紫甘薯多糖的制备及结构初步分析

发布时间：2021-02-21 18:24

　　多糖具有抗肿瘤、调节免疫、抗氧化、抗病毒、降血糖等多种生物活性与药理作用,其作用机理通常与多糖的结构有着紧密的关系。由于多糖种类繁多,结构复杂,因此人们对多糖的结构、活性、构效关系方面还在进行着不断的探索和研究。甘薯[Ipomoea batatas（L.）Lam.]是甘薯属旋花科一年或多年生草本植物,《本草纲目》中记载,甘薯性平、味甘、无毒、益气力、健脾胃、补虚乏、强肾阴。紫色甘薯作为甘薯中的一种特殊品种,是日本在20世纪90年代培育出的一种甘薯新品种,已有较广泛的研究和应用。本文以紫甘薯为研究对象,通过提取分离纯化得到紫甘薯多糖,并对其结构进行较为全面的解析,初步考察对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用,为后续探究结构与生物活性的关系提供有力的依据。紫甘薯粗多糖提取条件为:液料比为20:1、提取温度80℃、提取时间2小时、提取次数1次以及醇沉浓度75%,在此提取条件下获得紫甘薯粗多糖,提取率为6.1%,多糖含量为45.61%。紫甘薯粗多糖进一步经Sevag法脱蛋白、硅藻土吸附法除色素,得到了多糖含糖量为69.12%的紫甘薯多糖（PSPP）。PSPP经纤维素DEAE-52层析柱纯化,得到了两种... 

【文章来源】：哈尔滨商业大学黑龙江省

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
绪论
    1.1 紫甘薯的研究现状
        1.1.1 紫甘薯概述
        1.1.2 紫甘薯成分研究
        1.1.3 紫甘薯的保健作用
    1.2 多糖结构研究进展
        1.2.1 多糖的概述
        1.2.2 多糖的提取
        1.2.3 多糖的分离纯化
        1.2.4 多糖初级结构分析
        1.2.5 多糖高级结构分析
    1.3 本课题来源及研究的目的意义
        1.3.1 课题来源
        1.3.2 本课题的研究目的及意义
    1.4 本课题的研究内容
2 紫甘薯多糖的提取、分离纯化及理化性质
    2.1 引言
    2.2 实验材料与仪器
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 主要仪器
        2.2.3 主要试剂
    2.3 实验方法
        2.3.1 紫甘薯粗多糖的制备
        2.3.2 紫甘薯粗多糖蛋白含量测定
        2.3.3 紫甘薯粗多糖除色素
        2.3.4 紫甘薯粗多糖除蛋白
        2.3.5 紫甘薯多糖紫外光谱扫描
        2.3.6 紫甘薯粗多糖含量测定
        2.3.7 DEAE-52 阴离子交换层析柱分离纯化
        2.3.8 Sephacryl S-300 凝胶层析柱分离纯化
        2.3.9 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa理化性质
    2.4 实验结果与分析
        2.4.1 紫外光谱分析
        2.4.2 紫甘薯多糖分离纯化
        2.4.3 多糖含量测定
        2.4.4 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa的理化性质
    2.5 本章小结
3 紫甘薯多糖的初级结构解析
    3.1 引言
    3.2 实验材料与仪器
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 主要仪器
        3.2.3 主要试剂
    3.3 实验方法
        3.3.1 样品的能谱分析
        3.3.2 红外光谱检测
        3.3.3 拉曼光谱检测
        3.3.4 纯度分析及分子量测定
        3.3.5 样品的甲基化
        3.3.6 核磁共振（NMR）分析
    3.4 实验结果分析
        3.4.1 EDS图谱分析
        3.4.2 红外光谱分析
        3.4.3 拉曼光谱分析
        3.4.4 纯度及分子量测定结果
        3.4.5 甲基化结果
        3.4.6 核磁共振波谱分析
    3.5 本章小结
4 紫甘薯多糖的高级结构解析
    4.1 引言
    4.2 实验材料与仪器
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 主要仪器
        4.2.3 主要试剂
    4.3 实验方法
        4.3.1 刚果红实验
        4.3.2 热特性测定实验
        4.3.3 粒径及电位测定实验
        4.3.4 X-射线衍射（XRD）测定实验
        4.3.5 圆二色谱（CD）扫描测定实验
        4.3.6 场发射扫描电镜（FE-SEM）观测
        4.3.7 原子力显微镜（AFM）观测
    4.4 实验结果与分析
        4.4.1 刚果红实验结果
        4.4.2 热特性实验结果
        4.4.3 粒径及电位实验结果
        4.4.4 X-射线衍射实验结果
        4.4.5 圆二色谱实验结果
        4.4.6 扫描电镜实验结果
        4.4.7 原子力显微镜实验结果
    4.5 本章小结
5 紫甘薯多糖对肿瘤细胞的增殖的影响
    5.1 引言
    5.2 实验部分
        5.2.1 实验仪器
        5.2.2 实验试剂
        5.2.3 肿瘤细胞系
        5.2.4 试剂配制
    5.3 实验方法
        5.3.1 细胞培养
        5.3.2 MTT法检测细胞活力
    5.4 实验结果
        5.4.1 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa对人乳腺癌MCF-7 细胞增殖的影响
        5.4.2 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa对人胃癌SCG-7901 细胞增殖的影响
        5.4.3 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa对人胃癌HCG-27 细胞增殖的影响
        5.4.4 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa对人结肠癌LOVO细胞增殖的影响
        5.4.5 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa对人肝癌HepG2 细胞增殖的影响
    5.5 本章小结
6 讨论
    6.1 紫甘薯多糖的制备
    6.2 紫甘薯多糖的初级结构鉴定
    6.3 紫甘薯多糖的高级结构鉴定
    6.4 紫甘薯多糖对肿瘤细胞增殖的影响
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3044741