酸对Ang Ⅱ诱导的HUVEC的NRF2/ HO-1 信号通路活化的影响
讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
作者简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]丹酚酸B对高糖诱导心肌成纤维细胞增殖及转分化的作用研究[J]. 王娜,隋海娟,符丽娟.  中国药理学通报. 2020(03)
[2]丹参化学成分及其药理作用研究进展[J]. 万新焕,王瑜亮,周长征,郭浩,马山,王立柱.  中草药. 2020(03)
[3]1990和2017年中国与全球心血管病疾病负担研究[J]. 王媛,曹新西,侯亚冰,徐晨婕,曹志,李书,王耀刚.  中国慢性病预防与控制. 2020(01)
[4]从“血脉同治”角度论高血压病的治疗[J]. 张晓燕,朱明军,李彬,赵亮亮,孙阳.  中国民间疗法. 2019(21)
[5]中医药治疗心血管疾病研究述评[J]. 毛静远,赵志强,王贤良,毕颖斐,张伯礼.  中医杂志. 2019(21)
[6]高血压的治疗进展[J]. 刘敏科,金华,韩艳萍,王琼,苏丽丽,包红辉.  西部中医药. 2019(10)
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[10]银杏叶提取物通过激活PI3K/AKT通路抑制IL-1β诱导血管内皮细胞的凋亡[J]. 刘阳,李雪苓,李延恩.  临床和实验医学杂志. 2019(04)



本文编号：3011440